Грибок кожи фото у человека: Грибковые заболевания кожи: фото, названия и лечение

Содержание

Грибок на теле * Клиника Диана в Санкт-Петербурге

Грибок на теле – это группа заболеваний, которые развиваются в результате заражения грибковыми микроорганизмами. Эти болезни в медицине называют микозами. Чаще всего микозы поражают кожные покровы или слизистые оболочки, однако могут также появляться на ногтях и волосах. При этом грибок на коже тела заразен, поэтому важно на ранней стадии определить заболевание и начать лечение.

В клинике «Диана» опытные дерматологи помогут избавиться от кожного грибка на теле быстро, качественно, комфортно.

Как выглядит грибок на теле?

Содержание статьи

Грибковая инфекция проявляется комплексом симптомов, которые существенно снижают качество жизни человека. Медицине известны десятки разновидностей грибковой инфекции. Каждый тип микоза проявляется по-разному и локализируется на разных частях тела. В большинстве случаев микоз на теле принимает вид пигментного пятна с четко очерченными краями. Поражение обычно имеет правильную округлую форму и выступает над уровнем здоровой кожи. В зоне поражения кожа принимает ярко-красный, алый или коричневый окрас, появляется шелушение, иногда беспокоит зуд.

Микозы в области стоп проявляются в виде локального шелушения кожи. Она становится очень тонкой, а в зоне поражения появляются трещины, эрозии, которые долго не заживают. Грибок на коже стоп часто распространяется на ногтевую пластину, вызывая ее гниение и расслаивание.

Зуд на теле

Руки в язвах

Микоз

Высыпания

Разные типы грибков размножаются на коже, покрытой волосами. Этот вид болезни характеризуется появление пятен с обильным шелушением и сухостью кожи. При этом волосы теряют блеск, становятся ломкими, тонкими. Зона поражения покрывается желтоватым налетом и очень чешется, что приводит к травмированию дермы. Грибковые пятна принимают розовый оттенок и часто становятся причиной очагового облысения.

От чего появляется грибок на теле?

Основная причина развития грибка на коже тела – заражение грибковыми спорами. Грибок в виде пятен на теле появляется после тесного контакта с инфицированным человеком, животным или предметом. Механизмы передачи микозной инфекции:

  • проникновение спор через дыхательные пути;
  • контактно-бытовое заражение – через рукопожатие, объятия, поцелуи, общие предметы обихода;
  • при тактильном контакте с зараженной почвой, водой, пищей;
  • проникновение микроорганизмов через микротравмы на коже человека и зоны избыточного потоотделения.

Рукопожатие

Поцелуй

Грязная вода

Потливость

Заражение происходит при игнорировании правил личной гигиены, особенно в общественных местах. Например, после посещения сауны или бассейна пациенты часто жалуются на появление белых пятен – это грибок. При посещении общественных мест рекомендуется использовать отдельные полотенца, тапочки, постельное белье, дезинфицировать кожу с помощью специальных растворов.

Грибок тела: причины

В норме от размножения болезнетворных грибков человека защищает иммунная система. Поэтому активное деление микроорганизмов и внешнее инфицирование происходит обычно при ослаблении иммунитета. Защитные механизмы дают сбой при:

  • перенесении тяжелых болезней, операций;
  • после курса химиотерапии;
  • нарушение обмена веществ;
  • заражении ВИЧ;
  • прогрессировании аутоиммунных заболеваний;
  • длительной терапии антибиотиками;
  • изменении микрофлоры половых путей и желудочно-кишечного тракта;
  • приеме гормональных препаратов.

Когда иммунитет ослаблен, происходит резкий рост грибковых штаммов, жизнедеятельность которых негативно влияет на состояние кожи и тканей организма.

Внешние факторы, которые могут вызвать микозное поражение:

  • игнорирование правил личной гигиены;
  • несоблюдение рекомендаций врач после хирургического вмешательства;
  • микоз половых органов;
  • ожирение и избыточное потоотделение;
  • игнорирование травм, эрозий, язв кожных покровов;
  • психологическое переутомление и неврозы;
  • плохое питание, недостаток витаминов и микроэлементов;
  • индивидуальная предрасположенность организма к микозам;
  • специфика трудовой деятельности (например, работа с землей, населенной спорами грибка).

Несоблюдение гигиены

Ожирение у женщины

Работа с землей

Беременность и грибок на теле часто сопровождают друг друга. Во-первых, при беременности кардинально меняется гормональный фон, что влияет на иммунитет. Во-вторых, на фоне изменения состава микрофлоры половых путей у пациенток может развиваться кандидоз (молочница).

Грибок на теле: симптомы

Грибок на теле человека проявляется комплексом симптомов. Конкретные клинические проявления зависят от типа возбудителя. Но общими симптомами микозной инфекции выступают:

  • пятна пигментного типа красного, коричневого, белого, розового цвета;
  • зуд в области поражения;
  • интенсивное шелушение воспаленной кожи;
  • появление сопутствующих высыпаний;
  • образование язв, трещин, которые не заживают;
  • появление мокнущих ран;
  • соединение нескольких очагов в единое пространство;
  • постоянная боль в зоне поражения;
  • желтоватый или белый налет на коже;
  • неприятный запах от пораженных участков.

Грибок тела и признаки болезни зависят от зоны поражения, то есть к общим проявлениям добавляются специфические симптомы:

  • кожа головы – избыточное отделение кожного сала или чрезмерная сухость, перхоть;
  • ногтевая пластина – расслоение и крошение ногтя, гнойный запах, желтый оттенок;
  • стопы – жжение, сильный зуд, пузырчатая сыпь между пальцами, распространение грибка по всему телу;
  • системное поражение гладкой кожи – большие гиперемированные зоны, интенсивное шелушение, трещины и раны, экземное поражение.

Перхоть на волосах

Грибок на стопах

Пораженный ноготь

Иногда микозная болезнь сопровождается общими симптомами:

  • повышение температуры тела;
  • интоксикация организма;
  • длительный кашель неясной природы;
  • ринит, не поддающийся лечению обычными методами;
  • постоянная слабость.

Симптомы грибка кожи на теле проявляются сразу после инфицирования, реже на поздней стадии болезни.

Виды грибков на теле человека

Существует несколько сотен типов грибковых заболеваний, видовая принадлежность которых зависит от рода возбудителя:

  • Microsporum, Trichophyton поражает ногти, волосы, кожные покровы, провоцируя дерматомикоз;
  • Candida поражает слизистые оболочки, чаще половых путей, вызывая кандидоз;
  • Malassezia furfur провоцирует себорейный дерматит, поражает волосы и ногтевую платину.

Грибок Кандида

Дрожжеподобные грибки

В медицинской практике чаще всего встречаются такие виды грибков на теле человека:

  • Рубромикоз. Патология развивается после заражения красным трихофитоном. В зоне поражения – кожа стоп и рук, межпальцевое пространство, ногтевые платины. Инфекция проявляется красными грибком на теле в виде шелушащихся пятен. На поздней стадии болезни в зоне поражения появляются мелкие папулы и узелки;
  • Микроспория. Возбудитель болезни микроорганизм рода микроспорум. Эта болезнь поражает участки тела, покрытые мелкими волосками. Очаг поражения имеет правильную округлую форму. Пораженные участки окрашены в темно-желтый цвет, а на солнце могут несколько светлеть. Поэтому болезнь называют солнечный грибок на теле. Воспаленная зона гиперемирована и покрыта мелкими пузырьками, чешуйками. Болезнь проявляется единичными воспаленными пятнами, в осложненных случаях появляется сразу несколько пораженных зон;
  • Трихофития. Заболевание поражает открытые зоны кожных покровов (лицо, плечи, руки). Грибок Trichophyton на других частях тела встречается редко (только в запущенных случаях). Проявляется болезнь в виде крупных пятен алого цвета с воспаленными краями. Иногда пораженные участки шелушатся, чешутся. В тяжелых случаях грибковая инфекция сопровождается нагноением, образованием абсцессов. Заболевание очень заразно, поэтому требует особых мер личной гигиены;
  • Себорейный дерматит. Патологию вызывают споры липофильных грибов. Болезнь поражает кожу и участки, покрытые волосами (голова, лобок, ресницы, область усов). В районе волосяного покрова образуются воспаленные участки, которые шелушатся или покрываются корочками. Железы начинают продуцировать больше кожного сала. Липофильный грибок на теле чешется, поэтому на их месте образуются расчесы, которые опасны присоединением вторичной инфекции;
  • Дрожжевой грибок. В некоторых случаях появление неприятных признаков на теле вызывают микроорганизмы рода Candida. Этот тип грибов чаще поражает слизистые оболочки, но в запущенных случаях инфекция распространяется на кожные покровы. В зоне поражения появляются небольшие красные пятна с мелкими пузырьками. С развитием болезнь цвет пятен становится более ярким, появляются эрозии, отслаивается ороговевшая кожа.

Кожное поражение может перейти в форму глубокого микоза, при котором страдают внутренние органы и кости. Подкожный грибок на теле поражает жировую клетчатку, далее слизистые оболочки, ткани нервной системы. Характерный признак глубокого микоза – появление свищей, ран, бородавок на коже.

Часто грибок на теле появляется от пота, из-за активного размножения дрожжевых грибков типа малассезия. Это заболевание называют цветной грибок на теле, поскольку спина, плечи, подмышки покрываются пятнами разного цвета (коричневый, красный, темно-розовый). Пораженные участки зудят, шелушатся, покрываются чешуйками.

Лечение грибка на теле

Лечить микозы следует комплексно под контролем специалиста дерматолога. Если специалист не может поставить диагноз по внешним проявлениям, разновидность микоза определяется при помощи лабораторной диагностики. Точно определив тип возбудителя, врач назначит эффективное лечение.

Терапия состоит из таких направлений:

  • Лекарственные средства для наружного применения. Начинают лечение с применения наружных противогрибковых средств (антимикотиков). Эти препараты выпускаются в форме мазей, кремов, лосьонов. Выбор противогрибкового средства зависит от вида возбудителя и его чувствительности к лекарственным средствам. Также пациенту могут назначать мази с размягчающим, отшелушивающим, противовоспалительным действием. Для облегчения состояния больного врач может дополнительно рекомендовать настои и отвары лекарственных трав в виде компрессов или ванночек.  
  • Лекарственные средства для внутреннего применения. Иногда антимикотики назначаются в виде таблеток для приема внутрь. Также пациенту могут быть прописаны антигистаминные препараты, иммуномодуляторы, витамины.
  • Физиотерапия. После снятия острых кожных проявлений, дерматолог может рекомендовать физиотерапевтические процедуры. Для лечения грибка на теле применяется светотерапия, фототерапия, лазерное воздействие. Все эти методы активируют местные обменные процессы, запускают регенерацию тканей, обладают бактерицидным действием.
  • Диетотерапия. Соблюдение диеты помогает ускорить лечение микоза. Разрабатывая рацион, предпочтение следует отдавать продуктам, способствующим укреплению иммунитета и активации регенеративных процессов. На время лечения специалисты рекомендуют отказаться от сладостей, простых углеводов, белого хлеба. В рацион желательно включить такие компоненты – чеснок, гвоздика, корица, лимон, корень имбиря, хрен, кисломолочные продукты.

Мазь от грибка

Противогрибковый шампунь

После того, как симптомы микоза проходят, многие пациенты прекращают лечение. Это ошибка, поскольку после завершения лечения, симптомы могут вернуться. Терапия должна продолжаться, пока не завершится курс лечения, назначенный дерматологом.

Заметив первые симптомы грибка тела, следует немедленно обратиться к врачу-дерматологу. В клинике «Диана» в Санкт-Петербурге прием ведут дерматологи высшей врачебной квалификации.  

ОНЛАЙН-ЗАПИСЬ в клинику ДИАНА

Вы можете записаться по бесплатному номеру телефона 8-800-707-15-60 или заполнить контактную форму. В этом случае мы свяжемся с вами сами.

    

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter

Поделиться ссылкой:

Грибковые поражения кожи — фото и лечение заболеваний

Вся информация на сайте носит исключительно ознакомительный характер и требует обязательной дополнительной консультации с Вашим лечащим врачом.
Существует целая группа инфекционных заболеваний, причиной развития которых являются болезнетворные грибки. Классификация их осуществляется по разным критериям, проще всего грибковые поражения кожи классифицировать по глубине поражения дермы, а также по зоне дислокации.

Виды грибковых заболеваний кожи

От глубины поражения кожного покрова различают три большие группы заболеваний:

  1. Кератомикозы.
  2. Дерматофитии.
  3. Глубокие микозы.

Кератомикозы

Если наблюдаются поражения верхних слоев дермы, диагностируются кератомикозы. К этой группе заболевания относится разноцветный лишай и узловатая трихоспория.

Спровоцировать появление разноцветного лишая может патогенный грибок, который постоянно живет в организме человека. Он становится болезнетворным при ослабевании иммунитета. Сначала на коже человека появляются розовые пятнышки, потом они постепенно меняют цвет и становятся светло-коричневыми. Со временем высыпания теряют свою окраску, но кожа продолжает на пораженном участке шелушиться. На солнце кожа, пораженная разноцветным лишаем, не загорает, поэтому на участке смуглой кожи отчетливо видны светлые пятна.

Узловатая трихоспория (пьедра) в России встречается крайне редко. Это заболевание провоцирует грибок, который поражает верхние слои дермы и волосяной покров (волосы на голове, борода и усы). Симптомы пьедры весьма характерны: сначала вокруг каждого волоска образуется муфта. Она бывает черного или белого цвета. В муфте живут и развиваются болезнетворные грибки. Со временем муфты склеиваются между собой, образуются плотные узелки, которые легко прощупываются пальцами. Если муфта имеет черный цвет, волосы часто обламываются. Белые муфты не вызывают процесс облысения пораженного участка. Данное заболевание носит хронический характер, лечится достаточно тяжело. Единственный способ навсегда избавиться от проблемы – несколько раз сбрить полностью волосяной покров. А потом применить медикаментозное лечение, помогающее подавить патогенную среду.

Дематофитии

Когда наблюдаются поражения средних слоев кожи, диагностируются дерматофитии. Такие грибковые поражения практически всегда сопровождаются воспалительными процессами. Различают три формы дерматофитии:

  • Трихофития.
  • Микроспория.
  • Микоз гладкой кожи.

Трихофития – грибок кожи рук, стоп и тела, который передается от больного человека контактным путем. Возбудителем инфекции становится грибок Trichophyton. Он вызывает поверхностное поражение покрова, на теле зараженного человека сначала появляются розовые пятнышки, которые через пару дней начинают активно шелушиться. Потом на месте шелушения появляются корочки, под ними рождается воспалительный процесс, и формируются инфильтраты. Инфильтраты заполнены лимфой, иногда в ней появляются примеси крови. При игнорировании лечения инфильтрат начинает гноиться, гной сочится, пораженные участки увеличиваются в размерах. И так как они – одна сплошная открытая рана, она становится источником бактериального заражения. А оно – прямой путь к развитию сепсиса и заражения кожи.

Возбудителем микроспории являются простейшие из рода Microsporum. Человек заражается во время общения с домашними животными, чаще всего микроспорией болеют дети, которые любят возиться с кошечками и собачками. Симптомы микроспории у человека схожи с симптомами трихофитии. Отличия лишь в дислокации поражения. Поражаются пушковые волосы на голове.

Микоз гладкой кожи – заразное заболевание, передается от человека к человеку. Первые очаги появляются на поверхности кожи между пальцами рук и ног, затем инфекция распространяется на дерму бедер, на лицо, на голову больного человека. На коже появляются характерные покраснения, они сильно зудят, зуд со временем только усиливается, начинается шелушение, в складках между пальцами образуются опрелости, а потом трещины и ссадины, которые становятся источниками бактериальной инфекции. Напрямую связаны симптомы и лечение кожного грибка. Терапия микозов носит комплексный характер, в протоколах значатся назначение местных мазей и прием системных препаратов. Местное лечение позволяет избавляться от зуда, от трещин и ссадин, других видимых дерматологических изменений. Действие системных препаратов направлено на уничтожение причины заболевания. Для лечения грибка кожи чаще всего используется «Флюконазол», «Кетоконазол» или «Тербинафин». Терапия всегда длительная, с перерывами. Большую роль в полном излечении играет профилактика грибковых заболеваний.

Глубокие микозы

Когда поселяется грибок на коже человека, он разрушает верхние ее слои. В редких случаях подобные патологии сопровождаются поражением слизистых тканей, внутренних органов. Это достаточно опасное явление, симптомы и лечение всегда взаимосвязаны. Различают три разновидности глубоких микозов у человека:

  • Подкожные. Они вызывают поражение ткани и систему лимфоузлов, проникают туда через поврежденные участки кожи или через легкие путем вдыхания простейших извне.
  • Системные. Связаны с развитием респираторных инфекций. Патогенные организмы проникают сначала в легкие, а оттуда в кровеносную систему. Кровь разносит болезнь по всему организму, поэтому может появиться не только грибок на теле, микоз может поражать разные внутренние органы. Любой кожный системный микоз лечится сложно, длительно и обязательно с применением противогрибковых препаратов.
  • Оппортунистические. Возбудителями являются условнопатогенные грибки, живущие внутри человеческого организма. Они становятся патогенными тогда, когда снижается иммунитет у человека. Протекают как моноинфекция. В зависимости от возбудителя классифицируются три типа инфекции.

Если активизируются дрожжеподобные простейшие из отряда Candida, возникает кандидоз – грибок кожи, слизистых, внутренних органов. При поражении кожи возникают следующие симптомы: рождаются очаги воспаления, имеющие ярко-выраженную отечность. На их месте появляются сначала везикулы, потом папулы и мокнущие эрозии. Чаще всего очаги появляются в подмышечных впадинах, в паховой области, в области под грудями. Следующее фото у начала абзаца наглядно показывает, как выглядит грибок на теле человека. В данном случае у больной была диагностирована везикулезная форма кандидоза. Для нее характерно наличие большого количества мелких пузырьков, папул и пустул. Они активно «цветут» на фоне воспаления покрова.

Лечится кожный кандидоз противогрибковыми антибиотиками («Нистатин», «Леворин»), лекарства группы азолов («Циклопирокс» или «»Флуконазол»), препараты ундециленовой кислоты. Медикаментозное лечение обязательно комбинируют с местным. Покраснения на коже человека обрабатываются противогрибковыми мазями. Дозы и длительность лечения должен определять врач. Он обязательно учитывает тяжесть заболевания, следит за эффективностью назначенного лечения. При необходимости вводит корректировки. Когда диагностируется грибок кожи, лечение не может быть коротким, неправильно подобранная терапия приводит к возникновению рецидивов кандидоза.

Если возбудителем инфекции являются плесневелые грибы (аспергиллы), диагностируется аспергиллез. В процесс инфицирования чаще всего вовлекаются слизистые оболочек, внутренние органы и кожа. Симптомы аспергиллеза кожи хорошо описаны. Сначала на дерме появляются эритемы, развивается инфильтрация, следующая стадия – появление коричневатых чешуек. Больного беспокоит умеренный зуд. Подтвердить диагноз способен опытный миколог. Одного сбора анамнеза ему не хватает, поэтому врач назначает комплекс лабораторных исследований. У больного берут скобы с гладкого слоя дермы, с помощью микроскопии изучают культуральный посев, обязательно проводится серологическое исследование. Если грибок на теле проходит идентификацию и диагноз подтверждается, больному применяется противогрибковое лечение. Оно состоит из антифунгальной терапии, которая проводится препаратами «Вориконазол» или «Каспофунгин», «Амфотерицин В» или «Итраконазол». В зависимости от тяжести заболевания препараты могут быть назначены внутрь или внутривенно. Параллельно проводится местная терапия – обработка пораженных участков мазями-антисептиками, противогрибковыми средствами. Курс – до восьми недель.

Если возбудителем инфекции являются грибы класса «Zygomycetes», диагностируется фикомикоз. Это самая опасная для человека инфекция, возбудитель может проникнуть в организм через продуты питания, через кожу при нанесении татуировок, во время укусов насекомых. Известны случаи заражения пациентов через медицинские инструменты. Когда развивается кожная форма инфекции, на коже человека появляются болезнетворные язвы черного цвета. Они указывают на развитие некротических процессов. Они всегда сопровождаются проявлениями лихорадки. Очаги поражения способны появиться и на глазу, и на шее фото наглядно демонстрирует, как уродует болезнь человека.

Так как подобный грибок на теле вызывает необратимые изменения, лечение должно быть очень интенсивным и незамедлительным. Оно носит комплексный характер, больному прописывается медикаментозная противогрибковая терапия, производится лечение сопутствующих заболеваний, пораженные участки удаляются хирургическим путем.

Чем опасны простейшие?

Некоторые грибки годами живут в организме человека, а потом при формировании благоприятной среды активируются, начинают активно размножаться. Другие грибки обитают в окружающей среде. Именно они попадают на кожу человека контактным путем. Инфицирование может произойти, если организм человека ослаблен течением какого-нибудь хронического заболевания, если есть в наличие заболевания эндокринной системы, если человек пренебрегает правилами личной и общественной гигиены. Во время свой жизнедеятельности простейшие микроорганизмы выпрыскивают ферменты, разрушающие кератины – главные строительные компоненты рогового слоя кожи, волос и ногтевых пластин. Эти же ферменты разрушают белки (коллаген и эластин), грибковая инфекция быстро распространяется. Игнорирование проблемы может спровоцировать опасные осложнения.

Любые грибковые заболевания кожи опасны тем, что они нарушают энергетическое обеспечение клеток, формируют дефицит веществ, необходимых для их строения. В результате возникают структурные изменения кожи, нарушения ее функций. Главная функция кожи – барьерный щит, который защищает организм от проникновения и внедрения инфекционных агентов извне. Если он ослаблен, даже самый сильный иммунитет не справиться с внешними атаками, если кожный покров будет сильно поврежден.

Кроме этого, грибковое поражение кожи способно спровоцировать развитие аллергических реакций. Таким образом организм реагирует на скопление продуктов жизнедеятельности простейших. Когда недуг протекает на фоне хронического заболевание, положение больного усугубляется, учащаются рецидивы болезней, а традиционное лечение не приносит нужных результатов. Нередко грибковые поражения осложняются бактериальными воспалительными процессами, которые приводят к появлению рожистого воспаления или к слоновости. Вот почему при первых подозрениях на микоз необходимо обязательно обращаться к профильному врачу.

Лечить самостоятельно грибок на теле нельзя. Из материала, изложенного в статье, становится понятным, насколько важно на самом раннем этапе правильно определить возбудителя инфекции и подобрать соответствующую медикаментозную терапию. Сделать это может только миколог, опираясь на данные лабораторных анализов. Только он способен в линейке противогрибковых средств найти то, что окажется наиболее эффективным в каждом конкретном случае.

Большую роль в достижении положительных результатов в лечении грибка кожи играет профилактика повторного заражения. Важно держать в чистоте кожные покровы. Участки тела, где встречается наибольшее скопление секрета потовых желез (подмышечные впадины, шея, ноги) необходимо мыть каждый день с мылом и теплой водой. Во время приема водных процедур стоит отказываться от использования хозяйственного мыла. Оно сильно сушит кожу и способствует появлению раздражения. Если наблюдается чрезмерная потливость, важно сбривать волосы в паху и в подмышечных впадинах. Особого ухода требуют те участки кожи, где появляются морщины. После общего ухода целесообразно их дважды в неделю обрабатывать питательными кремами. Особое значение имеет уход за ногтями.

Виды грибка поражающие пластины ногтей на руках и ногах

Грибковые заболевания лидируют среди инфекций человека. Один из пяти жителей планеты страдает грибком в той или иной форме. Почему мы заражаемся и как противостоять болезни?

В последнее десятилетие наблюдается стремительный рост заболеваний в связи с такими факторами:

  • Ухудшение экологической обстановки;
  • Понижение защитных сил организма из-за стрессов, несбалансированного питания, неправильного образа жизни;
  • Снижения качества жизни.

Атаке болезнетворных грибов подвергаются ногти на ногах и руках, кожные покровы, внутренние органы и слизистые оболочки взрослых и детей. Зачастую заболевания вызывают такие виды грибка.

Грибы рода Epidermophyton, Trichophyton, Microsporum. Провоцируют дерматомикозы кожи, волос, ногтей.

Грибы рода Candida. Приживаются на слизистых оболочках наружных и внутренних органов, кожных покровах, под ногтями. Вызывают системные и локальные кандидозы.

Грибы рода Malassezia furfur. Вызывают кератомикозы верхних слоев эпидермиса, волосяных фолликулов.

Плесневые грибы рода Thamnidium, Mucor,Sclerotina, Rhizopus,Aspergillus, Penicillium, Alternaria, Cladosporium. Вызывают поражения кожи и ногтей на руках и ногах.

Такие виды грибка кожи, как трихофитон, микроспорум и эпидермофитон становятся причиной развития дерматомикозов – наиболее распространенных грибковых заболеваний. К этой группе поражений эпидермиса относятся рубромикоз, микроспория, паховая эпидермофития.

Рубромикоз поражает эпидермис подошв, ладоней, пушковые волосы, ногти. Обычно заболевание проявляется сухостью кожи стоп и кистей, шелушением и огрубением эпидермиса на пораженных участках без ощущения зуда и жжения. Если же грибок поражает тыльную поверхность стоп, образуются бляшки с гнойными воспалениями и шелушением. Такие образования сопровождаются сильным зудом.

Рубромикоз в активной форме имеет такие симптомы:

  • появление округлых очагов воспаления синевато-розового цвета и сильное шелушение в случае поражения стоп и кистей;
  • сильные расчесы в результате зуда при руброфитии кожных складок;
  • крупные пятна красноватого цвета с папулами и шелушением, если грибок поразил голени, бедра, ягодицы.

Часто руброфития становится провоцирующим фактором развития других заболеваний кожного покрова: красной волчанки, дерматита Дюринга и других.

Главный источник рубромикоза – зараженный человек. Передача грибка происходит через предметы личной гигиены.

Риск заболеть возрастает, если присутствуют такие факторы:

  • ослабленный организм;
  • повышенная температура;
  • длительный прием антибиотиков или иных агрессивных групп медикаментов;
  • высокая влажность окружающей среды.

Микроспория поражает кожные покровы и волосистую часть головы.

При поражении гладкой кожи грибком наблюдаются следующие симптомы:

  • образование на поверхности дермы пятен правильной формы розоватого оттенка с шелушением внутри;
  • возможно слияние многочисленных грибковых образований;
  • поражение пушковых волос;
  • увеличение лимфатических узлов за ушами, на шее, затылке.

Микроспория волосистой части головы характеризуется появлением небольших очагов округой формы с четкими границами. Кожный покров в местах поражения грибком имеет розоватый оттенок и покрыт чешуйками, длина волос не более 4-6 мм.

Источником микроспории могут быть:

  • больные люди;
  • зараженные животные, преимущественно кошки и собаки.

Инфицирование грибком происходит в местах большого скопления людей или в домашних условиях. Заболеванию в основном подвержены дети от 4 до 11 лет.

Болезнь вызывает поражения подмышечных и паховых складок эпидермиса и прилегающих к ним областей. Реже грибок выбирает местом обитания кожу между пальцами и ногти на ногах.

Для заболевания характерно образование розовых шелушащихся пятен не более 1 см в диаметре с постоянным зудом. Эпидермофитии больше подвержены мужчины. Избыточный вес, опрелости кожи, повышенная потливость и несоблюдение правил гигиены увеличивают шансы «подхватить» заболевание.

Разные виды грибка кандида находятся в теле абсолютно здоровых людей, не вызывая заболеваний. Местом обитания одноклеточные организмы выбирают полость рта и желудочно-кишечный тракт.

Безобидные микроорганизмы могут стать условно-патогенными при резком снижении защитных сил организма человек по причинам:

  • тяжелых инфекций;
  • сахарного диабета;
  • иммунодефицитного состояния;
  • злокачественных образований;
  • длительного лечения антибиотиками.

Кандидоз может поражать гладкую кожу и ее придатки, полость рта, слизистую желудочно-кишечного тракта, мочеполовую систему.

На коже заболевание рода кандида характеризуется такими симптомами:

  • Появление очагов шелушения и отслоения кожи в случае кандидоза стоп и кистей.
  • Поражение кожи сопровождается зудом, жжением, трещинами – кандидоз межпальцевых складок.
  • Припухлость и покраснение вокруг ногтя, утолщение и изменение цвета ногтевой пластины – грибковое поражение ногтей на руках и ногах.

Грибковые заболевания чреваты многочисленными рецидивами и зачастую сложно поддаются лечению. Обнаружив у себя первые признаки болезни, нужно обратиться к специалисту. Только после визуального осмотра и получения результатов лабораторных анализов будет подобрана наиболее эффективная схема терапии.

Все виды грибковых заболеваний лучше лечить комплексно. Для этого применяются:

  • противогрибковые средства местного и общего действия;
  • препараты для укрепления иммунной системы организма.

Грибок кожи и ногтей успешно поддается лечению с помощью наружных противогрибковых средств: мазей, лосьонов, кремов, спреев.

Местная терапия имеет свои особенности. При наличии отека, сильном поражении кожи, мокнущих пятнах, присоединении вторичной инфекции нужно использовать медикаменты с антибиотиками и кортикостероидами. Чаще всего назначают «Тридерм», «Микозолон».

При отсутствии острого воспалительного процесса предпочтительно наносить препараты, останавливающие размножение конкретных видов грибка или убивающие микроорганизмы. Это могут быть «Клотримазол», «Метранидозол», «Миконазол».

Препараты для внутреннего применения от грибка на коже применяются только по назначению врача при тяжелых формах недуга. Они значительно увеличивают вероятность полного излечения. К наиболее эффективным средствам можно отнести «Флуконазол», «Кетоконазол», «Тербинафин».

Чтобы различные виды грибковых заболеваний обходили стороной, нужно придерживаться ряда правил:

  • тщательно вытирать кожу после водных процедур;
  • Регулярно менять постельное и нательное белье, полотенца;
  • гладить вещи, постель и полотенца, так как высокая температура убивает болезнетворные микроорганизмы;
  • при посещении саун, бань, бассейнов надевать свои резиновые тапочки;
  • отдавать предпочтение одежде из натуральных материалов;
  • не пользоваться чужими предметами личной гигиены;
  • вести здоровый образ жизни;
  • укреплять иммунную систему.

Если кто-то из домашних страдает грибком, предупредить заражение других членов семьи можно с помощью дезинфекции комнатной обуви, средств личной гигиены. У каждого члена семьи должны быть свои предметы повседневного обихода, а особенно во время лечения.

Материалы, размещённые на данной странице, носят информационный характер и предназначены для образовательных целей. Посетители сайта не должны использовать их в качестве медицинских рекомендаций. Определение диагноза и выбор методики лечения остаётся исключительной прерогативой вашего лечащего врача.

Грибок на ногах — простые, быстрые и эффективные методы лечения грибка стопы и ногтей (100 фото)

Печально говорить, что огромное количество людей по всей планете объединяет одна проблема – грибок на ногах. Инфекция стала настолько распространённой из-за многих факторов, одним из которых оказалась простая гигиена. Грибок привносит в жизнь много дискомфорта, но есть ряд способов борьбы с ним, о чем мы и поговорим сегодня.

Краткое содержимое статьи:

Причины возникновения грибка

Причиной заражения являются грибковые споры, которые попав в организм начинают свое деление, что в процессе наносит носителю ущерб.

Если посмотреть на фото грибка на ногах, то можно заметить, что при заболевании появляются образования на коже или ногтях. Инфекция проникает внутрь тканей, после чего начинает развиваться как раз там, а вот то что мы видим уже последствия этого процесса.

Есть определенные причины появления грибка на ногах, и самые популярные из них мы еще и разберем. Начнем с заражения, чаще всего оно происходит при косвенном контакте – кожа ног соприкасается с предметами, на которых остались споры от зараженного человека.

Притом такое может произойти в публичных местах, вроде пляжа и бани, в то время, как носитель вируса может даже не иметь внешних симптомов.

Ослабленный иммунитет делает ваш организм благоприятным местом под развитие для вируса. Способствуют этому физические повреждения кожи, которые могут быть вызваны даже простой тесной обувью, которая вам натирает.

Чрезмерное потоотделение ступней, мозоли, другие инфекции в организме, вредные медикаменты и даже плоскостопие – все это может стать причиной появления грибка.

Симптомы грибка

Заболевание развивается в несколько важных этапов. Изначально, как только споры попадают в организм – они проходят инкубационный период. Внешне это никак не проявляется. Первые симптомы грибка на ногах начинают проявляться, когда он переходит в активное состояние.

Начинается все с простого шелушения кожи, который часто принимают за сухость. Позже, когда увлажняющие крема не дают никакого эффекта, начинают появляться первые подозрения. Начинают образовываться мелкие трещины на коже. На этом этапе проблемная область продолжает увеличиваться, часто доходя до боковых частей ноги.

Обострение развивается все стремительнее – появляется физический дискомфорт. Дефекты кожи сопровождаются болевыми ощущениями, вроде зуда или даже жжения. На коже образовываются уплотнения, которые становятся твердыми. Жжение и зуд становятся все сильнее.

На последней стадии инфекция добирается до ногтей, а кожа начинает разлагаться с характерным запахом. Ногти крошатся, а на коже появляются открытые раны – в процессе ногти могут отделиться от пальца.

Диагностика грибка

Не сразу люди начинают думать о том, что делать если на ногах грибок. Все потому, что в начале его не замечают. Своевременный поход к дерматологу может сильно улучшить ситуацию – лечение пройдет проще и быстрее, если обнаружить проблему на первых этапах. Чего уж говорить о вашем здоровье – инфекция не будет долго развиваться, а болевых ощущений может и не быть.

Для этого доктор отправит вас на анализы. В случае подозрения на кожную инфекцию – у вас возьмут образец для проверки. При этом врачу стоит рассказать о последних походах в общественные места, вроде сауны, пляжа, бассейна.

Не стоит забывать и о болезнях, которые также были пережиты недавно – они могут быть причиной ослабленного иммунитета. Определившись с типом проблемы, врач назначит вам лечение.

Лечение грибка

Правильный диагноз является залогом быстрого и эффективного лечения грибка на ногах. В зависимости от стадии заболевания лечение может усложняться. На более запущенных этапах оно может стать комплексным – будут применятся не только мази для обработки проблемных участков, но и медикаментозные препараты вроде таблеток.

Важно понимать, что в это же время нужно наладить личную гигиену. Во многих случаях именно проблемы на этом фронте и дают возможность инфекции появиться и начать развитие.

Медикаменты для лечения

Лучше всего, если лечение будет назначаться врачом. Да, есть медицинские и народные способы лечения грибка на ногах, и выбирать только вам, но оба направления имеют особенности.

Медицинское лечение без консультации врача может стать причиной многих будущих проблем, в том числе и ухудшения текущего состояния болезни.

Таблетки, выбранные наугад могут навредить иммунитету, из-за чего грибок будет развиваться еще быстрее. Особенно опасно подобное делать с детьми – родители нередко уверенны в том, что и сами могут справиться с подавляющим большинством недугов. Тут уже как повезет – можно вылечить, а можно и навредить.

Использование крема во многих случаях не несет особой опасности – простых внешних симптомов обычно хватает, чтоб даже дома диагностировать грибок на ногах.

То же касается и мазей – если не угадаете, то просто потеряете время, из-за чего врачу лечить вас будет немного, или намного, сложнее. Поэтому не стоит часто заниматься самолечением, особенно с дерматологическими заболеваниями.

Фото грибка на ногах

Кожный грибок — причины возникновения, первые признаки и симптомы, диагностика, лечение и профилактика

Дерматологическая болезнь микоз или кожный грибок требует особого лечения с использованием специальных средств местного назначения. Сегодня данное заболевание занимает первое место в мире среди разных инфекционных поражений кожи. Как правило, связано это со снижением иммунитета человека и генетической предрасположенностью. Микозу подвержены все люди, вне зависимости от возраста и пола.








Что такое кожный грибок


Неприятное заболевание, которое появляется в результате попадания на тело одноклеточных микроорганизмов, называется микозом или кожным грибком. Заразиться таким недугом может любой. Возбудитель контактирует со здоровыми тканями сразу же после того, как человек начинает пользоваться обувью или средствами гигиены носителя инфекции. Патогенная флора, как правило, обитает на постельных принадлежностях, маникюрных инструментах, расческах, полотенцах, в тапочках.


Грибковое поражение кожи представляет большую опасность для детей и беременных женщин. Часто инфекция приживается там, где доминирует влажная атмосфера. Микозом можно заразиться в гостинице, общественном туалете, бассейне, салоне, на пляже и в спортивной раздевалке. Квартира или дом, где не поддерживается порядок и чистота, тоже может стать благоприятным местом для размножения бактерий. Кроме того, грибок на теле часто появляется из-за:


  • долгого голодания;
  • аллергии;
  • психического переутомления;
  • болезней нервной системы;
  • иммунного нарушения;
  • наследственной предрасположенности;
  • лечения антибиотиками;
  • неправильного обмена веществ;
  • травмы ногтей и кожи;
  • авитаминоза;
  • химиотерапии;
  • избы

Лечение грибковых заболеваний на кожном покрове тела

Полное описание


Микозы часто имеют ряд схожих симптомов, однако источниками патологии могут являться различные виды грибков, поэтому специалисты рекомендуют при первых заметных признаках грибковой инфекции обращаться к врачу, который сможет точно установить причину и вид заболевания путем осмотра пациента и проведения необходимых анализов.

Жизнедеятельность грибков оказывает токсическое воздействие на человеческий организм, ослабляет защитные функции кожи и иммунный барьер, что может стать причиной развития других вирусных и бактериальных заболеваний на фоне грибковой инфекции.

Лечение болезней, вызванных патогенными грибками, часто осложняется высокой резистентностью или устойчивостью данных микроорганизмов к препаратам и лекарствам противогрибкового воздействия, поскольку за много лет борьбы с инфекционными заболеваниями у грибков постепенно вырабатывалась нечувствительность к определенным активным веществам фунгицидных средств.

Устранение грибка кожи может осуществляться средствами локального воздействия и противогрибковыми медикаментами, таблетками и капсулами. Врачи к использованию лекарств внутреннего применения относятся с большой осторожностью, предпочитая бороться с грибком кожного покрова с помощью средств для наружного применения, так как данные препараты воздействуют на грибок и продукты его жизнедеятельности местно, не распространяясь с циркулирующей кровью по всему организму.

Если грибковое заболевание прогрессирует довольно быстро и эффекта от использования средств наружного воздействия недостаточно, дерматологи назначают курс комбинированной фунгицидной терапии, которая включает в себя применение противогрибковых мазей, гелей, капель, пудры, суспензий, эмульсий и лосьонов, а также таблеток и антибиотиков, которые принимаются перорально.

При выборе противогрибковых препаратов необходимо обратить внимание на состав средства, чтобы исключить возникновение аллергических реакций в ответ на действие определенных составляющих лекарства, так как противопоказания и побочные эффекты от использования фунгицидных препаратов могут иметь не только общий, но и индивидуальный характер.

Критериями выбора надежного средства против кожного грибка также являются уровень активности основного компонента препарата и степень его безопасности в случае взаимодействия с целым организмом, а не только с локальным очагом инфекции.

Особенно важно обратить внимание на период применения противогрибкового средства, поскольку завершение курса фунгицидной терапии до полного избавления от грибка кожного покрова чревато рецидивом инфекции, бороться с которым будет гораздо сложнее в силу ослабленного длительным приемом агрессивных лекарств организма.

Препараты противогрибкового воздействия часто имеют в своем составе противовоспалительные и антибактериальные компоненты. Данные лекарственные средства являются более результативными при устранении грибковой инфекции, нежели обычные фунгицидные медикаменты, поскольку эффективное лечение грибка всегда начинается с удаления воспалительного процесса.

Специалисты выделяют несколько основных групп препаратов с базовыми активными веществами, которые наиболее часто используются для лечения грибковых заболеваний: амфотерицин, тербинафин, итраконазол, кетоконазол и флуконазол.

Данные вещества способны угнетать жизнедеятельность грибка кожного покрова, останавливать его развитие и предупреждать распространение по всему организму, также эффективно справляются с продуктами его размножения, которые называются мицелиями. Мицелии остаются на личных вещах, постельном белье и предметах гигиены зараженного грибком человека даже после полного излечения от паразитирующих в организме грибковых микроорганизмов, поэтому эффективное избавление от грибка включает в себя также противогрибковую санитарную обработку предметов гардероба, полотенец и средств гигиены больного микозом.

Дерматологи чаще всего советуют такие препараты на основе тербинафина, как Ламизил, Бинафин и Тербизин. Наиболее популярными лекарствами для устранения грибка кожного покрова с итраконазолом являются Орунгал и Итрамикол. Результативно справляются с проблемой грибка верхних слоев кожи Дифлюкан, Микосист и Микомакс на базе флуконазола и Микозорал с кетоконазолом в составе. Для лечения грибка кожи также успешно применяются Гризеофульвин, левориновая мазь и Тридерм.

В случае распространения грибковой инфекции на ногтевые пластины рук и ног врачи рекомендуют применять фрезерные бормашины для аппаратного стачивания ногтя, чтобы обеспечить более глубокое проникновение фунгицидных лекарств в нижние слои кожи. Ноготь также могут удалить хирургическим методом, однако более популярным и распространенным способом является растворение ногтевой пластины с помощью химических средств.

Бороться с кожным грибком можно также при помощи народной терапии, которая имела в запасе множество методов устранения грибковых инфекций кожи еще до появления современных способов лечения.

Винный уксус хорошо останавливает рост и устраняет грибок кожи, особенно на ранних стадиях развития инфекции. Необходимо делать ванночки из винного уксуса ежедневно на протяжении 14-16 дней, вместо ванночек также можно использовать примочки или ватные шарики, которые пропитаны винным уксусом.

Отличным противогрибковым подручным средством является раствор йодированной соли и соды в пропорции 1:1, раствор обязательно должен быть разбавленным во избежание повреждений эпидермиса и размягчения поверхностных слоев кожи. Смывать обязательно холодной водой, держать не менее 30-ти минут.

В качестве фунгицидного народного средства также можно использовать молотый кофе, который заливают теплой водой и дают настояться 5-10 минут. Кофейный раствор обязательно должен быть без осадка, наносить на пораженную грибком зону ежедневно не менее недели на 15-20 минут, смывать водой с добавлением уксуса. Кофе обладает не только ярко выраженными противогрибковыми свойствами, но еще и способен утолять болевые ощущения и снимать признаки воспалительной реакции, воздействуя локально.

Сок лимона и сок лука хорошо борются с грибковыми микроорганизмами, угнетая их жизнедеятельность и препятствуя распространению продуктов их размножения в окружающей среде. Чтобы избавиться от паразитирующих грибков, необходимо натирать очаг инфекции на кожном покрове соком лимона или лука 2 раза в день, их также можно смешать, добавить чесночного сока и сливочного масла, наносить как противогрибковую маску раз в 2 дня, смывать холодной водой с добавлением вербенового ароматического масла.

Настой из целебных растений и трав поможет более результативно устранить последствия разрушительной деятельности грибка кожного покрова и возвратит кожу в нормальное состояние. Для приготовления противогрибкового отвара необходимо смешать кору дуба, хвощ полевой, календулу и ежевику, залить горячей водой и настаивать в холодном темном месте не менее недели, затем процедить раствор и использовать как фунгицидный лосьон ежедневно не менее месяца.

Хвойные растения, благодаря большой концентрации фитонцидов, также способны убить грибок и эффективно очистить кожу от последствий его паразитирования. Поэтому сосновый настой является распространенным народным средством для результативного устранения грибкового заболевания. Для его приготовления нужно залить сосновые шишки и иголки 70% этиловым спиртом. Отвар должен настаиваться в стеклянной посуде не менее 14-ти дней, после чего его можно использовать в качестве тоника на пораженные инфекцией зоны кожного покрова.

В случае возникновения грибка на лице можно приготовить домашний противогрибковый крем из сала и активированного угля. Применять можно ежедневно, курс лечения составляет не менее месяца.

Грибковые инфекции всегда легче предупредить, нежели лечить, поэтому соблюдение основных правил профилактики, регулярная стирка личных вещей и уборка дома помогут избежать заражения грибковыми микроорганизмами. В случае заражения грибком необходимо немедленно обратиться к врачу, полностью исключив самолечение.

5 грибов, которые растут на коже, волосах и ногтях

Грибковые инфекции внешней поверхности тела не редкость в мире. Подсчитано, что 70% населения мира в какой-то момент жизни будет страдать от грибковой инфекции кожи. Подавляющее большинство случаев не являются серьезными. Это может быть постоянным или повторяющимся, но грибковая инфекция кожи редко приводит к серьезным осложнениям. Тем не менее, эти грибковые инфекции по-прежнему могут быть очень неприятными для человека — помимо таких симптомов, как зуд, который может беспокоить, они также могут вызывать неприглядные кожные высыпания, которые могут вызывать смущение.

Почему мы получаем грибковые инфекции?

Грибы живут на нашем теле, домашних животных и в почве, а также в других местах. У некоторых людей может никогда не развиться грибковая инфекция кожи, и, несмотря на преобладание грибков в окружающей среде, кожная инфекция вряд ли произойдет, если не будут созданы идеальные условия. Повреждение кожи, влажность или сухость кожи, тесный контакт с инфицированным человеком и пользование общественными удобствами являются одними из основных факторов риска развития грибковой инфекции кожи.

Этих состояний не всегда можно избежать, и не у каждого человека, столкнувшегося с ними, разовьется грибковая инфекция. Однако грибы, которые имеют тенденцию заражать и расти на коже, волосах и ногтях человека, приспособились к размножению в конкретном организме. Другими словами, многие грибки, поражающие кожу, волосы и ногти человека, имеют склонность к человеку. Есть некоторые свидетельства того, что определенные люди имеют генетическую предрасположенность к развитию грибковых инфекций.

Типы грибов

Существует два основных типа грибов, которые могут инфицировать человека — дерматофиты и дрожжи.

Хотя дрожжи, такие как Candida albicans , могут вызывать кожные инфекции, особенно в областях раздражения, они также могут инфицировать полости тела, такие как влагалище (кандидоз влагалища / молочница) и полость рта (кандидоз полости рта / молочница). Дерматофиты на сегодняшний день являются наиболее распространенным типом грибков, поражающих кожу, волосы и ногти. Существуют сотни видов, все из которых имеют специализированные ферменты, переваривающие белок, которые потребляют кератин из внешних слоев кожи. Дерматофиты часто вызывают циркулярную кожную сыпь, поэтому ее обычно называют стригущий лишай .

Двумя основными видами дерматофитов, которые вызывают большинство грибковых инфекций кожи, являются виды Trichophyton и Microsporum . Эти грибы могут образовывать споры, которые могут находиться в окружающей среде годами, прежде чем заразить человека. Дерматофиты легко поддаются лечению, но они также являются «стойкими» инфекциями, которые имеют тенденцию повторяться. Для сравнения, дрожжи, подобные Candida , предпочитают поверхность живой ткани и имеют тенденцию процветать на слизистых оболочках, выстилающих полости тела.

Trichophyton Виды

Род Trichophyton — наиболее распространенные дерматофиты, вызывающие грибковые кожные инфекции у людей. Из них Trichophyton rubrum является основным видом, вызывающим общие грибковые инфекции кожи, такие как микоз стопы и зуд спортсменов. Другие распространенные виды Trichophyton включают T. interdigitale , T.tonsurans и T. verrucosum . T.tonsurans очень распространен в Соединенных Штатах, а при некоторых грибковых инфекциях кожи в некоторых регионах США он является основной причиной.

Большинство этих грибов являются антропофильными, что означает, что они специфически инфицируют людей и легко передаются от одного человека к другому. Это вызывает легкое, но хроническое воспаление кожи. Есть и другие виды Trichophyton , которые также могут быть ответственными, но встречаются гораздо реже. T. verrucosum — это зоофильный гриб, который происходит от крупного рогатого скота, но может инфицировать людей, регулярно контактирующих с животным. Некоторые виды Trichophyton являются геофильными, что означает, что они происходят из почвы, но могут инфицировать людей и животных.

Виды Microsporum

Грибки рода Microsporum являются другими распространенными дерматофитами, вызывающими грибковые инфекции кожи, ногтей и волос человека. Общие виды Microsporum включают M. audouinii , M. ferrugineum , M. canis , M. nanum , M. distortum и M. gypseum . Некоторые из этих видов являются антропофильными (человек), зоофильными (животные) или геофильными (почвенными) грибами.

Однако важно отметить, что эти грибы являются зоофильными видами, которые становятся все более распространенными источниками инфекций. Microsporum canis происходит от собак и кошек, но может инфицировать людей, находящихся в тесном контакте с людьми. Это вызывает выраженную воспалительную реакцию у людей, но часто это недолгая инфекция, которая быстро заканчивается. M. nanum происходит от свиней, а M. distortum является вариантом M. canis , который происходит от кошек.

Виды Epidermophyton

Род Epidermophyton состоит из двух видов, и только один, E. floccosum , заражает людей. Это антропофильные организмы, что означает, что он имеет пристрастие к людям. E. floccosum присутствует во всем мире и является важной причиной микозов стопы (tinea pedis), зуда спортсмена (tinea cruris), стригущего лишая тела ( tinea corporis ) и грибковых инфекций ногтей (онихомикоз). По-видимому, он не проникает в волосы на черепе человека ( tinea capitis ).Однако у людей с ослабленной иммунной системой (с ослабленным иммунитетом) эти грибы могут проникать в более глубокие ткани, как и большинство дерматофитов.

Candida Виды

К роду Candida относятся дрожжи, и наиболее известный вид — Candida albicans . Другие менее известные виды включают C. tropicalis , C. parapsilosis , C. glabrata и C. guilliermondii . Он естественным образом встречается у людей, прежде всего в пищеварительном тракте, но обычно не вызывает инфекцию, если у человека не ослаблен иммунитет.Иногда чрезмерный рост может произойти, когда естественная среда, в которой он существует, изменяется таким образом, что позволяет ему бесконтрольно процветать.

Кандидоз кожи не является обычным явлением по сравнению с грибковыми инфекциями кожи, вызванными дерматофитами (дерматофитиями). Когда кандидозные кожные инфекции действительно возникают, это происходит в основном в местах, где обнажаются более глубокие живые ткани. Это можно увидеть на складках тела, где кожа воспалена, а в тяжелых случаях даже эродирована. Помимо ослабленной иммунной системы, как при СПИДе, эти кандидозные кожные инфекции также часто возникают у диабетиков и людей, страдающих ожирением.Он также может быть причиной некоторых случаев опрелостей.

Malassezia (Pityrosporum)

Грибки рода Malassezia естественным образом встречаются на коже человека вместе с другими дрожжами и различными бактериями. Но в подавляющем большинстве случаев это не вызывает никаких проблем. Это комбинация других микробов на коже (микрофлора кожи), которая сдерживает дрожжи Malassezia . Однако эти грибы могут вызывать проблемы с кожей и кожей головы, такие как tinea versiclor , себорейный дерматит и перхоть. Ранее род Malassezia был известен как Pityrosporum , и термин отрубевидный лишай до сих пор используется для обозначения инфекций, вызываемых этими грибами.

Хотя грибок Malassezia может стать патогенным и инфицировать кожу, он обычно вызывает очень поверхностную инфекцию, поскольку в значительной степени ограничивается самыми внешними слоями эпидермиса. Однако эти грибы могут вызывать проблемы с кожей и кожей головы и другими способами. Считается, что чрезмерный рост грибка Malassezia и аномальный иммунный ответ на его присутствие на коже могут быть механизмом возникновения себорейного дерматита и перхоти.Это одно из наиболее распространенных грибковых заболеваний кожи у людей, живущих со СПИДом.

Артикул:

dermnetnz.org/fungal/mycology.html

www.mycology.adelaide.edu.au/Fungal_Descriptions/Dermatophytes/Epidermophyton/

www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/000880.htm

Лечение грибка кожного зуда

Перевести Запрос содержит слишком много данных Имя параметра: запрос Перевести Запрос содержит слишком много данных Имя параметра: запрос

«Каждый человек рождается идеальным. Неполноценность — это ошибка ума, облако, покрывающее свет. Растворите облака, соблюдая сбалансированный образ жизни со здоровыми привычками. Питайте свой разум и тело. Соединитесь со своим собственным внутренним я. Празднуйте собственное великолепие, и ваша красота всегда будет сиять ». — Доктор Рама Кант Мишра, известный аюрведический врач и дерматолог.

Три столпа красоты

Махариши Аюрведа (MAV), современное, основанное на сознании возрождение древних Традиция аюрведической медицины считает, что истинная красота поддерживается тремя столпами: внешняя красота, внутренняя красота и непреходящая красота.Только усилив все три, мы сможем достичь сбалансированного состояния сияющего здоровья, которое сделает каждого из нас самым удовлетворенным и красивым человеком, которым мы можем быть.

Внешняя красота: Roopam

Внешние признаки красоты — ваша кожа, волосы и ногти — это больше, чем просто поверхностные меры красоты. Они являются прямым отражением вашего общего состояния здоровья. Эти внешние ткани создаются внутренними физиологическими процессами, участвующими в пищеварении, метаболизме и правильном развитии тканей. Внешняя красота в большей степени зависит от силы вашего пищеварения и обмена веществ, качества вашего питания и чистоты крови, чем от внешних очищающих средств и кондиционеров, которые вы можете применять.

Общие рекомендации по внешнему виду кожи

Как мы обсудим, ключом к уходу за кожей является соответствие вашей диеты и режима ухода за кожей конкретному типу вашей кожи. Между тем, есть несколько ценных рекомендаций для сияющей кожи, волос и ногтей, которые будут полезны всем, независимо от типа кожи.

1. Диета: Без адекватного питания ваш коллагеновый слой истончается и происходит своего рода истощение. Со временем ваша кожа может сморщиться, как растение без воды из-за недостатка питания.Чтобы ваша кожа оставалась пухлой и сияющей:

A. Ешьте свежие, цельные натуральные продукты, свежеприготовленные.

Избегайте упакованных, консервированных, замороженных, полуфабрикатов и остатков еды. Эти продукты имеют низкую питательную ценность, а также они часто плохо перевариваются, что приводит к образованию загрязнений, которые локализуются на коже. Возникающее в результате накопление токсинов вызывает раздражение и блокирует кровообращение, лишая кожу дальнейшего питания и естественных очищающих процессов.

B. Отдавайте предпочтение питательным для кожи продуктам.

Листовые зеленые овощи содержат витамины, минералы (особенно железо и кальций) и обладают высокими антиоксидантными свойствами. Они питают кожу и защищают ее от преждевременного старения. Сладкие сочные фрукты, такие как виноград, дыни, груши, сливы и тушеные яблоки на завтрак, полезны для кожи почти у всех. Ешьте разнообразные злаки во время разных приемов пищи и попробуйте смешанные злаки на завтрак и обед. Добавьте амарант, киноа, кус-кус, просо и ячмень к пшенице и рису, которые вы уже едите.Отдавайте предпочтение легким, легко усваиваемым белкам, таким как супы из бобовых (особенно желтый раздельный маш дхал), цельное молоко, панир (сыр из кипящего молока с добавлением лимона и сухих веществ) и ласси (разбавленный йогурт и пряные напитки). Такие масла, как топленое масло (топленое масло) и органическое оливковое масло первого отжима, должны быть включены в рацион, поскольку они смазывают, питают и придают коже блеск. Используйте такие специи, как куркума, тмин, кориандр и черный перец, чтобы улучшить пищеварение, питать кожу и очищать ее от загрязнений.Не ставьте овощи в микроволновую печь и не варите их. При такой обработке они теряют до 85% своих антиоксидантов. Лучше всего готовить на пару и тушить.

Забота о внешней красоте через знание типа кожи

Помимо этих общих рекомендаций, ключом к внешней красоте является понимание различий в типах кожи, чтобы вы могли получить максимальную пользу от индивидуального режима ухода за кожей. MAV определяет три разных типа кожи, основываясь на том, какой из трех основных метаболических принципов (доши) — присутствующих у всех, но в разной степени — является наиболее доминирующим в вашем теле.

Кожа Вата

* Описание: Вата состоит из элементов воздуха и пространства. Если у вас кожа типа вата, ваша кожа будет сухой, тонкой, мелкопористой, нежной и прохладной на ощупь. В сбалансированном состоянии он светится нежной легкостью и утонченностью, элегантно и привлекательно. Когда кожа вата не сбалансирована, она будет склонна к чрезмерной сухости и даже может быть грубой и шелушащейся.

* Возможные проблемы: Самая большая проблема красоты кожи вата — это ее предрасположенность к симптомам раннего старения.На вашей коже могут образовываться морщины раньше, чем на большинстве других, из-за ее склонности к сухости и тонкости. Если ваше пищеварение не сбалансировано, ваша кожа может начать выглядеть тусклой и сероватой даже в 20-30 лет. Кроме того, ваша кожа может иметь склонность к таким заболеваниям, как сухая экзема и кожный грибок. Психический стресс, такой как беспокойство, страх и недостаток сна, оказывает сильное ослабляющее действие на кожу вата, делая ее усталой и безжизненной.

* Рекомендации по уходу

Обладая небольшими знаниями, вы можете сохранить и защитить нежную красоту вашей кожи типа вата. Поскольку ваша кожа не содержит много влаги, главное — не допустить ее высыхания. Придерживайтесь теплой маслянистой диеты (лучше всего топленое масло и оливковое масло) и отдавайте предпочтение кислым, соленым и сладким вкусам (естественно сладким, как фрукты, а не рафинированный сахар), поскольку они уравновешивают вату. Не сушите такие продукты, как крекеры. Выпивайте 6-8 стаканов теплой (не холодной для людей с вата-типом!) В течение дня и ешьте много сладких сочных фруктов. Рано ложиться спать (до 22:00) очень успокаивает вату и оказывает чрезвычайно положительное влияние на вашу кожу.Избегайте очищающих средств, которые сушат кожу (например, очищающих средств на спиртовой основе), и выполняйте аюрведический масляный массаж всего тела (абхьянга) утром перед душем.

Кожа Питты.

* Описание: Питта доша состоит из элементов огня и воды. Если у вас кожа типа питта, ваша кожа светлая, мягкая, теплая и средней толщины. В сбалансированном состоянии ваша кожа приобретает красивое, слегка розовое или золотистое сияние, словно освещенное изнутри. Ваши волосы обычно тонкие и прямые, обычно рыжие, песочные или светлые.Ваш цвет лица имеет тенденцию к розоватому или красноватому цвету, и часто бывает много веснушек или родинок.

* Потенциальные проблемы: Среди множества проблем, связанных с красотой кожи питта-типа, есть склонность к развитию сыпи, розацеа, угрей, пятен на печени или нарушений пигментации. Из-за большой доли элемента огня в вашей конституции ваша кожа плохо переносит жару или солнце. Из всех трех типов кожи кожа питта наименее устойчива к солнцу, светочувствительна и, скорее всего, с годами накапливает солнечные повреждения.Кожа Питта усугубляется эмоциональным стрессом, особенно подавленным гневом, разочарованием или негодованием.

* Рекомендации по уходу

Избегайте чрезмерного солнечного света, солнечных ванн и процедур с сильным нагреванием, например паров для лица или всего тела. Избегайте горячей, острой пищи и отдавайте предпочтение вяжущей, горькой и сладкой пище, уравновешивающей питту. (Опять же, естественно сладкие, а не шоколад и рафинированный сахар!) Особенно хороши сладкие сочные фрукты (особенно дыни и груши), вареная зелень и консервы из лепестков роз.Обильное питье помогает смыть загрязнения с чувствительной кожи питты. Уменьшите внешний или внутренний контакт с синтетическими химическими веществами, на которые ваша кожа особенно склонна реагировать, даже с задержкой после многих лет, казалось бы, беспроблемного использования. Избегайте продуктов для кожи, которые являются абразивными, нагреваются или содержат искусственные красители или консерванты. Следует избегать использования большинства коммерческих косметических брендов в пользу косметики, состоящей исключительно из 100% натуральных ингредиентов. И не забудьте взять под контроль свой эмоциональный стресс с помощью множества упражнений на свежем воздухе, йоги и медитации.

Кожа Капха.

* Описание: Капха доша состоит из элементов земли и воды. Если у вас кожа типа капха, ваша кожа толстая, жирная, мягкая и прохладная на ощупь. Ваш цвет лица — сияющий фарфоровый беловатый цвет, как луна, а волосы обычно густые, волнистые, жирные и темные. Типы кожи Капха с их более обильным коллагеном и соединительной тканью, к счастью, имеют морщины в более позднем возрасте, чем типы вата или питта.

* Возможные проблемы Если ваша кожа становится несбалансированной, это может проявляться в виде расширенных пор, чрезмерно жирной кожи, влажных типов экземы, угрей, угрей или прыщей, а также задержки воды.Кожа Капха также более подвержена грибковым инфекциям.

* Рекомендации по уходу

Кожа Капха более склонна к засорению и требует более тщательного очищения, чем кожа других типов. Будьте осторожны, избегайте жирных, засоряющих кремов. Точно так же избегайте тяжелой, трудно перевариваемой пищи, такой как жареная пища, жирное мясо, сыры и жирные десерты. Ешьте больше легкой, легко перевариваемой, вяжущей, горькой и острой (хорошо приправленной) пищи, поскольку она уравновешивает капху. Лучшее растительное масло — оливковое масло, а перед едой можно принимать немного имбиря и сока лайма, чтобы усилить характерно вялый пищеварительный огонь. Часто принимайте теплые ванны и используйте нежные очищающие средства, чтобы открыть поры кожи. Избегайте запоров и старайтесь каждый день заниматься спортом, чтобы улучшить кровообращение и помочь очистить кожу от потоотделения.

Внутренняя красота: Гунам.

Счастливые, позитивные, любящие, заботливые люди обладают особой красотой, которая не ограничивается кожей. И наоборот, все мы испытываем быстрое и пагубное воздействие на нашу кожу усталости и стресса.

Внутренняя красота — это подлинная красота, не та, которая проявляется на накрашенном лице, а та, которая сияет из вашей души, вашего сознания или внутреннего состояния.Внутренняя красота исходит от разума и сердца, которые находятся в гармонии, а не противоречат друг другу, вызывая эмоциональное замешательство, потерю уверенности, стресс и беспокойство. Внутренний покой — основа внешней красоты.

Сохраняйте уверенность в себе и сохраняйте теплую, любящую личность, уделяя внимание своему образу жизни и распорядку дня, а также эффективно справляясь со стрессом (я настоятельно рекомендую технику ТМ из-за ее научно подтвержденных преимуществ для психического и физического здоровья и замедления старения). Вы также станете здоровее и почувствуете себя лучше в течение дня, если съедите основную еду в полдень и возьмете привычку рано ложиться спать (в идеале — к 22:00.)

Помните, доброта, дружелюбие и искренность естественно привлекают к вам людей. С другой стороны, когда люди встревожены или напряжены, они хотят идти другим путем, независимо от строения вашего лица, веса тела или других внешних признаков, которые мы ассоциируем с привлекательностью.

Lasting Beauty: Yayastyag

Чтобы замедлить процесс старения и обрести стойкую красоту, есть два дополнительных ключевых момента, помимо уже обсужденных,

1. Устранение токсинов и свободных радикалов в организме: основные ухудшающие эффекты старения наступают поскольку токсины и примеси (называемые ама в Аюрведе) накапливаются по всему телу.Эти токсины могут образовываться в организме как свободные радикалы или со временем могут окисляться до свободных радикалов, которые способствуют преждевременному старению организма. Для длительного здоровья и красоты важно избегать и нейтрализовать свободные радикалы, предотвращать накопление всех видов загрязнений и удалять те, которые уже застряли в организме.

Самая мощная очищающая терапия в Аюрведе Махариши — это терапия «панчакарма», серия естественных процедур, которые идеально выполняются дважды в год, которые включают в себя 5-7 дней подряд массажа, тепловых процедур и мягких травяных клизм.Аюрведа подчеркивает важность прохождения этой программы очищения один или два раза в год, чтобы предотвратить накопление, локализацию и затвердевание загрязнений в тканях. Так же, как мы регулярно меняем масло в наших автомобилях для достижения оптимальных характеристик и продолжительности жизни, Аюрведа рекомендует регулярно очищать «отложения» из наших тканей с помощью процедур панчакармы.

Лучше всего то, что процедуры панчакармы роскошны, блаженны и заставляют вас чувствовать (и выглядеть) полностью обновленными всего за несколько дней.У меня было много пациентов, которые рассказывали мне, что друзья спрашивали их потом, делали ли они подтяжку лица, они выглядели такими свежими и молодыми!

К другим разрушителям свободных радикалов относятся: снижение умственного стресса, употребление в пищу антиоксидантных продуктов, таких как листовые зеленые овощи, сладкие, сочные фрукты и ежедневное приготовление пищи с антиоксидантами, детоксицирующие специи, такие как куркума и кориандр.

2. Добавьте омолаживающие методы в повседневную жизнь:

Повседневная деятельность в современном мире систематически утомляет нас и ускоряет процесс старения.Аюрведа утверждает, что крайне важно практиковать ежедневные схемы омоложения, чтобы противодействовать стрессовому износу повседневной жизни. Согласно Аюрведе, наиболее важными омолаживающими процедурами в вашей жизни являются:

Ложиться спать к 22:00. По мнению MAV, эта простая привычка — один из самых действенных методов для здоровья и долголетия.
Медитируйте ежедневно. Любая медитация, не требующая концентрации (которая, как было доказано, увеличивает беспокойство), может быть очень полезной. Я настоятельно рекомендую дважды в день глубоко отдыхать и оживлять технику Трансцендентальной Медитации (ТМ), преимущества которой подтверждены более чем 700 опубликованными исследованиями.
Ешьте экологически чистые, цельные свежие продукты, свежеприготовленные. Есть аюрведическая поговорка: «Без правильной диеты медицина бесполезна. При правильной диете медицина не нужна». Обязательно избегайте этих остатков, обработанных и приготовленных в микроволновой печи продуктов для лучшего питания и жизнеспособности.
Выполните аюрведический масляный массаж утром (абхьянга). Утренний масляный массаж очищает все тело, снижает беспокойство и стресс, помогает предотвратить и вылечить травмы и поддерживает кровообращение. Это особенно полезно для создания сияющего цвета лица и сохранения молодости вашей кожи.Исследования показывают, что он также может помочь предотвратить рак кожи.
Практикуйте асаны йоги. Сохранение гибкости и кровообращения — ключ к здоровью.
Практикуйте техники пранаямы (дыхательной йоги). Пранаяма оживляет ум и тело. В идеале выполняйте следующую последовательность действий два раза в день. Асаны, пранаяма и медитация.

Frontiers | Модель кожи человека ex vivo для изучения поверхностных грибковых инфекций

Введение

Кожные грибковые инфекции (SFI) поражают 25% населения мира (Pires et al. , 2014; Чжань и Лю, 2016). Большинство этих инфекций являются поверхностными, что означает, что они поражают только эпидермис, самый внешний слой кожи (Chu et al., 2003). Другие SFI классифицируются как подкожные и глубокие, которые встречаются с гораздо меньшей частотой, но имеют значительную заболеваемость и смертность (Queiroz-Telles et al., 2017).

Дерматофиты вызывают поверхностные инфекции и в зависимости от среды обитания классифицируются как зоофильные, геофильные или антропофильные. Зоофильные виды могут заражать людей, но у людей инфекция обычно вызывает сильное воспаление, а у животных она может протекать бесследно (Chu et al., 2003). Антропофильные виды, колонизирующие и адаптированные к человеку, могут вызывать необычные случаи дерматофитии у животных, клинические проявления которых отличаются от клинических проявлений человека (Brilhante et al., 2006). Различия в клинической картине между разными видами представляют собой главное ограничение животных моделей для изучения SFI.

Ранее для изучения SFI использовалось несколько моделей, таких как кератино-соевая среда (Zaugg et al., 2009), слои рогового слоя (Peres et al., 2016), культура клеток монослоя кератиноцитов (Huang et al., 2015) и реконструированный эпидермис человека (Liang et al., 2016; Faway et al., 2017). Ограничения этих упомянутых моделей включают отсутствие иммунных клеток или кератиноцитов. Кроме того, кератиноциты обычно не погружаются в среду для культивирования тканей, а поверхность кожи обычно подвергается воздействию внешней среды и воздуха.

Ex vivo кожные эксплантаты, полученные после хирургических вмешательств, обычно восстановительных, были использованы для исследования восстановления кожного барьера (Danso et al., 2015), заживление ран (Xu et al., 2012), химическая токсичность (Nakamura et al., 1990), хронические воспалительные заболевания (Guilloteau et al., 2010), вакцинация ДНК (Ng et al., 2009) и грибковая инфекция. инфекция (Peres et al., 2016; Poyntner et al. , 2016). В этих публикациях описаны различные методологии и применения модели эксплантата кожи. Используемые анализы включают гистологию, флуоресцентную микроскопию, иммунофлуоресценцию и иммуногистохимию для идентификации иммунных клеток и белков, электронную микроскопию, высокоэффективную тонкослойную хроматографию для измерения липидного состава и измерения экспрессии генов с помощью qRT-PCR и RNAseq.

Trichophyton rubrum , антропофильный вид грибов, является наиболее частой причиной поверхностных микозов (Havlickova et al., 2008). T. rubrum демонстрирует спонтанное заживление на животных моделях, что отличается от того, как процесс заживления происходит у людей. Ответы хозяина против T. rubrum различаются в зависимости от модели, используемой для изучения взаимодействия хозяин-патоген. Например, экспрессия грибковых генов, связанных с вирулентностью ( acuD, citA, acuE, cys3, hexA ) и ростом грибов ( pacC, ssU, cdo ), выше, когда T.rubrum изучается в листах рогового слоя или росте на кератине, по сравнению с ex vivo человеческими эксплантами (Peres et al., 2016).

Необходимо подробное описание методологии создания модели кожи человека ex vivo . В опубликованных протоколах подробно описаны важные методологические различия, такие как разная толщина кожи, тип среды с добавками, размер образца, свежесть ткани, температуры хранения и инкубации, а также частота смены среды (Nakamura et al., 1990; Xu et al., 2012; Danso et al., 2015; Пойнтнер и др., 2016).

Мы определили наиболее часто используемые методы и анализы из предыдущих отчетов и установили стандартизированную методологию для изучения SFI. Мы сообщаем о нашем протоколе модели ex vivo кожи человека и результатах инфекции T. rubrum как лучшем примере первичной поверхностной кожной инфекции. Наша главная цель — предоставить модель SFI, которая точно отражает заболевание человека и может быть проанализирована на молекулярном уровне для исследования взаимодействий грибок: хозяин.Протокол включает подробное описание методологии подготовки образца кожи и установления инфекции, советы о том, как избежать заражения, и подробные сведения о том, как можно получить образцы высокого качества для последующих анализов.

Краткое описание процедуры: конидии T. rubrum были выделены из агаровых культур, инкубированных в течение 7–10 дней при 30 ° C. Конидии определяли количественно и инокулят корректировали, чтобы позволить введение 1 × 10 6 клеток в 10 мкл PBS.

Хирургические кожные эксплантаты препарировали для получения кусочков размером 1 см 2 . Поверхность каждого кусочка кожи осторожно пораняли иглой. Затем каждый кусочек кожи помещали в 6-луночный планшет и добавляли 1 мл среды с добавлением DMEM, всегда поддерживая межфазное пространство воздух-жидкость. Инокулят грибка (10 мкл) добавляли на поверхность кожи, избегая контакта с дермой и окружающей средой. Отрицательный контроль (незараженная кожа) включали в каждый эксперимент. Чашки с культурами инкубировали при 37 ° C в 5% CO 2. Культуральную среду заменяли свежей средой каждые 24 часа, а отработанную среду хранили в пробирках на 2 мл при -80 ° C. Образцы ткани кожи были собраны в разные моменты времени для дальнейшего анализа.

Анализы извлеченных образцов включали сканирующую электронную микроскопию (SEM), гистологию, флуоресцентную микроскопию для оценки апоптоза и окрашивание калькофлуором белым для подтверждения грибковой инфекции и изучения морфологии грибка. Мы также описываем анализы для изучения SFI, такие как экстракция РНК и qRT-PCR для измерения экспрессии генов человека, а также экстракция белка из тканей и супернатантов для протеомного анализа с помощью жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии (LC-MS / MS).

Материалы и оборудование

Культура грибов

— Картофельный агар с декстрозой (КПК), картофельный крахмал 4 г / л, декстроза / глюкоза 20 г / л. Thermo Fisher. (Лафборо, Великобритания).

— Статический инкубатор. Лаборатория теплового оборудования LTE Ltd. (Олдхэм, Великобритания).

Trichophyton rubrum штамм CBS 304.60. Вестердейк Институт биоразнообразия грибов.

— Камерный гемоцитометр Нейбауэра.

— Распределители ячеек L-образной формы (39 мм × 140 мм).Microspec Ltd. (Бромборо, Великобритания).

— Раствор фосфатного буфера Дульбекко, 500 мл. Сигма-Олдрич (Дорсет, Великобритания).

— Центрифуга Cellstar (пробирки 15 мл и 50 мл). Greiner Bio-One (Кремсмюнстер, Австрия).

Кожная процедура

— Кожная ткань человека без жирового слоя (жировой слой был удален хирургом в момент операции) и без растяжек от операций на брюшной полости или груди. Предоставлено Tissue solutions ® Ltd.(Глазго, Великобритания).

— Охладитель, сухой лед и / или охлаждающие пакеты для транспортировки.

— Стерильные щипцы, хирургические ножницы и скальпели.

— Стерильные хирургические лезвия, размер 15 из нержавеющей стали. Swann-Morton (Англия, Великобритания).

— Одноразовые стерильные иглы (19G, 2 ″, 1,1 × 50 мм). BD microlance 3. BD Biosciences (Дроэда, Ирландия).

— 6-луночный планшет Nunc Delta для культивирования клеток. Thermo Fisher Scientific.

— Среда Игла, модифицированная Дульбекко (DMEM).Thermo Fisher Scientific.

— Пенициллин 10 000 единиц / мл и стрептомицин 10 мг / мл, 100 мл. Thermo Fisher Scientific.

— Термоинактивированная фетальная бычья сыворотка (HI-FBS). Thermo Fisher Scientific.

— Стерильные наконечники для пипеток TipOne 1000 мкл, 200 мкл, 10 мкл. Starlab (Милтон Кейнс, Великобритания).

— CO 2 лабораторный инкубатор.

— Нитриловые перчатки.

— Стерильные чистые пробирки для микроцентрифуги, 2 мл и 1,5 мл.

— Чашки Петри из полистирола стерильные.Стерильно. Greiner Bio-one. (Кремсмюнстер, Австрия).

— Стереомикроскоп Carl Zeiss TM Stemi 2000-c. Carl Zeiss (Оберкохен, Германия).

— Дезинфицирующее средство высокого уровня Chemgene. СТАРЛАБ.

Гистология

— OCT Embedding Matrix Cellpath, Ltd. (Ньютаун, Великобритания).

— Одноразовые базовые формы (15 × 15 × 5 мм). Park Scientific (Нортгемптон, Великобритания).

— Сухой лед.

— Реактив лабораторный изопентан.Thermo Fisher Scientific.

— Слайды с покрытием из поли- L -лизина. Thermo Fisher Scientific.

— Криостат Leica CM1900. Leica Biosystems (Вецлар, Германия).

— Покровное стекло. 100 шт 22 × 50 мм. VWR International (Латтерворт, Великобритания).

— 16% параформальдегид без метанола (вес / объем) 10 мл. Thermo Fisher Scientific.

— Модифицированное окрашивание серебром GMS, (HT-100), Sigma-Aldrich.

— Модифицированный раствор гематоксилина Харриса. Сигма-Олдрич.

— Светло-зеленый SF желтоватый 10 гр. акрос органика. Thermo Fisher Scientific.

— Histoclear. Гистологический очищающий агент. Национальная диагностика (Ноттингем, Великобритания).

— Histomount. Гистологическая среда для закрепления. Национальная диагностика (Ноттингем, Великобритания).

— Zeiss TM Axio scan.Z1 Цифровой слайд-сканер. Карл Цейсс.

— Флуоресцентный отбеливатель 28 (Calcofluor white M2R). Сигма-Олдрич.

— Гидроксид калия (КОН).Сигма-Олдрич.

— Конфокальный микроскоп DeltaVision TM . GE Healthcare. (Бакингемшир Соединенное Королевство).

— Иодид пропидия> 94% ВЭЖХ. Сигма-Олдрич.

— DeadEnd TM Флуорометрическая система TUNEL. Промега (Саутгемптон, Великобритания).

— Монтажная среда Vectashield ® для флуоресценции с DAPI и без него, для окрашивания TUNEL и Calcofluor соответственно. Vector Laboratories (Питерборо, Великобритания).

— этанол 100%.

Сканирующая электронная микроскопия (СЭМ)

— 50% глутарового альдегида в H 2 O. Sigma-Aldrich.

— Тригидрат какодилата натрия. Сигма-Олдрич.

— Четырехокись осмия. Сигма-Олдрич.

— этанол 100%.

— Гексаметилдисилазан (HMDS). Сигма-Олдрич.

— Сканирующий электронный микроскоп Zeiss TM EVO MA10. Карл Цейсс.

qRT-PCR

— РНК позже ® Реагент для хранения ткани.Сигма-Олдрич.

— RNaseZap TM . Средство для удаления и очистки РНКазы. Сигма-Олдрич.

— раствор ТРИЗола ТМ . Thermo Fisher Scientific.

— Хлороформ.

— Изоамиловый спирт.

— Изопропанол.

— Азот жидкий.

— Стерильная ступка и пестик.

— FastPrep TM -24 5G MP Biomedicals.

— MP Biomedicals TM Пробирки Lysing Matrix D, керамические сферы 1,4 мм.MP Biomedicals.

— Диэтилпирокарбонат, 97% (DEPC). Сигма-Олдрич. Для очистки воды использовался 0,1% DEPC.

— Спектрофотометр NanoDrop TM 1000. Thermo Fisher Scientific.

— буфер 5X TBE (основание TRIS 54 г / л, борная кислота 27,5 г / л и 10 мМ EDTA сверхчистый). Рабочий раствор 1X TBE. Сделайте буфер, используя DEPC-воду.

— Без агарозной РНКазы.

— Степень амплификации ДНКазы I, концентрация 1 Ед / мкл. Thermo Fisher Scientific.

— SuperScript TM IV система синтеза первой цепи.Thermo Fisher Scientific.

— Универсальный набор ProbeLibrary, человек с зондами №1 — №90. Рош (Велвин-Гарден-Сити, Великобритания).

— Праймеры для qRT-PCR, разработанные для конкретных целей. Размеры праймеров составляли от 18 до 20 п.н., продукты амплификации короче 110 п.н., конечная использованная концентрация составляла 250 нМ для каждого праймера (таблица 1).

— Мастер микс датчика LightCycler ® 480. Рош.

— Системный прибор LightCycler ® 480. Рош.

Таблица 1. Последовательности праймеров и зонды, использованные в этом исследовании.

Протеомика

— Центробежные фильтры. Amicon ® ultra-0,5 мл, 3К. Merck Millipore (Таллагрин, Ирландия).

— Vivaspin ® Ультрафильтрационная мембрана из полиэфирсульфона, 500 кДа, MWCO. GE Healthcare.

— Муравьиная кислота.

— UHQ (сверхвысокое качество)> 18 МОм воды.

— 50 мМ бикарбонат аммония (AMBIC).

— 200 мМ дитиотреитол (DTT) и 30 мг / мл AMBIC (раствор DTT).

— 200 мМ йодацетамида (IAA) плюс 36 мг / мл AMBIC (раствор IAA).

— Ацетонитрил (ACN).

— Раствор A: 0,1% трифторуксусная кислота (TFA) в воде UHQ.

— Раствор B: 0,1% TFA, 70% ACN в воде UHQ.

— Трипсин, (Кат. № V511A). Промега.

— Q Exactive TM Гибридная четырехполюсная орбитальная ловушка. Thermo Fisher Scientific.

— UltiMate TM 3000 RSLnano система жидкостной хроматографии (ЖХ). Thermo Fisher Scientific.

— Ионный источник EASY-Spray TM . Thermo Fisher Scientific.

— Acclaim TM Pepmap TM 100 колонок C18 LC (каталожный номер 160454). Диаметр 300 мкм × длина 5 мм, размер частиц 5 мкм. Thermo Fisher Scientific.

— Нано-колонка PepMap TM RSLC C18, внутренний диаметр 75 мкм × 25 см. Thermo Fisher Scientific.

— Наконечники Millipore ZipTips C18. Сигма-Олдрич.

— Proteome Discover TM Программное обеспечение версии 1.4. Thermo Fisher Scientific.

— программный пакет Mascot Server версии 2.5. Matrix Science Inc. (Лондон, Великобритания).

Пошаговые процедуры

Приготовление инокулята T. rubrum

T. rubrum культивировали на КПК в течение 7–10 дней при 30 ° C.

— Конидии выделяли путем добавления 3-5 мл стерильной воды на поверхность грибкового роста и соскоба L-образным распределителем клеток.

— Жидкость была собрана и помещена в пробирку на 15 мл и оставлена ​​на 2 мин в вертикальном положении.Супернатант собирали, и клетки трижды промывали PBS.

— Конечная плотность клеток определялась путем подсчета с помощью гемоцитометра и корректировалась для инфицирования эксплантата кожи 1 × 10 6 конидий в 10 мкл, что подтверждали подсчетом жизнеспособных клеток (колониеобразующих единиц) на КПК.

Создание человеческой кожи ex vivo Модель и грибковая инфекция

— Эксплантаты кожи грудного и абдоминального происхождения были получены из Tissue Solutions ® (рис. 1A).

— Человеческие ткани, предоставленные этой компанией, получены в соответствии с юридическими и этическими требованиями страны сбора, с этического одобрения и анонимного согласия донора или ближайшего родственника. Tissue Solutions ® также соответствует требованиям Управления по тканям Соединенного Королевства (HTA) в отношении импорта тканей.

— Эксплантаты транспортировали и отправляли в холодильных установках при 4 ° C и поддерживали при 4 ° C до обработки, которая произошла в течение 36 часов после операции.

— В DMEM добавляли 1% об. / Об. Антибиотиков (пенициллин и стрептомицин) и 10% HI-FBS.

— Кожу промывали DMEM и держали влажной в чашке Петри с той же средой (рис. 1B). Эксплант был разрезан на кусочки размером 1 см 90 295 2 90 296 ткани. Поверхность каждого куска размером 1 см 2 была осторожно ранена с помощью иглы, не пересекая всю толщину кожи. Поверхность кожи прокалывали иглой несколько раз (6–10).

— После ранения каждый кусочек кожи помещали в отдельные лунки 6-луночного планшета.Межфазную фазу воздух-жидкость поддерживали добавлением 1 мл дополненной среды DMEM. Добавленный объем среды покрыл только дерму, избегая контакта с эпидермисом (рис. 1C).

— Эксплант был инокулирован путем нанесения 10 мкл конидиальной суспензии T. rubrum непосредственно на эпидермис, избегая протекания и контакта с дермой и окружающей средой. Всегда включались только кожные (неинфицированные) контроли.

— Эксплантаты инкубировали при 37 ° C в 5% CO 2 в инкубаторе CO 2 .Среду меняли каждые 24 ч, израсходованную среду сохраняли в пробирках на 2 мл для последующего анализа. Восстановленные среды хранили при -80 ° C. Когда культуральную среду меняли, следили за тем, чтобы свежая среда не касалась поверхности кожного эксплантата, обеспечивая контакт кожи с воздухом только во время эксперимента.

— Образцы кожи также были извлечены в чашку Петри в разные моменты времени. Перед тем, как образцы кожи были обработаны, их макроскопический вид оценивали на глаз, и изображения получали с помощью стереомикроскопа Stemi 2000-c.

— Восстановленные образцы были затем обработаны в зависимости от дальнейших запланированных анализов и испытаний, которые описаны в следующих шагах.

— Ткань для гистологических тестов помещали в формы, а затем заливали в состав ОКТ и быстро замораживали с помощью сухого льда и изопентана. Эти образцы можно хранить при -20 ° C для немедленного анализа или при -80 ° C для длительного хранения.

— Для SEM ткань фиксировали в буфере глутаральдегида (2,5% глутарового альдегида в 0,1 М какодилате) в течение ночи при 4 ° C.Эти образцы необходимо обработать сразу после их восстановления.

— Ткань для экстракции РНК была разрезана на более мелкие части и помещена в РНК , позже ® для последующей экстракции РНК. Эти образцы могут храниться при разных температурах в зависимости от потребностей исследователя. Восстановленные ткани хранили при -80 ° C для более длительного хранения или -20 ° C для более быстрого использования.

— Эксперименты для каждого состояния повторяли не менее трех раз с использованием кожи разных людей-доноров.

Рисунок 1. Кожа человека ex vivo модель . (A) Эксплантаты кожи были получены от третьей стороны. Перед использованием жировой слой отбрасывали. (B) Эксплантаты кожи разрезали на кусочки размером 1 см 2 . Осколки были ранены иглой. (C) Кусочки кожи поддерживали в культуральной среде, поддерживая межфазное пространство воздух-жидкость. Среда покрывала только дерму, избегая контакта с эпидермисом.

Гистологический анализ

— Для гистологического подтверждения грибковой инфекции срезы ткани толщиной 6 мкм, вырезанные из замороженных блоков OCT с использованием криостата, помещали на предметные стекла, покрытые поли- L -лизином, и фиксировали 4% параформальдегидом без метанола в PBS в течение 20 мин. перед дальнейшим окрашиванием.

Модифицированный метенамин серебра (GMS) с окрашиванием начальным раствором периодической кислоты (PAS)

— Срезы окрашивали модифицированным красителем GMS (HT-100) в соответствии с инструкциями производителя.

— Предметные стекла контрастировали либо раствором гематоксилина, либо 0,2% (масс. / Об.) Светло-зеленым желтоватым раствором SF в течение 1–2 минут.

— Предметные стекла были обезвожены градиентом этанола с 30-секундной инкубацией при каждой концентрации (70%, 80%, 90%, 100%, 100%).

— Очистку проводили дважды с использованием гистологического очищающего соединения в течение 30 с.

— Слайды были закреплены составом HistoMount TM , наложено покровное стекло и затем оставлено сушиться на ночь.

— Изображения были получены с помощью цифрового сканера Axio scan.Z1 с 10-кратным окуляром.

Калькофлуор Белый (CFW)

— Срезы также окрашивали CFW.

— Предметные стекла инкубировали в 10% (мас. / Об.) КОН в течение 15 минут, трижды промывали PBS и сушили на воздухе перед окрашиванием 1% (мас. / Об.) CFW в течение 15 минут, затем снова трижды промывали PBS. .

— Предметные стекла окрашивали раствором йодида пропидия (PI) (1 мкг / мл в PBS) в течение 15 минут, трижды промывали PBS и позволяли высохнуть в темноте при комнатной температуре (RT) в течение 30 минут или до высыхания.

— Одна капля монтажной среды Vectashield ® была помещена на окрашенный участок и покровное стекло использовалось для равномерного распределения монтажной среды.

— Изображения были получены с помощью конфокального микроскопа DeltaVision с увеличением 10 ×.

Жизнеспособность тканей

— Жизнеспособность клеток кожной ткани оценивалась в незараженных тканях с использованием системы TUNEL.При обнаружении фрагментированной ДНК, то есть апоптозных или умирающих клеток, следовали инструкциям производителя.

— Предметные стекла окрашивали раствором PI (1 мкг / мл в PBS в течение 15 минут), трижды промывали PBS и оставляли сушиться в темноте при комнатной температуре в течение 30 минут или до высыхания.

— После высыхания слайды помещали в Vectashield ® плюс DAPI для окрашивания ядер.

— Изображения были получены с помощью конфокального микроскопа DeltaVision с увеличением 10 ×.

— Уровень апоптоза оценивали путем деления количества клеток, окрашенных системой TUNEL, на общее количество клеток, окрашенных тремя методами окрашивания (DAPI, йодид пропидия и TUNEL).Затем уровни сравнивали с незараженной кожей через 24 часа с использованием программного обеспечения Prism 7 v.7.1 с использованием одностороннего дисперсионного анализа и апостериорного теста Даннета. Статистически значимым считалось значение p <0,05.

Сканирующая электронная микроскопия (СЭМ)

— Ткани немедленно фиксировали в 2,5% глутаровом альдегиде в 0,1 М буфере какодилата натрия, pH 7,2 и инкубировали в течение ночи при 4 ° C.

— Образцы промывали 0,1 М натрий-какодилатным буфером (pH 7.2–7.4) дважды по 5 мин.

— Ткани обрабатывали 1% тетроксидом осмия в дистиллированной воде в течение 1 ч, затем трижды промывали буфером какодилата натрия в течение 5 мин.

— Образцы дегидратировали в градиенте этанола (70%, 80%, 90%), при этом образцы инкубировали в течение 10 минут при каждой концентрации.

— Образцы трижды инкубировали в 100% этаноле в течение 10 мин.

— Образцы инкубировали в течение 3 минут в HMDS и помещали в эксикатор на 25 минут для удаления любых водных загрязнений.

— Образцы наблюдали с помощью сканирующего электронного микроскопа Zeiss TM EVO MA10 (несколько различных увеличений).

Количественная ОТ-ПЦР для анализа экспрессии генов человека

Экстракция РНК и производство кДНК

— РНК , позже раствор ® был отброшен, а ткань промыта стерильной водой.

— Ткань разрезали на мельчайшие кусочки, помещали в ступку и измельчали. Жидкий азот использовали для быстрой заморозки ткани, и ее снова измельчали ​​до тех пор, пока маленькие кусочки не превращались в порошок.

— Порошок ткани помещали в пробирки объемом 2 мл, содержащие шарики матрицы D и добавляли 1 мл TRIzol TM . Пробирки помещали в прибор FastPrep TM и обрабатывали со скоростью 6 м / с в течение трех-пяти циклов по 40 с с интервалами 5 мин. Пробирки инкубировали на льду в течение интервалов.

— Пробирки центрифугировали при 14000 об / мин в течение 5 минут при 4 ° C и супернатант переносили в свежие 2 мл микроцентрифужные пробирки.

— в каждую пробирку добавляли 0,2 мл хлороформа / изоамилового спирта (49: 1).Пробирки встряхивали в течение 10 с, затем охлаждали на льду в течение 15 мин.

— Пробирки центрифугировали 20 мин при 10 000 об / мин при 4 ° C.

— Водный слой переносили в новую пробирку на 2 мл. Органический (розовый) слой также сохраняли для последующей экстракции белка (см. Раздел «Протеомика и анализ дробовика»).

— К выделенному водному слою добавляли 1 мл изопропанола и оставляли на ночь при -20 ° C для осаждения РНК.

— Образцы центрифугировали в течение 20 минут при 10 000 об / мин при 4 ° C и супернатант отбрасывали.Осажденная РНК представляет собой гелеобразный осадок.

— Произведено второе осаждение. Осадок РНК ресуспендировали в 0,3 мл тризола, затем переносили в пробирку на 1,5 мл. Добавляли изопропанол (0,3 мл) и пробирки инкубировали не менее 30 мин при -20 ° C.

— Образец центрифугировали в течение 10 мин при 10 000 об / мин при 4 ° C и супернатант отбрасывали.

— Осадок растворяли в 1 мл 75% этанола и встряхивали в течение нескольких секунд, затем инкубировали в течение 10-15 минут при комнатной температуре.

— Образец центрифугировали в течение 5 минут при 10 000 об / мин при 4 ° C, супернатант отбрасывали и осадок сушили на воздухе при комнатной температуре в течение 5–10 минут. Этап очистки с использованием 1 мл 75% этанола повторяли два раза перед тем, как осадок РНК ресуспендировали в 50–100 мкл стерильной воды, обработанной DEPC, и затем инкубировали при 60 ° C в течение 15 мин.

— Выход и чистота РНК оценивались с помощью NanoDrop TM , и образцы хранили при -80 ° C.

— Целостность / качество РНК оценивали, прогоняя 5 мкл общей РНК на 1% неденатурирующем агарозном геле TBE в буфере 1x TBE.Перед использованием резервуары очищали с помощью RNaseZap TM .

— Для получения кДНК образцы РНК (1 мкг) обрабатывали ДНКазой I, затем проводили обратную транскрипцию с использованием системы синтеза первой цепи SuperScript TM IV, следуя инструкциям производителя.

Дизайн, реакции и условия анализа количественной ПЦР с двумя датчиками гидролиза

— Праймеры и анализы, охватывающие интроны, были разработаны с использованием Roche’s Universal Probe Library Assay Design Center для пяти различных генов-мишеней, которые, как известно, экспрессируются в коже и во время T.rubrum (таблица 1).

— Один референсный ген ( B2M для β2-микроглобулина) был также разработан (Lossos et al., 2003) с использованием веб-инструмента Eurogentec для модификаций для добавления требуемого зонда (Таблица 1).

— Реакции qRT-PCR объемом 10 мкл проводили в планшетах LightCycler 480 с использованием мастер-микса зонда LightCycler 480 в соответствии с инструкциями производителя (таблица 2).

— Реакции проводили в LightCycler 480. Настройки были следующими: предварительная инкубация при 95 ° C в течение 10 мин (скорость изменения 4.8 ° C / с), один цикл, 55 циклов фазы амплификации с денатурацией при 95 ° C в течение 10 с (скорость изменения 4,8 ° C / с), отжиг при 60 ° C в течение 30 секунд (скорость изменения 2,5 ° C / с ), удлинение 72 ° C в течение 1 с (скорость изменения 4,8 ° C / с) и, наконец, один цикл фазы охлаждения при 40 ° C в течение 30 секунд (скорость изменения 2,5 ° C / с).

— Анализы на каждом образце кДНК проводили в трех экземплярах. Была проведена относительная количественная оценка. Результаты, полученные для каждого целевого гена, нормализовали по уровням экспрессии гена β2-микроглобулина. Результаты неинфицированной кожи использовали в качестве отрицательного контроля для инфекции.Результаты анализировали с помощью метода 2 -ΔΔC T (Livak and Schmittgen, 2001).

— Статистический анализ проводился с использованием критерия Стьюдента t или критерия Манна – Уитни в зависимости от распределения данных. Статистически значимым считалось значение p <0,05. Графики построены с использованием программного обеспечения Prism 7 (GraphPad, La Jolla, CA, США).

Таблица 2. реакций qRT-PCR.

Протеомика и анализ дробовика

Извлечение белков человека из кожи

— 300 мкл 100% этанола добавляли к выделенной органической фазе (розовый слой) после экстракции тканевой РНК, упомянутой в разделе «Количественная ОТ-ПЦР для анализа экспрессии генов человека». Пробирку перемешивали путем переворачивания и оставляли на RT в течение 3 мин.

— Образцы центрифугировали при 3000 об / мин в течение 5 минут при 4 ° C.

— Супернатанты разделяли на две части и переносили в новые пробирки на 1,5 мл с добавлением 800 мкл изопропанола, а затем инкубировали в течение ночи при -20 ° C для осаждения белков.

— Образцы центрифугировали при 12000 об / мин в течение 10 минут при 4 ° C.

— Осадок промывали холодным 0,3 М гидрохлоридом гуанидина в 95% этаноле и оставляли на 20 мин при комнатной температуре.

— Образцы центрифугировали при 7500 об / мин в течение 5 минут при 4 ° C, а затем супернатант удаляли.Промывание повторяли.

— Половина образца белка хранилась при -20 ° C (в 0,3 М гидрохлориде гуанидина в 95% этаноле) для расщепления трипсином и дальнейшего анализа с помощью ЖХ-МС / МС в лаборатории Aberdeen Proteomics.

— Другую половину образца белка промывали 95% этанолом и центрифугировали при 7500 об / мин в течение 5 минут при 4 ° C, супернатант удаляли и осадок сушили на воздухе.

— Осадок ресуспендировали в 100 мкл буфера для ресолюбилизации (1% мас. / Об. DTT, 2 M тиомочевина, 7 M мочевина и 4% мас. / Об. CHAPS, 2% об. Амфолитов-носителей, 10 мМ Pefabloc ® SC ингибитор протеиназы) и концентрацию белка, определяемую анализом Кумасси.

Восстановление белков из среды тканевой культуры

— Извлеченная / отработанная среда фильтровалась с использованием центробежных фильтров 50K Amicon ® Ultra-15 (Merck) и концентрировалась с помощью центробежных фильтров 3K Amicon ® Ultra-15 до тех пор, пока не оставалось 200 мкл. Этот этап был необходим для удаления большинства белков сыворотки (в основном альбумина из HI-FBS, используемого во время культивирования (белки менее 50 кДа).

— Четыре временных точки (24 часа, 2, 6 и 8 дней) в течение T.rubrum , плюс отрицательный контроль, соответствующий используемой модифицированной среде, и среду из незараженной кожи.

Расщепление трипсином

— Концентрированные супернатанты и экстрагированные белки из ткани были расщеплены трипсином. Белки, извлеченные из ткани и хранящиеся при -20 ° C в гуанидин гидрохлориде (процедура, описанная в разделе «Извлечение человеческих белков из кожи»), центрифугировали при 7500 об / мин в течение 5 минут при 4 ° C и супернатант отбрасывали. Оставшийся осадок разводили в 100 мкл AMBIC.

— Количество используемых тканевых белков составляло 10 мкг на образец, разведенный в 100 мкл AMBIC. Для концентрированных супернатантов использовали 100 мкл на образец.

— Раствор DTT (2 мкл) добавляли к каждому образцу белка (конечная концентрация 2 мМ) и образцы инкубировали в течение 25 мин при 60 ° C.

— Раствор ИУК (4 мкл) добавляли к каждому образцу (конечная концентрация 4 мМ), затем пробирку инкубировали 30 мин при комнатной температуре в темноте.

— Разбавьте образцы в четыре раза AMBIC (конечная концентрация мочевины 2 M).

— Трипсин добавляли в соотношении 1: 100, и пробирки инкубировали в течение 16 часов при 37 ° C.

— Реакции замораживали при -70 ° C, сушили центрифугированием в вакууме, затем ресуспендировали в 40 мкл раствора A, перемешивали на вортексе в течение 10 мин, центрифугировали при 14000 об / мин.

— Пептиды обессоливали перед ЖХ-МС / МС с использованием C18 Ziptips. Сначала материал C18 кондиционировали 20 мкл ACN, затем промывали C18 20 мкл раствора B. Затем C18 уравновешивали 20 мкл раствора A. Каждый образец загружали в C18 и медленно отсасывали 20 мкл образца через наконечник 10 раз. .Образец дважды промывали 20 мкл раствора А. Наконец, образец элюировали 5 мкл раствора В. Образцы сушили центрифугированием в вакууме.

Жидкостная хроматография-масс-спектрометрия (ЖХ-МС / МС)

— Идентификация белков была проведена в лаборатории Aberdeen Proteomics Facility.

— Образцы повторно растворяли в 10 мкл 0,1% муравьиной кислоты в воде UHQ, чтобы получить концентрации пептида от 50 до 1000 фмоль / мкл.

— Жидкостная хроматография выполнялась с использованием системы нано-жидкостной хроматографии UltiMate TM 3000 RSL, сконфигурированной для предварительного концентрирования на наноколонке PepMap RSLC C18, установленной на ионном источнике EASY-Spray TM .

— Растворителем загрузочного насоса был UHQ вода: ацетонитрил: муравьиная кислота (98: 2: 0,1), и колонка работала со скоростью потока 10 мкл / мин.

— Растворителем А нанонасоса был UHQ вода: муравьиная кислота (100: 0,1).

— Растворителем В нанонасоса был ацетонитрил: UHQ вода: муравьиная кислота (80: 20: 0,1).

— Градиент ЖХ для программы «QC hemel v2.»

— Образцы вводили и переносили в предварительную колонку Pepmap TM 100 C18 300 мкм × 5 мм. Поток через предколонку переключили на нанонасос, и образец промыли обратно в аналитическую колонку и систему масс-спектрометрии (МС).

— Образцы анализировали методом восходящей протеомики с использованием полного сканирования MS / ddMS 2 (TopN) на платформе Q Exactive TM Hybrid Quadrupole Orbitrap с источником наноэлектрораспыления EASY-Spray TM .

— Настройки МС полного сканирования: разрешение 70 000, диапазон сканирования 375–1 750 м / з, максимальное IT 50 мс, цель АРУ 3e6. Параметры ddMS 2 : разрешение 17 500, изоляция 1,6 м / z, максимальное IT 100 мс и цель AGC 5e4. TopN был равен 10, что относится к количеству сканирований MS2.

— Сырые файлы были обработаны с помощью Proteome Discoverer v.14 для идентификации белков. Поиск в базе данных проводился с помощью Mascot server v 2.5 с использованием последовательностей белка Homo sapiens (база данных Swiss-Prot, версия 2017_01; 553474 последовательности, загружены 26.01.17, отфильтрованы по таксономии = Homo sapiens ).

— Параметры узла талисмана учитывали следующие динамические модификации во время переваривания трипсина: окисление (M) и карбамидометил (C). Уровень ложного обнаружения (FDR) был установлен на 0.01. Количественное определение белка выражалось как площадь под значением кривой.

— Четыре биологических повтора для каждого состояния ( инфицированной T. rubrum кожи и незараженной кожи) были проанализированы с помощью LC-MS / MS. Был включен пустой образец (только средний — без кожи человека). Белки, идентифицированные в холостом ходе, были исключены из анализа. Затем отбирали только белки, содержащие два или более идентифицированных пептида и два или более совпадения пептидного спектра (PSM). Наконец, белки, обнаруженные по крайней мере в двух из четырех проанализированных образцов для каждого условия, были включены для дальнейшего анализа онтологии генов (GO) с использованием онлайн-инструмента консорциума GO.

— Значения площади каждого белка усреднялись и сравнивались между условиями, T. rubrum инфицированной и незараженной кожей, и, наконец, анализировались с помощью теста Стьюдента t или теста Манна-Уитни в зависимости от распределения данных a значение p <0,05 считалось статистически значимым.

Результаты

Подтверждение инфекции макроскопическим исследованием и микроскопическими доказательствами

После инокуляции кожи среду собирали и меняли каждые 24 часа.Макроскопический вид кожи тщательно наблюдали каждые 24 часа. Повреждение ткани инфицированной кожи было макроскопически видимым через 3 дня, при этом поражение увеличивалось с каждым днем, и через 10 дней оно было почти таким же большим, как кусок кожи размером 1 см 2 (рис. 2).

Рисунок 2. Макроскопическое подтверждение инфекции. (A) Кожа без инфекции. (B) T. rubrum инфицировал ex vivo кожи человека. Масштабная линейка на каждом рисунке соответствует 1 мм.

Наблюдаемое поражение кожи имело ожидаемый макроскопический вид, наблюдаемый в клинике, где поражения стригущего лишая или опоясывающего лишая описываются как плоская чешуйчатая область на коже, красная, с расширяющимися границами, образующими кольцо с прозрачной, чешуйчатой ​​или внутренней частью. красные шишки. Такой же макроскопический вид наблюдали во всех биологических повторностях (кожа от разных доноров). Это подтверждает воспроизводимость модели.

Устранение неполадок 1 : Сообщалось, что конидии можно использовать в течение месяца после приготовления посевного материала, если хранить при 4 ° C (Faway et al., 2017). Однако при использовании более старых конидий требуется больше времени, чтобы увидеть на глаз макроскопические признаки инфекции.

Устранение неисправностей 2 : Манипуляции с кожей могут привести к ее загрязнению. Использование раствора Chemgene (5%) и этанола (70%) для очистки рабочих поверхностей снижает вероятность загрязнения. Все хирургические инструменты необходимо стерилизовать перед использованием и очищать раствором Chemgene после использования.

Инфекции, вызванные T. rubrum , будут носить поверхностный характер, то есть ограничиваться эпидермисом.Модифицированное окрашивание серебром и CFW подтвердили наличие гиф на поверхности кожи (рис. 3). Кроме того, было замечено, что эпидермис отделился от дермы. Этот вывод был подтвержден на нескольких слайдах и в повторах от разных доноров.

Рисунок 3. Гистологическое подтверждение и сканирующая электронная микроскопия через 10 дней. Неинфицированная кожа (A, C, E) сравнивалась с T. rubrum -инфицированной кожей (B, D, F) . Панели (A, B) показывают окрашивание серебром и контрастное окрашивание гематоксилином.Пунктирной стрелкой обозначено гиф T. rubrum . Сплошные стрелки обозначают эпидермис. Панели (C, D) показывают окрашивание CFW (синий), идентифицирующее хитин, следовательно, клеток T. rubrum . Окрашивание ядер эпидермиса пропидием йодидом (красный). Панели (E, F) показывают изображения SEM, где масштабная линейка составляет 10 мкм.

Поиск и устранение неисправностей 3 : При покрытии образцов компаундом для ОКТ необходимо избегать образования пузырьков. Состав для ОКТ должен покрывать ткань, чтобы уменьшить повреждение из-за мгновенного замораживания.

Устранение неполадок 4 : Коричневый цвет гиф после окрашивания серебром может быть светлее, чем ожидалось при окрашивании гематоксилином. Этого можно избежать, если в качестве контрастного красителя использовался светло-зеленый SF, или когда окрашивание проводилось классическим окрашиванием серебром с использованием 10% хромовой кислоты вместо PAS, или если образцы предварительно нагревали перед добавлением PAS.

The DeadEnd TM флуорометрический анализ системы TUNEL измеряет фрагментацию ядерной ДНК как маркер апоптоза и жизнеспособности клеток.Долю апоптоза оценивали путем деления количества клеток, окрашенных системой TUNEL, на общее количество окрашенных клеток. Затем сравнивали пропорции между тремя проанализированными состояниями: незараженная кожа через 24 часа, неинфицированная кожа через 14 часов и кожа, инфицированная T. rubrum. Макроскопический вид незараженной кожи после инкубации не отличался. Чтобы подтвердить присутствие грибков на поверхности инфицированной кожи, было выполнено прямое наблюдение с помощью SEM.Кроме того, по данным SEM, эпидермальные клетки выглядели приподнятыми из-за присутствия грибов на поверхности кожи (рис. 3E, F).

На 10-й день поверхность незараженной кожи была очень похожа на внешний вид кожи на 1-й день. Жизнеспособность кожи была подтверждена с помощью системы TUNEL. Через 14 дней не наблюдалось увеличения количества апоптотических клеток по сравнению с кожей, инкубированной в течение 24 часов (рис. 4). Доля апоптоза в инфицированной коже через 10 дней значительно отличалась от неинфицированной кожи через 24 часа (0.6 ± 0,07 против 0,002 ± 0,004, p <0,0001) и 14 дней (0,6 ± 0,07 против 0,04 ± 0,009, p <0,0001) (Рисунок 4).

Рисунок 4. Жизнеспособность клеток , измеренная системой TUNEL. (A) Неинфицированная кожа через 24 часа. (B) Неинфицированная кожа через 14 дней. (C) T. rubrum -инфицированная кожа через 10 дней. На всех трех изображениях окрашивание йодидом пропидия (красно-розовый), окрашивание DAPI (синий), чтобы показать неапоптотические клетки, оба красителя связывают ДНК.Апоптотические клетки окрашены в зеленый цвет с помощью системы TUNEL для идентификации фрагментированной ДНК. Долю апоптоза оценивали путем деления количества апоптотических клеток (зеленых клеток) на общее количество клеток (зеленых и красно-розовых клеток). Результаты на графике представляют четыре биологических повтора ( n = 4), с тремя анализируемыми секциями на секцию. Данные сравнивали с помощью однофакторного дисперсионного анализа. p = 0,0002, затем апостериорного теста Даннета , где ∗∗∗ представляет p <0.0001.

Экспрессия гена

Кератиноциты продуцируют несколько цитокинов, включая IL8 (CXCL8) и IL18 (член семейства IL-1β) (Pasparakis et al., 2014). Рецептор IL6 также экспрессируется в пролиферативных кератиноцитах (Hänel et al., 2013). Трансформирующий фактор роста бета 1 (TGFB1) является основным регулятором биологии дендритных клеток в коже, а CCL20 является мощным хемокином для лимфоцитов и дендритных клеток (Nedoszytko et al., 2014). Экспрессия всех пяти генов, кодирующих цитокины, была подтверждена в неинфицированной и инфицированной коже через 14 и 10 дней инкубации, соответственно (четыре экспериментальных образца для каждого состояния, каждый измерен в трех экземплярах).Кратность изменения в инфицированных образцах оценивали с использованием неинфицированной кожи того же донора, что и контрольный образец, после нормализации с использованием гена β2-микроглобулина в качестве контрольного гена.

Экспрессия IL8 (двукратная, p = 0,05) и CCL20 (двукратная, p = 0,05) была увеличена во время инфекции T. rubrum , но не было различий в экспрессии IL6R и TGFB1 между инфицированной и неинфицированной кожей (рис. 5).Наконец, экспрессия IL18 была снижена (2E5 раз, p = 0,03) в инфицированной коже по сравнению с неинфицированной кожей (фиг. 5).

Рисунок 5. Экспрессия гена эксплантата кожи, оцененная после 10 дней заражения. Относительную экспрессию оценивали с использованием неинфицированной кожи того же донора в качестве эталонного образца для нормализации с геном B2M. N = 4 биологических повтора, проанализированных в трех повторностях. Данные представлены в виде медианы и IQR, проанализированных с помощью теста Манна – Уитни U .

Устранение неполадок 5 : Во время экстракции РНК кожи необходимо разрезать, раздробить или измельчить кожу на крошечные кусочки, поскольку это увеличивает количество РНК, экстрагированной из грибковых и человеческих клеток в образце.

Устранение неисправностей 6 : При использовании TRIzol для экстракции РНК необходимо дважды осаждать РНК для повышения чистоты РНК. Промывку 75% этанолом следует проводить дважды или трижды, чтобы избежать загрязнения белком и фенолом.

Протеомика

Четыре биологические повторы для каждого условия ( T.rubrum инфицированную и незараженную кожу через 10 дней инкубации для образцов ткани и через 1, 2, 4 и 8 дней инкубации для супернатантов) анализировали с помощью ЖХ-МС / МС. Идентифицированные белки были проверены и отобраны для дальнейшего анализа онтологии генов (GO) с использованием онлайн-инструмента консорциума GO (см. Текст сноски 3).

Количество белков, идентифицированных в ткани с помощью анализа дробовиком, было выше, чем соответствующее количество, идентифицированное в восстановленной среде / супернатанте. В ткани был обнаружен в общей сложности 2451 белок, но только 1229 белков удовлетворяли критериям включения для дальнейшего анализа.Между тем, в отфильтрованных и извлеченных супернатантах было обнаружено 523 белка, но только 201 соответствовал критериям включения для дальнейшего анализа. После анализа генной онтологии белков, обнаруженных в тканях и супернатантах, наиболее важными биологическими процессами в обоих случаях были идентифицированы клеточные процессы и метаболические процессы. Ответ на стимул был третьим по важности процессом в супернатантах (рис. 6).

Рисунок 6. Процент биологических процессов ГО, происходящих в течение Т.rubrum инфекция. (A) Биологический процесс на основе белков, идентифицированных в ткани (процент совпадений гена по сравнению с общим числом совпадений процесса, совпадения = 1553). (B) Биологический процесс из белков, идентифицированных в супернатантах (процент совпадений гена по сравнению с общим числом совпадений процесса, совпадения = 302).

Определенные белки, участвующие в пролиферации и дифференцировке кератиноцитов, были идентифицированы в неинфицированной коже. Белки, участвующие в усилении дифференцировки (Кератин 9, пятикратный, p = 0.017) и дифференцировка на поздних стадиях (Каспаза 14, -трёхкратная, p = 0,015) значительно различались в инфицированной коже (фиг.7). Уровни отдельных белков, обнаруженных в инфицированной коже, были нормализованы по отношению к уровням, обнаруженным в неинфицированной коже, и сравнивались с помощью теста Student t .

Рисунок 7. Доказательства продолжающегося распространения в коже во время инфекции T. rubrum . В таблице показано кратное изменение уровней белка в коже, инфицированной T.rubrum относительно уровней, обнаруженных в неинфицированной коже. Кератины, выделенные курсивом, обнаруживаются в эпителиальных клетках. Student t — результаты теста, где p <0,05 является статистически значимым. Кератины, участвующие в пролиферации и дифференцировке, показаны цветным текстом. На рисунке показаны функции и локализация кератинов в эпидермисе.

Устранение неполадок 7 : Извлечение РНК и белков из одного и того же образца кожи увеличивает время, необходимое для его обработки.Оба процесса экстракции могут быть остановлены на стадии осаждения и храниться при -20 ° C не менее года, что позволяет завершить процесс позже.

Устранение неполадок 8 : На чувствительность Q-Exactive могут влиять белки в буфере для ресолюбилизации. Таким образом, мы разделили осадок белка пополам, что позволило нам количественно определить количество белков в буфере для ресолюбилизации и оценить количество белков в другой половине, которые должны быть переварены трипсином.

Устранение неполадок 9: Несмотря на то, что фильтрация выполнялась перед ЖХ-МС / МС, чтобы избежать большей части сывороточного альбумина из FCS, альбумин все же был идентифицирован с помощью Q-Exactive.Во время биоинформатического анализа из него был исключен альбумин, предположительно являющийся загрязняющим веществом. Важно иметь образец среды с добавками для использования в качестве холостого контроля и анализировать его с помощью ЖХ-МС / МС перед анализом супернатантов, полученных в экспериментах на коже, во избежание смещения из-за белков из FCS.

Обсуждение

В этом исследовании мы описываем методологию изучения SFI с использованием эксплантатов кожи человека. Этот метод позволяет воспроизводить результаты, несмотря на то, что кожа получена от разных доноров.Использование этой модели ex vivo дает более релевантные результаты, отражающие то, что происходит in vivo по сравнению с другими моделями. Было показано, что на эпидермальных моделях животных наблюдаются другие воспалительные процессы, чем у людей. Эти различия основываются, во-первых, на различии метаболизма и анатомии кожи человека и животных. Эпидермис и дерма мыши не такие многослойные и толстые, как кожа человека (Groeber et al., 2011). Кроме того, процесс заживления ран у мышей происходит быстрее и не оставляет рубцов.Кроме того, некоторые подтипы дендритных клеток мышей не обнаруживаются в коже человека (Gudjonsson et al., 2007). Наконец, реконструированные модели эпидермиса мышей показали, что экспрессия генов цитокинов, в частности IL22 и IL17R , выше в эпидермисе человека, чем в реконструированном эпидермисе мышей (Pohin et al., 2017).

Суррогаты для кожи человека, такие как однослойная культура кератиноцитов человека, слой рогового слоя и реконструированный эпидермис, также имеют некоторые ограничения, которых можно избежать с помощью эксплантатов кожи.Хотя реконструированный эпидермис обладает почти всеми преимуществами полнослойных эксплантатов кожи, в большинстве этих моделей отсутствуют дендритные клетки и меланоциты (Groeber et al., 2011). Культуры монослоя кератиноцитов и слой рогового слоя плохо дифференцируются или не дифференцируются, соответственно, что приводит к меньшему количеству экспрессируемых генов или различным паттернам экспрессии генов по сравнению с реконструированным эпидермисом и / или нормальным эпидермисом. Некоторые из генов, которые не экспрессируются или имеют разные паттерны экспрессии, включают ICAM1, , цитокератины, десмоколлин3 и лорикрин (Bernard et al., 2002; Мехул и др., 2004; Rechavi et al., 2006). Кроме того, использование ex vivo кожи человека и реконструированного эпидермиса на всю толщину позволяет исследовать местно применяемые лекарственные препараты, местные эффекты антисептиков и биопленки.

Национальный центр по замене, усовершенствованию и сокращению количества животных в исследованиях (NC3Rs) по социальным и этическим причинам выступает за сокращение и адаптацию использования животных в фармацевтических, химических, пестицидных и косметических исследованиях (Burden et al., 2015; Прескотт и Лидстер, 2017). Использование эксплантатов кожи человека в исследовании SFI представляет собой альтернативу использованию на животных.

Другие потенциальные преимущества модели кожи человека ex vivo для изучения SFI были показаны Poyntner et al. (2016). Эта группа описала и улучшила количество аннотированных генов, кодирующих белок в транскриптоме Exophiala dermatitidis (Poyntner et al., 2016), и протестировала мутант поликетидсинтазы ( PKS1 ) E.dermatitidis , чтобы оценить роль меланина при кожной инфекции (Poyntner et al., 2018).

Проблема использования кожных эксплантатов в исследованиях связана с продолжительностью жизни кожной ткани. В некоторых исследованиях сообщается о более низкой продолжительности жизни и высокой скорости апоптоза кожных эксплантатов, например, инкубация в течение 5–6 дней при 37 ° C (Kleszczyński and Fischer, 2012). Однако в этих исследованиях сыворотка не добавлялась в среду для роста кожи. Кроме того, инкубация полной толщины кожи (эпидермиса и дермы) улучшает пролиферативную способность кератиноцитов (Lee and Cho, 2005).Известно, что фибробласты в дерме играют роль в поддержании пролиферации эпидермиса дольше, чем модели, которые используют только эпидермис или монослои кератиноцитов (Groeber et al., 2011). Мы не наблюдали различий в уровнях апоптоза в неинфицированной ткани кожи через 24 часа, 10 и 14 дней инкубации, подтверждая, что кожа остается жизнеспособной в течение 10 и 14 дней при 37 ° C.

В этом исследовании было обнаружено больше доказательств жизнеспособности и пролиферативной способности ткани после 10 дней инкубации.Доказательства экспрессии IL6R были обнаружены в неинфицированной коже, которая не отличалась от инфицированной кожи, наряду с присутствием филаггрина и цитокератинов K1, K10, K5, K14, K15 в протеомном анализе. Кератины — это цитоскелетные филаменты, фундаментальные для структурной стабильности и механики многослойного эпидермиса. Экспрессия кератина различна во время клеточной дифференцировки. Кератины K5 / K14 / K15 являются основными кератинами, экспрессируемыми в недифференцированном базальном слое кератиноцитов (содержащем стволовые клетки), между тем, K1 / K10 являются основными кератинами в процессе дифференцировки кератиноцитов, а K2, филаггрин и каспаза 14 являются маркерами для терминальный процесс дифференцировки, ороговение и самые внешние слои эпидермиса (Denecker et al., 2008; Молл и др., 2008). В этом исследовании были обнаружены все эти кератины, что свидетельствует о всех стадиях пролиферации и дифференцировки неинфицированной кожи.

Во время инфекции, вызванной T. rubrum , были значительно затронуты три белка, участвующих в пролиферации и дифференцировке кератиноцитов (K9, K18 имели более высокие уровни, а уровни каспазы 14 были снижены). Характер этих белков во время кожной инфекции T. rubrum добавил доказательства индукции апоптоза, который наблюдали с использованием системы TUNEL в гистологических срезах.Каспаза 14, в отличие от других каспаз, не активируется апоптозом. Более низкие уровни этого белка во время грибковой инфекции отражают более низкую дифференцировку кератиноцитов (Rendl et al., 2002). Кроме того, в инфицированной коже были обнаружены более высокие уровни K18, которые не были обнаружены в незараженной коже. K18 обычно не обнаруживается в нормальной здоровой коже, однако его идентификация при воспалительных состояниях была описана как хороший маркер раннего апоптоза (Caulín et al., 1997).

В нашей модели грибковая инфекция была инициирована после повреждения эпидермиса иглой.Однако в будущем также можно будет выяснить, могут ли грибковые инфекции инициировать успешные инфекции, не повреждая поверхность кожи, а также влияют ли различные методы повреждения на взаимодействия хозяин-патоген и, в конечном итоге, на развитие успешной инфекции. Другие методы повреждения, которые можно исследовать на предмет их влияния на грибковую инфекцию, включают истирание (Gao et al., 2013), УФ-повреждение (Khalil, 2018), лазерное повреждение (Marquardt et al., 2015) или ожоги (Emanuelsson and Kratz, 1997).

Нейтрофилы, в отличие от Т-лимфоцитов и дендритных клеток, не являются нормальными резидентными клетками кожи, но рекрутируются и локально присутствуют в большом количестве через 24 часа после повреждения кожи (Gillitzer and Goebeler, 2001). Рекрутирование нейтрофилов не происходило или происходило не полностью для эксплантатов кожи, использованных в этих экспериментах, поскольку образцы кожи берутся у донора сразу после хирургического разреза кожи донора. Следовательно, модель, использованная в наших экспериментах, может рассматриваться как нейтропеническая кожа.Однако модель все еще может использоваться для оценки передачи сигналов рекрутирования нейтрофилов. Доказательства этого процесса наблюдались во время инфицирования T. rubrum , поскольку экспрессия гена CXCL8 была увеличена в ткани, что свидетельствует о попытках привлечь иммунные клетки к поврежденной ткани. Это один из недостатков этой модели, поскольку она моделирует только прямые взаимодействия и ответы клеток кожи с грибами. Отсутствие вовлечения кровотока и циркулирующих иммунных клеток ограничивает возможности моделирования взаимодействий между хозяином и патогеном; однако в будущем можно будет расширить модель, дополнив модель иммунными клетками, добавленными в культуральную среду (Kühbacher et al., 2016).

Дополнительные доказательства иммунного ответа на T. rubrum могут быть получены из наших результатов. Более высокая экспрессия CCL20 во время инфицирования T. rubrum может отражать попытки рекрутировать Treg и дендритные клетки (Homey et al., 2000). Во время инфекции T. rubrum мы обнаружили, что IL18 имеет пониженную экспрессию, что может отражать то, что клетки TH 2 не рекрутируются или не возникает IFN-зависимого хронического воспаления (Nakanishi et al., 2001). Кроме того, низкая экспрессия IL18 может быть связана с деструктивным воздействием на эпидермис, наблюдаемым во время инфицирования T. rubrum в этом исследовании.

Основные недостатки использования кожных эксплантатов при исследовании SFI связаны с доступом к тканям и межиндивидуальными вариабельными реакциями на инфекцию. Доступ к эксплантатам кожи, использованным в этом проекте, осуществлялся через третье лицо. Другие варианты доступа к тканям могут быть через местные больницы. В первом варианте третья сторона помогает с этическим одобрением; однако стоимость эксплантатов выше, чем при получении местных тканей.Недостатками при подаче этического одобрения на месте может быть время, необходимое для получения одобрения, и эти задержки следует учитывать при планировании исследований с использованием эксплантатов кожи.

В предыдущих отчетах и ​​обзорах об использовании кожных эксплантатов для изучения различных заболеваний сообщалось о межиндивидуальной вариабельности среди доноров кожи (Bernard et al., 2002; Groeber et al., 2011). В нашем исследовании эта вариабельность была обнаружена только во время анализа экспрессии генов, когда повышенная или пониженная экспрессия конкретного гена была более очевидной для одного или двух биологических повторов, но с аналогичной тенденцией, наблюдаемой для остальных образцов.

Заключение

Протокол, представленный здесь, описывает методологию успешного моделирования кожи человека инфекции T. rubrum . Это воспроизводимая модель, которая представляет собой вариант изучения не только этой инфекции, но и других SFI, с получением более близких результатов к тем, которые мы обычно наблюдаем клинически. Важно отметить, что это согласуется с целями NC3R, заменяя использование животных в исследованиях.

Авторские взносы

DC-L участвовал в разработке экспериментов и проводил эксперименты, описанные в рукописи, анализировал данные и писал рукопись.КМ внес свой вклад в управление проектом, надзор и отредактировал рукопись. DM является автором-корреспондентом, главным научным руководителем и участвовал в написании и редактировании рукописи.

Финансирование

Этот проект финансировался стратегической премией Wellcome Trust в области медицинской микологии и грибковой иммунологии 097377. Мы хотели бы поблагодарить Центр медицинских исследований по медицинской микологии при Университете Абердина (MR / N006364 / 1) за поддержку.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Спасибо г-же Люсинде Уайт из отделения микроскопии и гистологии Института медицинских наук Университета Абердина, Абердин, Соединенное Королевство, за обучение работе с микроскопами и обработке с помощью SEM. Выражаю благодарность доктору Дэвиду Стеду из Абердинского центра протеомики, Абердинский университет, Абердин, Соединенное Королевство, за обработку образцов белка.

Сноски

  1. lifescience.roche.com/en_gb/brands/universal-probe-library.html # assay-design-center
  2. secure.eurogentec.com/life-science.html
  3. geneontology.org/

Список литературы

Бернар Ф. X., Педретти Н., Росди М. и Дегерси А. (2002). Сравнение профилей экспрессии генов в монослойных культурах кератиноцитов человека, восстановленном эпидермисе и нормальной коже человека; транскрипционные эффекты лечения ретиноидами в восстановленном эпидермисе человека. Exp. Дерматол. 11, 59–74.DOI: 10.1034 / j.1600-0625.2002.110107.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Брильханте, Р. С. Н., Кордейро, Р. А., Гомес, Дж. М. Ф., Сидрим, Дж. Дж. С. и Роча, М. Ф. Г. (2006). Дерматофитоз собак, вызванный антропофильными видами: молекулярная и фенотипическая характеристика Trichophytontonsurans . J. Med. Microbiol. 55, 1583–1586. DOI: 10.1099 / jmm.0.46665-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Бэрден, Н., Чепмен, К., Сьюэлл, Ф., Робинсон, В. (2015). Новаторство в лучшей науке с помощью 3rs: введение в национальный центр по замене, усовершенствованию и сокращению количества животных в исследованиях. J. Am. Доц. Лаборатория. Anim. Sci. 54, 198–208. DOI: 10.2106 / JBJS.G.01503

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Каулин К., Сальвесен Г. С. и Осима Р. Г. (1997). Расщепление кератина 18 каспазой и реорганизация промежуточных филаментов во время апоптоза эпителиальных клеток. J. Cell Biol. 138, 1379–1394. DOI: 10.1083 / jcb.138.6.1379

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дансо, М. О., Беркерс, Т., Миеремет А., Хаусил, Ф., и Баустра, Дж. К. (2015). Модель кожи человека ex vivo для изучения восстановления кожного барьера. Exp. Дерматол. 24, 48–54. DOI: 10.1111 / exd.12579

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чу, Д. Х., Хааке, А. Р., Хобрук, К., Лумис, К.А. (2003). Строение и развитие кожи. in Дерматология Фитцпатрика в общей медицине, часть вторая . (ред.) И. М. Фридберг, А. З. Эйзен, К. Вольф, К. Ф. Остин и Л.А. Голдсмит. Нью-Йорк, Нью-Йорк: пресса MGraw-Hill.

Эмануэльссон, П., и Кратц, Г. (1997). Характеристика новой модели ожоговой раны in vitro. Бернс 23, 32–36. DOI: 10.1016 / S0305-4179 (96) 00073-3

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фэуэй, Э., Камбье, Л., Миньон, Б., Пумей, Ю., и Ламбер де Рувруа, К. (2017). Моделирование дерматофитии в реконструированном эпидермисе человека: новый инструмент для изучения механизмов заражения и тестирования противогрибковых агентов. Med. Mycol. 55, 485–494. DOI: 10.1093 / mmy / myw111

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гао, Ю., Ван, X., Чен, С., Ли, С., и Лю, X. (2013). Острое нарушение кожного барьера при повторном снятии ленты: модель повреждения кожного барьера in vivo. Skin Res.Technol. 19, 162–168. DOI: 10.1111 / srt.12028

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гиллитцер Р. и Гебелер М. (2001). Хемокины в заживлении кожных ран. J. Leukoc. Биол. 69, 513–521. DOI: 10.1189 / jlb.69.4.513

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гребер Ф., Холейтер М., Хэмпель М., Хиндерер С. и Шенке-Лейланд К. (2011). Тканевая инженерия кожи — в vivo и vitro приложениях. Adv. Препарат Делив. Ред. 63, 352–366. DOI: 10.1016 / j.addr.2011.01.005

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гуджонссон, Дж. Э., Джонстон, А., Дайсон, М., Вальдимарссон, Х., и Элдер, Дж. Т. (2007). Мышиные модели псориаза. J. Investig. Дерматол. 127, 1292–1308. DOI: 10.1038 / sj.jid.5700807

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Guilloteau, K., Paris, I., Pedretti, N., Boniface, K., Juchaux, F., Huguier, V., et al. (2010). Воспаление кожи, вызванное синергическим действием IL-17A, IL-22, онкостатина M, IL-1 и TNF-повторяет некоторые особенности псориаза. J. Immunol. 184, 5263–5270. DOI: 10.4049 / jimmunol.0
4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Homey, B., Dieu-Nosjean, M. C., Wiesenborn, A., Massacrier, C., Pin, J. J., Oldham, E., et al. (2000). Повышающая регуляция макрофагального воспалительного протеина-3 / ccl20 и cc хемокинового рецептора 6 при псориазе. J. Immunol. 164, 6621–6632. DOI: 10.4049 / jimmunol.164.12.6621

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Huang, X. Z., Liang, P. P., Ma, H., Jin, S. C., Yi, J. L., Chen, Z. R., et al. (2015). Влияние супернатанта культуры, полученного из Trichophyton rubrum , выращенного в среде для ногтей, на молекулы HaCaT, связанные с врожденным иммунитетом. Подбородок. Med. J. 128, 3094–3100. DOI: 10.4103 / 0366-6999.169106

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Клещинский, К.и Фишер Т.В. (2012). Разработка краткосрочной модели культуры органов на полной толщине кожи человека in vitro в бессывороточных условиях. Arch. Дерматол. Res. 304, 579–587. DOI: 10.1007 / s00403-012-1239-z

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кюбахер А., Зон К., Бургер-Кентишер А. и Рупп С. (2016). Модель кожи человека с добавлением иммунных клеток для изучения грибковых инфекций в программе Идентификация грибковых патогенов человека. Методы молекулярной биологии т.1508 (изд) T. Lion 439–449. Humana Press, Нью-Йорк, Нью-Йорк. DOI: 10.1007 / 978-1-4939-6515-1_25

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Ли, Д. Ю., и Чо, К. Х. (2005). Влияние эпидермальных кератиноцитов и дермальных фибробластов на формирование базальной мембраны кожи в трехмерных системах культивирования. Arch. Дерматол. Res. 296, 296–302. DOI: 10.1007 / s00403-004-0529-5

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лян, П.П., Хуанг, X. Z., Yi, J. L., Chen, Z. R., Ma, H., Ye, C. X., Chen, X. Y., et al. (2016). Модель инфекции Trichophyton rubrum на основе реконструированного эпидермиса человека — Episkin ® . Подбородок. Med. J. 129, 54–58. DOI: 10.4103 / 0366-6999.172573

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ливак К. Дж. И Шмитген Т. Х. (2001). Анализ данных относительной экспрессии генов с использованием количественной ПЦР в реальном времени и метода 2-ΔΔCT. Методы 25, 402–408. DOI: 10.1006 / meth.2001.1262

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лоссос, И. С., Червински, Д. К., Вексер, М., и Леви, Р. (2003). Оптимизация количественных параметров ОТ-ПЦР в реальном времени для исследования лимфоидных злокачественных новообразований. Лейкемия 17, 789–795. DOI: 10.1038 / sj.leu.2402881

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Марквардт Ю., Аманн, П. М., Хейсе, Р., Чая, К., Steiner, T., Merk, H. F., et al. (2015). Характеристика новой стандартизированной трехмерной модели заживления кожных ран человека с использованием непоследовательного фракционного ультраимпульсного лечения CO2-лазером. Lasers Surg. Med. 47, 257–265. DOI: 10.1002 / LSM.22341

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Méhul, B., Asselineau, D., Bernard, A. S., Leclaire, J., Régnier, M., Schmidt, R., et al. (2004). Профили экспрессии генов трех различных моделей реконструированного эпидермиса человека и классических культур кератиноцитов с использованием массивов CDNA. Arch. Дерматол. Res. 296, 145–156. DOI: 10.1007 / s00403-004-0491-2

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Накамура М., Рикимару Т., Яно Т., Мур К. Г., Пула П. Дж., Скофилд Б. Х. и др. (1990). Полнослойные эксплантаты кожи человека для тестирования токсичности химических веществ, применяемых местно. J. Investig. Дерматол. 95, 325–332. DOI: 10.1111 / 1523-1747.ep12485073

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Наканиши, К., Йошимото, Т., Цуцуи, Х. и Окамура, Х. (2001). Интерлейкин-18 регулирует ответы как Th2, так и Th3. Annu. Rev. Immunol. 19, 423–474. DOI: 10.1146 / annurev.immunol.19.1.423

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Недошитко, Б., Соколовска-Войдыло, М., Рукеманн-Дзюрдзиньска, К., Рошкевич, Й., Новицки, Р. Дж. (2014). Сеть хемокинов и цитокинов в патогенезе воспалительных заболеваний кожи: атопического дерматита, псориаза и мастоцитоза кожи. Postepy Dermatol. Алергол. 31, 84–91. DOI: 10.5114 / pdia.2014.40920

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ng, K. W., Pearton, M., Coulman, S., Anstey, A., Gateley, C., Morrissey, A., et al. (2009). Разработка модели кожи человека ex vivo для внутрикожной вакцинации: жизнеспособность тканей и поведение клеток Лангерганса. Vaccine 27, 5948–5955. DOI: 10.1016 / j.vaccine.2009.07.088

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Перес, Н.Т., Сильва, Л. Г., да Сильва, Р. С., Якоб, Т. Р., Персиноти, Ф. Г., Роча, Л. Б. и др. (2016). Модели инфекции vitro и ex vivo помогают оценить молекулярные аспекты взаимодействия Trichophyton rubrum со средой хозяина. Med. Mycol. 54, 420–427. DOI: 10.1093 / mmy / myv113

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пирес, К. А., Крус, Н. Ф., Лобато, А. М., Соуза, П. О., Карнейро, Ф. Р., Мендес, А.М. (2014). Клинико-эпидемиологический и терапевтический профиль дерматофитии. An. Бюстгальтеры. Дерматол. 89, 259–264. DOI: 10.1590 / abd1806-4841.20142569

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Pohin, M., Veaute, C., Garnier, J., Barrault, C., Cronier, C., Huguier, V., Favot, L., et al. (2017). Разработка новой модели реконструированного эпидермиса мыши и характеристика ее ответа на провоспалительные цитокины. J. Tissue Eng. Regen. Med. 12, e1098 – e1107 DOI: 10.1002 / термин.2442

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пойнтнер, К., Блази, Б., Аркалис, Э., Мирастский, В., Стерфлингер, К., и Тафер, Х. (2016). Транскриптом Exophiala dermatitidis во время инфекции модели кожи ex-vivo . Перед. Cell. Заразить. Microbiol. 6: 136. DOI: 10.3389 / fcimb.2016.00136

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пойнтнер, К., Мирастский, У., Стерфлингер, К., и Тафер, Х. (2018). Транскриптомы Изучение мутанта Exophiala Dermatitidis PKS1 на модели кожи ex vivo : важен ли меланин для инфекции? Перед. Microbiol. 9: 1457. DOI: 10.3389 / fmicb.2018.01457

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

Queiroz-Telles, F., de Hoog, S., Wagner, C.L., Santos, D., Guedes Salgado, C., Vicente, V.A., Bonifaz, A., et al. (2017). Хромобластомикоз. Clin. Microbiol. Rev. 30, 233–276.DOI: 10.1128 / CMR.00032-16

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рехави, Г., Меворах, Д., Гал, Х., Ингбер, А., Вербовецкий, И., Гивол, Д. и др. (2006). Профиль экспрессии гена эпидермиса человека in vivo , индуцированный УФ-В, отличается от такового в культивируемых кератиноцитах. Онкоген 25, 2601–2614. DOI: 10.1038 / sj.onc.1209292

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рендл, М., Бан, Дж., Мрасс, П., Майер, К., Ленгауэр, Б., Экхарт, Л. и др. (2002). Экспрессия каспазы-14 кератиноцитами эпидермиса регулируется ретиноидами дифференцированным образом. J. Investig. Дерматол. 119, 1150–1155. DOI: 10.1046 / j.1523-1747.2002.19532.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сюй В., Чон Хонг С., Цзя С., Чжао Ю., Галиано Р. Д. и Мустое Т. Х. (2012). Применение модели культуры кожи ex vivo человека неполной толщины в исследовании заживления кожных ран. Lab. Инвестировать. 92, 584–599. DOI: 10.1038 / labinvest.2011.184

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zaugg, C., Monod, M., Weber, J., Harshman, K., Pradervand, S., Thomas, J., et al. (2009). Профили экспрессии генов в патогенном дерматофите человека Trichophyton rubrum во время роста на белках. Эукариот. Cell 8, 241–250. DOI: 10.1128 / EC.00208-08

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

грибок кожи или ногтей | Уход за кожей | Система здравоохранения Генри Форда

Грибок может поражать кожу, а также ногти на руках и ногах.Грибковые инфекции могут быть вызваны дрожжами или дерматофитами (разновидностями грибов). Грибковая инфекция ногтей, называемая онихомикозом, может быть вызвана дрожжевыми грибками или дерматофитами. Распространенные кожные грибковые заболевания, вызванные дерматофитами, известны как микоз, зуд спортсменов и стригущий лишай.

Skin Fungus : Дрожжи присутствуют на коже каждого человека в небольших количествах и с большей вероятностью будут расти в теплых влажных условиях, например, при высоких температурах и высокой влажности в летние месяцы или в солнечных тропических районах.У людей с жирной кожей чрезмерный рост дрожжевых грибков может наблюдаться чаще, чем у людей с более сухой кожей. Грибковые кожные инфекции, вызываемые дерматофитами, также имеют тенденцию возникать на влажных участках кожи, таких как стопы или пах.

Грибок ногтей : Грибковые инфекции ногтей редки у детей и, как правило, чаще возникают у пожилых людей. Эти инфекции чаще всего вызываются дерматофитами, но могут быть вызваны плесенью или дрожжами. Грибок ногтей чаще встречается на ногтях ног из-за того, что он находится в обуви, в темной, влажной и теплой среде.Кроме того, пальцы ног имеют меньшее кровообращение по сравнению с пальцами, что затрудняет обнаружение и устранение грибковой инфекции ногтей на ногах.

Физический экзамен

Избыток дрожжевых грибков на коже приводит к образованию небольших чешуйчатых пятен розового или коричневого цвета на светлой коже и более светлых или белых пятен на более темной коже. Пятна могут быть разбросаны по рукам, груди и спине. Грибковые кожные инфекции, вызванные дрожжами или дерматофитами, могут вызывать зуд. Грибковые инфекции ногтей приводят к обесцвечиванию, утолщению, ломкости, рассыпчатости и деформации ногтей, которые трудно подрезать.Инфицированные ногти также могут отделяться от ногтевого ложа и вызывать боль или неприятный запах.

Лечение

  • Кожа и кожа головы: противогрибковые очищающие средства, шампуни, кремы или лосьоны и / или пероральные препараты
  • Ногти: противогрибковые кремы, лосьоны или гели, а также пероральные препараты

Исследователи проводят первое геномное исследование грибкового разнообразия кожи человека

На изображениях под флуоресцентным микроскопом показан волосяной фолликул в коже, окруженный бактериями и грибами.Образцы были получены с кожи на спине участника исследования. Грибы выглядят сине-зелеными, бактерии — розовыми, а клетки кожи и стержень волос — желтыми. Предоставлено: Алекс Вальм, NHGRI.

В то время как люди использовали силу дрожжей для брожения хлеба и пива, функция дрожжей или других видов грибов, обитающих в человеческом теле и на нем, изучена недостаточно. В первом исследовании грибкового разнообразия кожи человека исследователи Национального института здравоохранения секвенировали ДНК грибов на участках кожи здоровых взрослых людей, чтобы определить нормальные популяции на коже и обеспечить основу для исследования грибковых состояний кожи.

Поверхности кожи человека представляют собой сложные экосистемы для микроорганизмов, включая грибы, бактерии и вирусы, которые вместе известны как микробиом кожи. Хотя грибковые инфекции кожи поражают около 29 миллионов человек в Соединенных Штатах, грибки могут медленно и трудно расти в лабораториях, что затрудняет диагностику и лечение даже самых распространенных грибковых заболеваний кожи, таких как инфекции ногтей на ногах.

Исследовательская группа из Национального института исследования генома человека (NHGRI) и Национального института рака (NCI), входящих в состав NIH, расширила свое недавнее исследование секвенирования генома кожных бактерий, используя методы секвенирования ДНК, оптимизированные для идентификации грибов. Исследование появилось в раннем онлайн-выпуске Nature от 22 мая 2013 года.

Исследователи обнаружили, что на голове и туловище преобладает один тип грибов, принадлежащий к роду Malassezia .Руки, в которых обитает огромное количество бактерий, являются домом для относительно небольшого количества грибов. Напротив, ступни, включая ногти, пятки и перепонки пальцев ног, содержат огромное разнообразие.

«Применение секвенирования ДНК для изучения кожных грибков — это естественный прогресс в понимании микробной жизни, сосуществующей в нашем теле», — сказал научный директор NHGRI Дэниел Кастнер, доктор медицины, доктор философии. «Наряду с недавним секвенированием генома для определения бактериального разнообразия, этот анализ грибкового разнообразия обеспечивает более полную картину микробиома человека.«

«Грибковые сообщества занимают сложные ниши даже в человеческом теле», — сказала Хайди Конг, доктор медицины, соавтор и исследователь дерматологического отделения Центра исследований рака NCI. «Получив более полное представление о грибковых и бактериальных экосистемах, мы сможем лучше бороться с сопутствующими кожными заболеваниями, включая кожные заболевания, которые могут быть связаны с лечением рака».

Исследователи собрали образцы на 14 участках тела 10 здоровых взрослых людей.Секвенирование ДНК грибов в образцах выявило фрагменты ДНК, называемые филогенетическими маркерами, которые можно подсчитать и использовать для различения одного типа грибов от другого. Усилия по секвенированию сгенерировали более 5 миллионов маркеров из образцов, представляющих более 80 типов или родов грибов. Напротив, традиционные методы культивирования дали 130 колоний грибов, которые представляли только 18 родов грибов.

У 20 процентов участников исследования исследователи наблюдали такие проблемы, как масштабирование перепонки на пятках и пальцах ног или изменения ногтей на ногах, соответствующие возможным грибковым инфекциям.Из анализа секвенирования генома исследователи обнаружили, что у разных людей с инфекциями пятки есть общие грибковые сообщества в этом месте, в то время как у людей с инфекциями ногтей ног обнаруживаются совершенно разные грибковые сообщества.

«Секвенирование ДНК показывает большое разнообразие грибов, даже тех, которые трудно выращивать в культуре», — сказала Джули Сегре, доктор философии, соавтор и старший научный сотрудник отделения генетики и молекулярной биологии NHGRI. Ее опыт — разработка технологии секвенирования ДНК микробов.«Секвенирование ДНК позволило нам узнать неизмеримо больше о том, где преобладают грибы как часть микробиома кожи человека».

Исследователи идентифицировали грибы двух типов, Ascomycetes и Basidiomycetes, в рамках обычной переписи грибов на 14 участках кожи. Самый распространенный род Malassezia присутствовал на 11 из 14 участков тела, взятых в пробах. Исследователи обнаружили грибок Malassezia на каждой поверхности кожи здоровых добровольцев, будь то на затылке, за ушами, в ноздрях и на пятках.Пятки также были домом для многих дополнительных грибов, включая роды Aspergillus , Cryptococcus , Rhodotorula и Epicoccum .

«Методы идентификации, основанные на последовательностях ДНК, позволили нам дифференцировать виды грибов и сделать вывод, что разнообразие грибов сильно зависит от участка тела, а не от человека, у которого отбирают образцы», — сказал д-р Конг. Дерматолог, доктор Конг объяснил, почему эти участки были выбраны для исследования: «Наше исследование было сосредоточено на участках кожи, где мы обычно обнаруживаем кожные заболевания, связанные с грибками.«

Самый сложный участок, пяточка, является домом для около 80 видов грибов на уровне рода. Исследователи обнаружили около 60 типов в образцах мазков с ногтей и 40 типов в образцах с перепонок пальцев ног. Участки с умеренным грибковым разнообразием находятся внутри изгиба руки, внутри предплечья и ладони, причем каждое место поддерживает от 18 до 32 родов грибов. Удивительно, но участки тела на голове и туловище, включая спину, заднюю часть шеи, внутри ушей, за ушами и между бровями, имеют гораздо меньше типов грибов, от двух до 10 родов в каждом.

Исследовательская группа сравнила данные о грибковом разнообразии с кожными бактериями у одних и тех же здоровых взрослых людей. Они обнаружили, что в то время как руки имеют высокий показатель бактериального разнообразия, они имеют меньшее разнообразие грибов. Они обнаружили, что для участков на ногах верно обратное. Участки сердцевины тела не имели ни высокого бактериального разнообразия, ни высокого грибкового разнообразия. Ранее исследователи показали, что разнообразие бактерий можно предсказать по тому, является ли кожа влажной, сухой или жирной. Напротив, разнообразие грибов зависит от того, где находится конкретный участок кожи на теле.

Кроме того, исследователи обнаружили большее сходство в структуре грибкового сообщества на левой и правой сторонах тела одного и того же человека по сравнению с теми же частями тела у любых двух людей. Сообщества грибов также выглядят довольно стабильными с течением времени, с небольшими изменениями при тестировании в двух разных случаях с интервалом до трех месяцев.

«Данные нашего исследования дают нам базовые данные о нормальных людях, которых у нас никогда не было», — сказал доктор Сегре.«Суть в том, что ваши ноги изобилуют разнообразием грибов, поэтому носите шлепанцы в раздевалках, если вы не хотите смешивать грибки на ногах с чьими-то грибками».


Fungi предлагает новые подсказки в борьбе с астмой


Дополнительная информация:
dx.doi.org/10.1038/nature12171

Предоставлено
NIH / Национальный институт исследования генома человека

Ссылка :
Исследователи проводят первое геномное исследование грибкового разнообразия кожи человека (22 мая 2013 г.)
получено 17 декабря 2020
с https: // физ.org / news / 2013-05-genomic-survey-human-skin-sizes.html

Этот документ защищен авторским правом. За исключением честных сделок с целью частного изучения или исследования, никакие
часть может быть воспроизведена без письменного разрешения. Контент предоставляется только в информационных целях.

Болезнь желтого грибка — симптомы, лечение и уход

Желтый грибок у бородатых драконов часто подхватывают владельцы домашних животных, когда их кожа бородатого дракона желтая, коричневая или черная с пятнами , но что именно?

Статья Dr.Дональд Бьюкенен, ветеринар-компаньон, практикующий в Новой Шотландии, Канада.

CANV (Chrysosporium anamorph Nannizziopsis vriesii) — это довольно недавно определенный патоген, связанный с грибковой инфекцией, обычно известной как «болезнь желтого гриба». Название «желтая грибковая болезнь» происходит от желто-коричневого изменения цвета инфицированной кожи.

Обратите внимание, что хотя возбудитель, как полагают, был анаморфом Chrysosporium Nannizziopsis vriesii (CANV), он может смещаться в сторону N guarroi.

CANV принадлежит к группе кератинофильных грибов — это означает, что он любит расти на кератине (материале, из которого состоят чешуйки). Эти инфекции становятся все более распространенными в последние несколько лет, первоначально они были обнаружены в Северной Америке, затем в Европе, а теперь и в Австралии.

За это время возбудитель претерпел несколько изменений в названиях по мере того, как микробиологи изучали болезнь. Заболевание желтым грибком довольно хорошо задокументировано у нескольких видов рептилий.Это особенно разрушительно для бородатых драконов, часто даже смертельно.

Начальные стадии желтого гриба

Болезнь желтого гриба, или CANV, является первичным возбудителем. Это означает, что он может действовать самостоятельно, вызывая болезнь. Заболевание, вызванное желтым грибком (YFD), получило свое название от желтого или желтовато-коричневого цвета кожи, которое оно вызывает.

Грибок может поразить совершенно здоровых бородатых драконов в любое время. Однако следует учитывать несколько предрасполагающих факторов.

Причины болезни желтого гриба

Причины и состояния, которые могут повысить предрасположенность человека к инфекции желтого гриба, включают:

  • Стресс.
  • Переполненные условия
  • Антисанитарные условия, плохая программа уборки
  • Недостаточное питание
  • Кожный барьер особенно важен. Открытые поражения кожи, включая травмы, укусы или царапины, даже травмы ногтей на ногах, представляют собой значительный риск, поскольку они являются отправной точкой для CANV.

Считается, что существует бессимптомное состояние носительства, при котором внешне здоровая ящерица может быть источником инфекции.

Начальная стадия желтого грибка — это когда он проникает через кожу, питаясь кератином внутри чешуек.По мере созревания инфекции она может распространяться по коже, в результате чего появляется больше поражений, беспорядочно распределяющихся по коже. Со временем инфекция будет распространяться глубже, поражая жировой и мышечный слои, в конечном итоге поражая легкие, печень и селезенку.

Эти люди страдают системным грибковым заболеванием и очень больны, у них очень плохой прогноз. К сожалению, внешнее наблюдение не позволяет легко определить степень инфекции. Многие более глубокие инфекции диагностируются при патологоанатомическом исследовании.

Желтый гриб — гиперпигментация хвостовой трети тела.

Бородатый дракон имеет желтую кожу и другие симптомы

Самый очевидный симптом, который многие увидят, — это то, что кожа бородатого дракона становится желтой и со временем становится черной. Симптомы желтого гриба у бородатых драконов могут включать:

  • Аномальное линька. Часто одна из первых ласточек. Пораженные участки выглядят как незавершенный сарай; пораженные люди могут терять чаще.Корки на коже. Часто начинается с нескольких чешуек — корки могут иметь желтый или коричневый цвет. Может быть поражен любой участок тела.
  • Отек. Возможен отек в непосредственной близости от инфекции, но может затронуть всю конечность.
  • Изъязвление. внешний слой кожи может отслоиться, что приведет к появлению оголенных участков.
  • Притупление чешуек. Рубцовая ткань будет выглядеть уплощенной, с заметной потерей нормальной масштабной архитектуры.
  • Гиперпигментация или потемнение чешуек.Со временем желто-коричневые участки могут стать затемненными и черными, что указывает на хронический характер инфекции.
  • Гиперкератоз или шероховатость чешуек. По мере продолжения воспаления кожа может стать шероховатой.
  • Некротические пятна. Кожа может стать некротической (нежизнеспособной или мертвой). Важно, чтобы эти поражения были обработаны — в некоторых случаях это означает ампутации конечностей.
  • Анорексия. Больные животные могут потерять аппетит по мере того, как инфекция усваивается.
  • Задержка роста.Как и при любом системном заболевании, неоптимальный рост может быть простым признаком того, что что-то не так.
  • Патологические переломы. Глубокие инфекции могут распространяться за пределы кожи и на кости, особенно вокруг рта и конечностей. Пораженная кость может быть очень хрупкой, и ее легче всего сломать — даже при осторожных «рутинных» манипуляциях.
  • Летаргия. По мере прогрессирования болезни появляются общие признаки небрежности.
  • Смерть. CANV убивает бородатых драконов.

Притупление чешуек на каудальной части правой стороны головы, вызванное желтым грибком (CANV).Фото любезно предоставлено Шарлоттой.

Как вы лечите желтый гриб у бородатых драконов?

Для лечения желтого грибка у бородатых драконов:

  1. Позвоните своему ветеринару , чтобы записаться на прием.
  2. Есть несколько вещей, которые вы можете сделать дома, пока ждете своей встречи.
    — Изолируйте своего пораженного бородатого дракона, желтый гриб (CANV) — очень заразная болезнь.
    — Хлоргексидиновое мыло, разбавленное до 4%, может быть полезно для начала местного лечения инфекции.Мыло с хлоргексидином можно купить в аптеке или аптеке.
    — Минимизируйте воздействие окружающей среды. Никаких ненужных манипуляций, передвижения возле клетки или других действий, которые могут привести к стрессу.
    — Обеспечьте соответствие корпуса идеальным стандартам. Чистота (см. Пост о чистке) очень важна.
  3. Во время посещения ветеринаром будет взят полный анамнез, и ваш ветеринар проведет тщательный медицинский осмотр.
    К сожалению, болезнь желтого грибка не может быть диагностирована только физическим осмотром, поскольку поражения часто похожи на другие распространенные проблемы (травмы, бактериальные инфекции кожи и ожоги).
    Для окончательного диагноза необходима биопсия кожи. Животному вводят успокоительное, пока ветеринар выполняет полную биопсию кожи.
    В идеале этот образец должен быть отправлен в лабораторию для культивирования грибов (чтобы вырастить возбудителя), гистопатологии (исследование образца под микроскопом) и ПЦР или полимеразной цепной реакции (высокоспецифичный тест секвенирования ДНК).
    Хотя это рекомендуется, обширное тестирование не всегда возможно, и предположительный диагноз может быть установлен в каждом конкретном случае.
  4. Ранние поражения не всегда выглядят значительными, и бородатые драконы часто появляются в конце болезни. Из-за этого может потребоваться дальнейшее тестирование для оценки общего состояния здоровья животного.
    Эти тесты могут включать анализ крови или рентген. В некоторых случаях CANV поражает животных, потому что их иммунная система ослаблена, что придает большее значение системным диагностическим тестам.
  5. Как мы уже говорили, инфекция, скорее всего, не просто поражает кожу.Из-за этого недостаточно только местных лекарств. Лечение включает использование системных (пероральных или инъекционных) противогрибковых препаратов.
    Были изучены три препарата, в том числе:
    — кетоконазол,
    — итраконазол и
    — вориконазол.
    Противогрибковые препараты системного действия не лишены недостатков — они могут быть вредными для печени бородатых драконов и, как правило, довольно дороги.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.