Фунгицидное действие различных системных антимикотиков на грибы рода Candida in vitro
Учреждение Российской академии медицинских наук НИИ вакцин и сывороток им.И.И.Мечникова РАМН
Статья посвящена сравнительному анализу фунгицидной активности препаратов, содержащих флуконазол в качестве действующего вещества, на тест-штаммах 3 видов дрожжей рода Candida: C. albicans, C. parapsilosis, C. glabrata in vitro.Работу проводили двойным слепым методом. Были использованы дифлюкан, оригинальный препарат, содержащий флуконазол, и 5 его дженериков. Дрожжи высевали на среду Сабуро и ПГДА. В работе использовали луночно-диффузионный метод. Препараты в капсулах исследовали в суспензии в концентрациях 150 и 2 мг/мл. Контролем служил дифлюкан для внутривенного введения. Эксперименты проводили в 15-кратной повторности по 3 раза. Результаты оценивали по величине зоны ингибиции роста дрожжей (в мм).
При сравнительном изучении препаратов, содержащих флуконазол, наибольшую статистически достоверную фунгицидную активность на всех трех модельных штаммах дрожжей при максимальной (150 мг/мл) и минимальной (2 мг/мл) концентрации показал дифлюкан.
Фунгицидная активность капсулированной формы дифлюкана (2 мг/мл) и жидкой для внутривенного введения (2 мг/мл) статистически достоверно не отличалась как на C.albicans, так и на C.parapsilosis. Наиболее чувствительными к препарату оказались C.albicans и C.parapsilosis. Дифлюкан подавляет рост C. glabrata статистически достоверно более выраженно, чем другие препараты, содержащие флуконазол.
дрожжи
грибы рода Candida
антимикотики
фунгициды
флуконазол
1. Анкирская А.С., Муравьева В.В., Миронова Т.Г. и др. Генитальный кандидоз в структуре оппортунистических инфекций влагалища. Принципы лабораторной диагностики и значение мониторинга чувствительности грибов к антимикотикам //Акуш. и гин. — 2009. — № 5. — С. 31—37.
2. Анкирская А.С., Муравьева В.В., Фурсова С.А. Мониторинг видового состава и чувствительности к антимикотикам дрожжеподобных грибов, выделенных из влагалища женщин репродуктивного возраста. //Клин. микробиол. антимикроб.
химиотер. — 2006. — Т. 8, № 1. — С. 87—95.
3. Бурова С.А. Особенности возникновения и комплексного лечения кандидозных вульвовагинитов. // Лечащий врач. — 2003. — № 4. — С. 53—56.
4. Васильева Н.В., Выборнова И.В., Елинов Н.П. Чувствительность Candida species к флуконазолуи некоторым его дженерикам в испытаниях in vitro// Проб. мед. микол. — 2002. — Т.4, № 2. — С. 43—44.
5. Кунгуров Н.В, Герасимова Н.М., Вишневская И.Ф. Современные представления о лечении урогенитального кандидоза // Лечащий врач. — 2004. — № 6 . — С. 46—48.
6. Кунельская В.Я. Опыт применения микофлюкана (флуконазола) при лечении фарингомикоза. // Лечащий врач. — 2005. — № 1. — С. 67—69.
7. Сидоренко С.В., Колупаев В.Е. антибиотикограмма: дискодиффузионный метод. интерпретация результатов// http://www.rusmedserv.com/microbiology/standard/article_5html.
8. Сметник В.П., Марченко Л.А., Чернуха Г.Е. Опыт применения микофлюкана (флуконазола) для лечения кандидозного вульвовагинита// Лечащий врач.
— 2004. — № 2. — С. 73—76.
9. Талибов О.Б. Дженерики и эквивалентность лекарственных препаратов. http://www.rusmg.ru.
10. Pfaller M.A., Diekema D.J., Rinaldi M. et al. Gibbs and the Global Antifungal Surveillance Group.Results from the ARTEMIS DISK Global Antifungal Surveillance Study: a 6.5 — Year Analysis ofSusceptibilities of Candida and Other Yeast Species to Fluconazole and Voriconazole by Standardized Disk Diffusion Testing. //J. Clin. Microbiol. —2005. — Vol. 43, № 12. — P. 5848–5859.
Желтикова Татьяна Михайловна, д-р биол. наук, зав. лаб. Учреждения Российской академии медицинских наук НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова РАМН
Адрес: 105064, Москва, Малый Казенный пер., д.5а
Телефон: 8(495)917-42-55
E-mail: [email protected]
значение и обзор лучшие препаратов
Любой садовод знает, что растения могут болеть. От этого страдает урожай. Наиболее распространенными и опасными являются грибковые заболевания. Они поражают растение очень быстро, оставляя микроспоры.
Подавить рост грибков помогают вещества, называемые фунгицидами. Это химические препараты, предназначенные специально для борьбы с болезнетворными грибками. Применение фунгицидов в садоводстве имеет свои плюсы и минусы.
Содержание:
Механизм действия фунгицидов
Любые химические вещества, разработанные для борьбы с болезнями растений, вредителями, сорняками, называются пестицидами. Одной из разновидностей пестицидов являются фунгициды, которые имеют узкую направленность, они помогают избавиться от грибка. Действие препарата зависит от его разновидности. Одни фунгициды нацелены на профилактику, другие на лечение и уничтожение уже имеющегося грибка.
Фунгицидное действие – это воздействие препарата на споры грибка, которое тормозит его размножение и уничтожает клетки.
Лечить уже имеющийся грибок трудно, так как он быстро распространяется и поражает здоровые растения, поэтому большинство садоводов предпочитают использовать фунгициды в целях профилактики, чтобы предупредить возникновение болезней.
Использовать фунгициды можно до появления каких-либо признаков грибкового заболевания или уже после. К таким признакам относят черные или белые пятна на листьях и стеблях, поражение плодов, следы гниения, опадание листьев.
Механизм действия фунгицидов разнообразен. Часто он включает в себя:
- Иммунизацию растений. Вещества проникают в клетки растения и провоцируют выработку собственных защитных веществ, которые помогают бороться с грибком.
- Образование некроза. На первый взгляд такое действие может показаться вредоносным. Но участки некроза на растении – это защита. Они не позволяют грибку проникать глубже в ткани растения.
- Подавление энергетического обмена. Препараты нарушают процесс энергетического обмена в клетках грибка, не позволяя ему развиваться и размножаться.
- Гиперпаразитизм. Некоторые вещества борются с грибками следующим образом: они проникают в структуру растения, выделяют токсичные вещества, которые подавляют развитие грибка, а затем питаются продуктами их разложения.
Другими словами, препарат паразитирует на грибке.
Другими словами, препарат паразитирует на грибке.Препараты могут быть комплексными, то есть сочетать различное воздействие на растение и грибок. Однако большинство фунгицидов действуют избирательно, то есть направлены на определенные виды грибка.
Классификация современных фунгицидов
Фунгициды разделяются на группы. Классификаций достаточно много. Выбор того или иного препарата зависит от вида растения и самого грибка, цели и особенностей применения препарата. Универсального фунгицида не существует. Для каждого случая нужно подбирать свой вариант.
Каждая разновидность фунгицида имеет свои достоинства и недостатки. Нужно помнить, что один и тот же препарат может по-разному действовать на различных культурах. Также действие разнится при использовании различных доз и сроков.
Существует несколько классификаций фунгицида:
- По химическим свойствам. Фунгициды бывают органическими и неорганическими. В органических нет тяжелых металлов, они разлагаются естественным способом под действием бактерий. Неорганические фунгициды более стойкие и в некоторых случаях более эффективные, однако они требуют более осторожного использования и соблюдения точной дозировки.
- По действию на возбудителя заболевания. Эта классификация включает я себя профилактические и лечебные фунгициды. Первые предупреждают появление заражения, повышают иммунитет растений, их защитные силы. Вторые направлены на уничтожение уже имеющегося грибка.
- По цели применения. Цель у фунгицида может быть различная. Одни препараты предназначены для протравливания семян, другие – для обработки почвы, наземной части растений, плодов при хранении. Есть универсальные фунгициды, которые можно вносить почву и опрыскивать наземную часть растения одновременно.
- По характеру распределения в тканях растения. Многие садоводы стремятся приобрести те препараты, которые не проникают внутрь растения, то есть являются контактными. Они находятся только на поверхности растения, вызывая гибель грибка. Однако эффективность таких фунгицидов зависит от многих факторов: дозировки, равномерности распределения, осадков и погодных условий. Системные фунгициды проникают в ткани растения, поэтому действуют быстрее и не реагируют на погодные условия.
Неорганические фунгициды более стойкие и в некоторых случаях более эффективные, однако они требуют более осторожного использования и соблюдения точной дозировки.
Системные фунгициды проникают в ткани растения, поэтому действуют быстрее и не реагируют на погодные условия.Перед применением фунгицида нужно внимательно прочитать инструкцию. На препарате должно быть указано для какого растения и для борьбы с какими грибками он предназначен.
Преимущества и недостатки
Садоводы относятся к использованию фунгицидов по-разному. Одни стараются их избегать, так как считают, что они вредные для самих растений и плодов, а другие используют постоянно в целях профилактики, чтобы защитить свой урожай.
Однозначно можно сказать, что фунгициды оказывают определенное воздействие на растение. Вред от применения препаратов стараются минимизировать, но полностью исключить его трудно. Однако вред от фунгицидов не сравнится с вредным воздействием грибка, который способен полностью уничтожить урожай и остаться в почве.
Преимуществами фунгицидов являются:
- Высокая эффективность. Фунгициды обычно имеют широкий спектр действия, то есть уничтожают большое количество штаммов грибов. Есть более направленные препараты против определенного грибка, их эффективность также высока, если правильно подобрать препарат.
- Доступность. Фунгициды можно найти в любом садоводческом магазине. Цены на них разные, но можно легко найти препарат, который придется по карману.
- Быстрый эффект. Неорганические фунгициды действуют максимально быстро, органические чуть медленнее. Но в любом случае эффекта долго ждать не придется. Это очень важно при грибковых заболеваниях, которые быстро распространяются и заражают здоровые растения.
- Возможность использования на больших территориях. Фунгициды можно растворять в воде и обрабатывать большую территорию. Они позволяют обработать максимально большое количество культур за минимальный срок.
Есть более направленные препараты против определенного грибка, их эффективность также высока, если правильно подобрать препарат.Вопрос вреда фунгицидов поднимается довольно часто. Конечно, любые препараты, воздействуя на возбудителя заболевания, затрагивают и сам организм. Фунгициды нельзя назвать абсолютно безвредными, однако здесь поднимается вопрос соотношения пользы и риска.
К недостаткам иногда относят факт, что после обработки какое-то время нельзя есть плоды, если процедура проводилась во время плодоношения. Поэтому рекомендуют не пренебрегать профилактикой. В этом случае понадобятся меньшие дозы препарата, и вред для самого растения и окружающей среды будет минимальным.
Обзор лучших фунгицидов
Приобрести фунгициды можно легко на рынке или в специализированном магазине, заказать по интернету. Однако эффективности можно ожидать только в том случае, если препарат не является подделкой. Поэтому покупать его лучше у проверенных производителей.
Выбор препаратов довольно велик, выбрать бывает непросто. В интернете можно найти отзывы покупателей. Однако стоит учитывать специфику того или иного препарата. Что подошло одному садоводу, может разочаровать другого.
Среди наиболее популярных фунгицидов называют:
- Алирин Б. Это натуральный биофунгицид, в состав которого входит полезная почвенная микрофлора, позволяющая подавить размножение грибка. Препарат может использоваться против мучнистой росы, белой гнили, фитофтороза, ржавчинных и прочих грибков. Особенность этого фунгицида в том, что он не только может использоваться для почвы и наземной части растений, но и снижает уровень токсичности почвы после применения других химических веществ.
- Бордоская смесь. Один из наиболее сильных препаратов для борьбы с грибковыми заболеваниями растений. В его состав входит сульфат меди. Препарат можно использовать практически для любых садовых растений. Однако для человека эта смесь опасна. Использовать ее нужно осторожно, соблюдая правила безопасности и используя защитную одежду. Медный купорос в составе быстро и эффективно уничтожает любой грибок.
- Оксихом. Этот фунгицид считается контактно-системным. Его можно использовать и для профилактики, и для лечения грибковых заболеваний. Оксихом эффективен против мучнистой росы, макроспориоза, фитофтороза и других грибковых заболеваний. В состав препарата входят хлорокись меди и оксадиксил.
- Топаз. Этот системный фунгицид стал популярен уже достаточно давно. Обычно его используют для лечения мучнистой росы и ржавчины. Этот препарат эффективен и не обладает высокой токсичностью. Он начинает действовать уже через несколько часов после использования.
Препарат может использоваться против мучнистой росы, белой гнили, фитофтороза, ржавчинных и прочих грибков. Особенность этого фунгицида в том, что он не только может использоваться для почвы и наземной части растений, но и снижает уровень токсичности почвы после применения других химических веществ.
Некоторые садоводы для увеличения эффективности препаратов параллельно используют народные средства. Однако в большинстве случаев фунгицида вполне достаточно.
Как использовать фунгициды и чем их заменить?
Фунгициды можно применять несколькими способами: вносить в почву, опрыскивать растения или протравливать семена. Чтобы эффективность была высокой, нужно соблюдать сроки и правила применения фунгицидов:
- Использовать фунгициды нужно только по мере необходимости. Даже если заражение не произошло и фунгициды нужны только для профилактики, есть определенные сроки, когда заражение может произойти. Бесконтрольное применение фунгицидов может навредить урожаю.
- Контактные фунгициды защищают только те части растения, на которые они попадают. Поэтому необходимо опрыскивать растения тщательно и со всем сторон, чтобы ничего не упустить. Желательно делать это в безветренную погоду, чтобы часть препарата не развеяло ветром. Дождь значительно снизит эффективность препаратов.
- Системные фунгициды эффективны сразу вне зависимости от осадков. Однако грибки быстро вырабатывают к ним иммунитет, поэтому желательно использовать эти препараты не чаще 2 раз в год.
Поэтому необходимо опрыскивать растения тщательно и со всем сторон, чтобы ничего не упустить. Желательно делать это в безветренную погоду, чтобы часть препарата не развеяло ветром. Дождь значительно снизит эффективность препаратов.Некоторые садоводы категорические не хотят использовать химикаты для защиты от грибков, поэтому ищут, чем же заменить фунгициды. К сожалению, грибковые заболевания растений встречаются довольно часто, и отказаться от использования фунгицидов совсем получается редко. Можно использовать народные рецепты. Так, например, для борьбы с грибком рекомендуют настой чеснока, марганцовку или раствор серы. Однако нужно помнить, что эффективность этих средств не всегда высокая.
Если растения уже поражены грибком, эксперименты могут привести к потере времени и урожая.
Тем садоводам, которые не хотят использовать токсичные фунгициды, можно порекомендовать органические их разновидности. К органическим фунгицидам относят Бактофит, Фитоспорин и т.д. Они содержат живые микроорганизмы, поэтому безопасны для людей, животных и даже насекомых.
Больше информации можно узнать из видео:
Изучение фунгицидного действия нового биоцидного препарата Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»
УДК 619:632.952-092
ИЗУЧЕНИЕ ФУНГИЦИДНОГО ДЕЙСТВИЯ НОВОГО БИОЦИДНОГО ПРЕПАРАТА
Софронов В.Г. — д.в.н., профессор, зав.
кафедрой; *Аржаков В.Н. — д.в.н., профессор;
**Николаенко Н.Н. — к.в.н., доцент; **Николаенко Т. М. — к.в.н., доцент;
***Аржаков П.В. — к.б.н., с.н.с.
Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана *ФГБОУ ВПО Омский государственный аграрный университет имени П.А. Столыпина **ГАОУ СПО ЧАО «Чукотский многопрофильный колледж» ***ГНУ ВНИИ бруцеллеза и туберкулёза животных Россельхозакадемии, г. Омск
тел.: (843) 273-97-75
Ключевые слова: Дезинфекция, фунгицидное действие, гифы, полифункциональный препарат.
Keywords: Disinfection, fungicide action, hyphas, multipurpose preparation.
Одной из наиболее острых проблем в сельском хозяйстве является проблема хранения продуктов, кормов, добавок, препаратов и т.
п. Помещения, обычно используемые в этих целях — подвалы, склады, овощехранилища и т.п., как правило, имеют недостаточную вентиляцию, что приводит к сырости и появлению различных грибков. Это неизбежно ведет к порче хранящейся продукции [1,2,3].
Так, грибки очень быстро поражают практически любые поверхности, на которых поселяются, а продукты, корма и т.п. делают непригодными, отравляя их токсинами [4,5].
В связи с изложенным, целью наших исследований явилось изучение фунгицидных свойств новой моюще-дезинфицирующей композиции.
Материалы и методы. Исследования проводили в соответствии с методическими указаниями о порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики; утв. ГУВ МСХ СССР 27.12.87г, методическими рекомендациями по ускоренному определению устойчивости бактерий к дезинфицирующим средствам от 10.01.
2002 г.
В опытах использовали рабочий раствор новой моюще-дезинфицирующей композиции в концентрации 1, 2, 3 % и экспозициях 15, 30, 60 минут, опыты проводили без органической защиты.
Тест-культуры грибов: Penicillium expansum; Ascosphaera apis; Aspergillus fumigatus.
Для исследования фунгицидной активности препарата использовали кусочки обезжиренного батиста, размером 0.5-1.0 см, стерилизованного в автоклаве. Нужное для исследования количество стерильного батиста клали в стерильную чашку Петри и заливали 10-20 мл 2-х миллиардной
взвеси культуры грибов. После внесения импрегнированных культурой тест-объектов в дезинфицирующий раствор и экспозиции (15, 30, 60 мин), проводили промывку «носителей» в стерильной дистиллированной воде. Далее производили посев на питательную среду (Сабуро) с последующей инкубацией в термостате.
В качестве контроля фунгицидного действия нового дезосредства использовали стерильный изотонический раствор NaCl.
Для изучения обеззараживающих свойств нового препарата использовали трансмиссионную электронную микроскопию. Для этого образцы фиксировали в 4%-ном растворе параформальдегида при +4оС в течение 48 ч. Взвесь культуры грибов центрифугировали в течение 20 мин при 6000 об/мин. Тест-образцы разрезали на две части, которые складывали стопкой. Затем тест-образцы и полученный после центрифугирования осадок дофиксировали 1%-ным раствором осмиевой кислоты, обезвоживали по стандартной методике в растворах этилового спирта возрастающей концентрации и ацетоне, и заливали в смесь эпон-аралдит. Ультратонкие срезы готовили на микротоме Райхерт-Янг (Австрия). Срезы контрастировали уранилацетатом и цитратом свинца. Исследовали в электронном микроскопе JEM 1400 (Jeol, Япония), фотосъемку проводили с помощью встроенной цифровой камеры Jeol и цифровой камеры бокового ввода Veleta (SIS, Германия).
Результаты исследований и их обсуждение. В отношении P. ехрашиш и As. apis фунгицидный эффект препарата отмечен при воздействии 2%-ной концентрации и 60-и минутной экспозиции, на A. fumigatus обеззараживающее действие оказывала 3%-ная концентрация при 30 минутной экспозиции (таблица).
1. Фунгицидные свойства нового препарата
Концентрация, в % (по препарату) Экспозиция, в мин Культуры грибов
Pénicillium expansum Ascosphaera apis Aspergillus fumigatus
1,0 15 + + +
30 + + +
60 + + +
2,0 15 + + +
30 + + +
60 — — +
3,0 15 + + +
30 — — —
60 — — —
Контроль NaCl + + +
Примечание: (+)-рост; (-)- отсутствие роста.
При электронно-микроскопическом исследовании нативного препарата тест-культуры Р. ехрашиш в полях зрения определяли:
экзоперидиум (фигурная стрелка), более толстый и светлый слой -мезоперидиум (белая стрелка) оптически плотную цитоплазму (стрелка) (рис. №1).
После воздействия 2%-ной концентрации и экспозиции 60 минут наблюдали полную утрату оболочки гиф (отсутствие экзоперидиума и мезоперидиума), эти изменения приводили к дальнейшему лизису гиф (рисунок 2).
Рисунок № 1.
Заключение. В результате исследований установлено, что новый многофункциональный биоцидный препарат обладает фунгицидным действием. При электронно-микроскопическом исследовании установлено, что после воздействия рабочих растворов препарата наблюдается полная
утрата оболочки гиф грибов (отсутствие экзоперидиума и мезоперидиума), эти изменения приводили к дальнейшему лизису гиф, механизм фунгицидного действия связан с разрушением оболочки гиф грибов.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Белова, В.И. Oсновные направления исследований по разработке дезинфицирующих препаратов / В.И. Белова, Л.И. Арефьева, В.Е. Лиманов и др. // Актуальные вопросы совершенствования дезинфекционных и стерилизационных мероприятий. Ч.2 — М., 1990. С. 137 — 141. 2. Джупина, С.И. Контроль эпизоотических процессов факторных инфекционных инфекционных болезней /С.И. Джупина// Теор. и практ. аспекты возникновения и развития болезней животных и защита их здоровья в современных условиях: Междунар. конф. (3-4 октября 2000 г., Воронеж). — Воронеж, 2000. — С. 169 — 170. 3. Кузнецова, Л.С. Состав плесневых грибов, поражающих поверхность мясной продукции / Л.С. Кузнецова, Н.В. Михеева, Е.В. Казакова, С.М. Qзерская, Н.Е. Иванушкина // Мясная индустрия.-2009.-№3.-С.28-30. 4. Reybrouck, G. The testing of disinfectants / G. Reybrouck // Intern. Biodeterioration and Biodegradation. -1998. — №41. — Р. 269 — 272. 5. Lawrence, Е. Advisory Committee on Dangerous Pathogens (ACDP) seminar on microbiological risk assessment 28 January 1997 / E.
Ю ПРЕПАРАТА
Софронов В.Г., Аржаков В.Н., Николаенко H.H., Николаенко Т.М.,
Аржаков П.В.
Резюме
Коллективом авторов проведены экспериментальные исследования по оценке фунгицидного действия нового многофункционального препарата предназначенного для одновременной мойки, дезинфекции и обезжиривания. В опытах использовали рабочий раствор новой биоцидной композиции в концентрации 1, 2, 3 % и экспозициях 15, 30, 60 минут, опыты проводили без органической защиты. Тест-культуры грибов: Penicillium expansum; Ascosphaera apis; Aspergillus fumigates. По результатам исследований установлено, что в отношении P. еxpansum и As. apis фунгицидный эффект препарата отмечен при воздействии 2%-ной концентрации и 60 минутной экспозиции, на A. fumigatus обеззараживающее действие оказывала 3%-ная концентрация при 30 минутной экспозиции.
При электронно-микроскопическом исследовании установлено: после воздействия 2%-ной концентрации и экспозиции 60 минут наблюдали полную утрату оболочки гиф (отсутствие экзоперидиума и мезоперидиума), эти изменения приводили к дальнейшему лизису гиф.
NEW STUDY FUNGICIDAL ACTION BIOCIDE
Sofronov V.G., Arzhakov V.N., Nikolaenko N.N., Nikolaenko T.M.,
Arzhakov P.V.
Summary
The group of authors conducted pilot researches on estimates of fungicide action of a new multipurpose preparation intended for a simultaneous sink, disinfection and degreasing. In experiences used working solution of new biocidal composition in concentration of 1, 2, 3% and expositions of 15, 30, 60 minutes, experiments made without organic protection.
Test cultures of mushrooms: Penicillium expansum; Ascosphaera apis; Aspergillus fumigates by results of researches is established that concerning P. expansum and As. apis fungicide effect of a preparation is noted at influence of the 2% concentration and the 60th minute exposition, 3% concentration had disinfecting effect on A. fumigatus at the 30th minute exposition. At electronic and microscopic research it is established: after influence of the 2% concentration and an exposition of 60 minutes observed full loss of a cover of hyphas (external cover and internal cover), these changes gave to further to destruction of hyphas.
УДК: 636.4:636:612.6
ТРАНСФЕРАЗЫ, ФОСФАТАЗЫ И А-АМИЛАЗА В ТКАНЯХ ПРЯМОЙ КИШКИ У ПОРОСЯТ
Терентьева М.Г. — к.б.н., ст.преподаватель; Игнатьев Н.Г. — д.б.н., профессор Чувашская государственная сельскохозяйственная академия e-mail: maiya-7777@mail.
ru
Ключевые слова: прямая кишка, поросята, ферменты, свиноферма, свинокомплекс.
Keywords: rectum, piglets, enzymes, pigfarm, swine rearing complex.
Первая работа по изучению структурно-химического совершенствования прямой кишки у поросят определением в ее стенках активности ферментов проведена в условиях малой свинофермы «Студгородок» учебно-научного центра Чувашской государственной сельскохозяйственной академии [5]. В настоящей работе представлены результаты исследований возрастных изменений активности аминотрансаминаз, фосфатаз и а-амилазы в тканях проксимальной и дистальной частей прямой кишки у поросят, выращенных в условиях свинокомплекса «Вурнарский» Вурнарского района Чувашской
федеральное государственное учреждение «Омский референтный центр Федеральной службы по ветеринарному и фитосанитарному надзору»
Протравливание семян против головневых инфекций и корневых гнилей – это самое дешевое мероприятие в системе защиты будущего урожая.
Применение биологических препаратов позволяет получить значительный экономический эффект при выращивании зерновых и овощных культур.
Биологические протравители увеличивают энергию прорастания семян, повышают устойчивость растений к неблагоприятным погодным условиям, в том числе к весенним заморозкам и засухе, что, в конечном итоге приводит к значительному увеличению урожая.
Применение баковых смесей химических протравителей с биопрепаратами позволяет значительно увеличить эффективность протравливания, как технологического приёма.
Тем, что использование биопрепаратов («Елена», «Азолен») в баковых смесях позволяет более полно реализовать эффект химического и биологического соединений, расширить спектр фунгицидной активности протравителей, повысить природную устойчивость растений к болезням за счет ростостимулирующей активности, увеличить урожайность культур, уменьшить химическую нагрузку в агроценозах и, что очень важно сегодня, существенно снизить затраты на протравливание.
Биологическая эффективность смесей химических и биологических протравителей составляет 85-100 %, величина сохраненного урожая находится в пределах 2-5 ц/га, в зависимости от предшественника и обработки почвы.
Обработка любым химическим препаратом – это всегда стресс для растения. Биопрепараты же обладают антидепрессантными свойствами, то есть они способны снимать стресс и смягчать воздействие как неблагоприятных погодных факторов, так и химических препаратов. Они дёшевы, менее токсичны для теплокровных, хорошо подавляют основных возбудителей корневых гнилей, имеют низкую стоимость гектарной обработки.
ЕЛЕНА
биологический препарат широкого спектра действия против возбудителей грибных и бактериальных заболеваний
Предназначен для протравливания семян и опрыскивания
вегетирующих растений
Препарат применятся на зерновых, овощных и плодово-ягодных культурах для борьбы с гельминтоспориозной и фузариозной корневой гнилью, мучнистой росой, альтернариоза, корневыми гнилями на овощах открытого и закрытого грунта, некоторых болезней картофеля.
На пшенице – от поражения твердой головней. На огурцах- для подавления развития бактериоза огурцов.
Основу препарата составляют бактерии Pseudomonas aureofaciens ИБ 51, выращенные в жидкой культуре. Попадая на растения, бактерии борются с заболеваниями и способствуют усвоению растениями железа и фосфора, отчего у них вырабатывается иммунитет к патогенным организмам. Антибиотики, выделяемые бактериальными клетками, попадают в клеточный сок растения, изменяя биохимические процессы, стимулируют рост и развитие растений.
Является экологически безопасной альтернативой химическим фунгицидам и предназначен для борьбы с фузариозной и гельминтоспориозной корневыми гнилями, плесневением семян на зерновых.
Биологическая эффективность подавления болезней составляет 70-75 %, при этом повышается урожайность и улучшаются качественные показатели зерновых культур.
Препарат подавляет возбудителей наружных инфекций уже через сутки после применения.
Не обладает фитотоксичностью по отношению к культурным растениям.
Проявляет ростстимулирующую активность
При совместном применении с гербицидами, кроме фунгицидного действия, биопрепарат снимает стрессовую нагрузку от применения химических препаратов.
Основные достоинства:
• может применяться в любую фазу развития растений;
• не имеет срока ожидания, что позволяет проводить обработку в любой период;
• кроме фунгицидного и бактерицидного эффекта, оказывает ростостимулирующее действие;
• не вызывает формирования резистентности у фитопатогенов, что позволяет проводить обработки неоднократно, до получения положительного результата;
• не снижает вкусовые качества урожая;
• на зерновых положительно влияет на технологические показатели качества зерна: количество и качество сырой клейковины, натуру зерна;
• безопасен для человека, теплокровных животных, птиц, рыб, пчел и для окружающей среды.
(СКАЧАТЬ БУКЛЕТ)
АЗОЛЕН
микробиологическое биоудобрение на основе бактерий
Azotobacter vinelandii ИБ 4
Препарат защитного и стимулирующего действия,
улучшает азотное питание растений на посевах всех сельскохозяйственных культур, тем самым помогая увеличить урожайность овощных и зерновых культур на 30-50%
Применяется как для обработки семян, так и для вегетирующей части растений.
Данный препарат обладает фунгицидными, ростстимулирующими свойствами и азотфиксирующей способностью, что позволяет значительно снизить количество азотных удобрений и подавлять рост и развитие фитопатогенных микроорганизмов, получать экологически чистые продукты.
При использовании в рекомендованных дозах фитотоксичности не проявляет.
На яровой пшенице применение Азолена приводит к увеличению высоты растений, общей и продуктивной кустистости, длины колоса, количества зерен в колосе и массы 1000 зерен. Урожайность яровой пшеницы повышается на 20-50 %, улучшается качество зерна. Снижается развитие корневых гнилей на 15-20% и бурой ржавчины — на 5-10%.
На картофеле использование Азолена способствует увеличению высоты растений и числа основных стеблей. Урожайность повышается на 20-30 %, (выход клубней увеличивается на 28 %). Значительно снижается количество растений, пораженных ризоктониозом и альтернариозом.
Обработка семян овощных культур препаратом повышает их всхожесть в среднем на 20-30%.
Опрыскивание вегетирующих растений раствором препарата оказывает положительное влияние на рост, развитие и продуктивность выращиваемых культур.
Основные достоинства:
— может применяться в любую фазу развития растений
— не имеет срока ожидания, что позволяет проводить обработку в любой период;
— бактерии, содержащиеся в препарате, положительно влияют на азотное и фосфорное питание растений;
— имеет сильнейший ростстимулирующий и фунгицидный эффект
— обладает азотфиксирующей способностью;
— повышает урожайность всех сельскохозяйственных культур
— улучшает вкусовые качества овощных культур;
— положительным образом влияет на технологические показатели качества зерна;
— не резистентен, совместим с другими пестицидами и агрохимикатами;
— безопасен для человека, теплокровных животных, птиц, рыб, пчел и для окружающей среды.
(СКАЧАТЬ БУКЛЕТ)
Только современная эффективная борьба с болезнями сельскохозяйственных растений является одним из главнейших факторов,
позволяющим в значительной степени сохранить урожай, увеличить производство продукции растениеводства,
снизить ее себестоимость, получить реальный доход.
Биопрепараты изготовят для Вас в биолаборатории
ФГБУ «Омский референтный центр Россельхознадзора»
644031, г.Омск, ул. 10 лет Октября, д.197
(3812) 32-91-30, 32-90-38, 32-98-42, 8-962-033-22-30, 8-913-609-92-85
лучшее лечение грибка ногтей
лучшее лечение грибка ногтей
лучшее лечение грибка ногтей
>>>ПЕРЕЙТИ НА ОФИЦИАЛЬНЫЙ САЙТ >>>
Что такое лучшее лечение грибка ногтей?
Припарат от грибка Ремитазол максимально удобен. Мягкий легкий крем с приятным запахом быстро впитывается, не пачкает одежду. При необходимости его можно сочетать с другими фунгицидными препаратами или народными средствами.
Эффект от применения лучшее лечение грибка ногтей
Ремитазол способен блокировать споры грибка.
Компоненты проникают в глубокие слои дермы, накапливаться и нейтрализуют патогенные микроорганизмы. Это останавливает распространение инфекции на внутренние органы и слизистые.
Мнение специалиста
А у меня грибок у меня появился, благодаря шелаку на ногтях. Как-то после очередного снятия я заметила странную пустоту под ногтем на указательном пальце, но это меня не смутило и я снова покрыла ногти гелем. При следующем визите ситуация повторилась, но тут уже маникюрщица меня остановила и поставила перед фактом — иди лечи грибок. Она же и этот самый ремитазол посоветовала. Сказала, что этим кремом многие ее клиенты спаслись. Я к их отзывам только присоединяюсь, препарат реально помог и теперь у меня растет новый здоровый ноготь.
Как заказать
Для того чтобы оформить заказ лучшее лечение грибка ногтей необходимо оставить свои контактные данные на сайте. В течение 15 минут оператор свяжется с вами. Уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ.
Через 3-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении.
Отзывы покупателей:
Вера
Ремитазол имеет мощный фунгицидный эффект. Позволяет без системных методов терапии за один курс лечения устранить грибок, сократить риски рецидива, предупредить повторное заражение при контакте с возбудителями за счет усиления местного иммунитета.
Kira
Широкий спектр активности крема от грибка Ремитазол делает его максимально эффективным при лечении онихомикоза и поражения кожных покровов в любой стадии. Даже в запущенных случаях он позволяет обойтись без системной терапии, сокращает риски для печени, желудочно-кишечного тракта и нейтрализует лекарственную нагрузку на организм.
Ремитазол представляет собой полностью уникальный препарат, который проникает глубоко в структуру ногтя и питает его изнутри. Он полностью устраняет грибковую инфекцию. Лекарственное средство очень легко применять даже без назначения врача и дорогостоящей консультации.
Где купить лучшее лечение грибка ногтей? А у меня грибок у меня появился, благодаря шелаку на ногтях. Как-то после очередного снятия я заметила странную пустоту под ногтем на указательном пальце, но это меня не смутило и я снова покрыла ногти гелем. При следующем визите ситуация повторилась, но тут уже маникюрщица меня остановила и поставила перед фактом — иди лечи грибок. Она же и этот самый ремитазол посоветовала. Сказала, что этим кремом многие ее клиенты спаслись. Я к их отзывам только присоединяюсь, препарат реально помог и теперь у меня растет новый здоровый ноготь.
Грибок ногтей (микоз и онихомикоз) – это деструктивные изменения вида и структуры ногтевой пластины, иногда с . Противодействуют всем известным видам грибка на ногтях, быстро проникают в ногтевую пластину, но работают медленнее, чем другие вещества, курс лечения может занять до полугода. Микоз: причины и лечение. Микоз — это грибковое инфекционное заболевание. . Признаки грибковой инфекции хорошо известны: при микозе стоп .
Как правило, выделяют две стадии грибка ногтей на ногах, причем на начальном этапе его легко не заметить. Наружные препараты широкого спектра против грибка ногтей. . Грибковая инфекция в организме может распространиться в трех основных направлениях – поражение кожных покровов, разрушение ногтевых пластин и инфекция внутренних органов. Звучит устрашающе, но всего условно-патогенных и. Что такое грибок ногтей и откуда он берется. Какие таблетки помогают в борьбе с грибком. И как правильно принимать лекарство, чтобы . Грибок ногтей – не только неприятная проблема, но еще и некрасивая. С ногтями, пораженными грибком, стыдно показаться на пляже, невозможно носить элегантную обувь. Грибок ногтей – это серьезная проблема, и зачастую одного применения лечебного лака или крема недостаточно. Как же подобрать для себя лучшие таблетки от грибка ногтей на ногах? Можно ли их купить в аптеке без рецепта? Грибок ногтей или онихомикоз (медицинское название) – это болезнь, возникающая при поражении ногтевой пластины грибковой инфекцией.
Онихомикозом страдает от 5 до 15 % людей. Лечение грибка ногтей. Грибок ногтей — это неприятное и достаточно распространенное заболевание, которое во всех случаях требует лечения1. О грибке. Грибок может поражать ногти и вряд ли пройдет сам по себе, без должной терапии2. Без правильного лечения болезнь может распространиться. Грибок ногтей — онихомикоз — распространенное заболевание ногтей, от которого, по данным различных авторов . Как распознать онихомикоз: симптомы грибка. Теплая и влажная среда — лучшее место для развития грибковой инфекции. И климат необязательно должен быть жарким; например. Для лечения грибка ногтей используют: кремы, мази, таблетки, растворы, спреи, лаки и натуральные средства. Нередко комплексное лечение включает использование одновременно нескольких видов средств. Грибок ногтей (онихомикоз) – это опасное заболевание, которое на ранней стадии . У людей с хорошим иммунитетом и здоровыми кожными покровами при . Грибок ногтей никогда не проходит сам. Проникнув в ногтевую пластину, заболевание медленно разрушает твердую оболочку ногтя, а затем и.
http://www.avtodrom.net/img/gribok_nogtei_sredstva_dlia_lecheniia_kapli7977.xml
http://chaltkirpich.ru/upload/gribki_v_organizme_cheloveka_lechenie_narodnymi1582.xml
http://villabohemia.cz/userfiles/lechenie_gribka_nogtei_flukonazolom_skhema_otzyvy4317.xml
http://stedwardchurchmd.com/userfiles/nachalo_gribka_na_nogtiakh_lechenie6333.xml
http://dev.epe-asso.org/images/lechenie_gribka_nogtei_smolensk1990.xml
Ремитазол способен блокировать споры грибка. Компоненты проникают в глубокие слои дермы, накапливаться и нейтрализуют патогенные микроорганизмы. Это останавливает распространение инфекции на внутренние органы и слизистые.
лучшее лечение грибка ногтей
Припарат от грибка Ремитазол максимально удобен. Мягкий легкий крем с приятным запахом быстро впитывается, не пачкает одежду. При необходимости его можно сочетать с другими фунгицидными препаратами или народными средствами.
На языке наблюдается атрофия сосочков (т.
е. сглаженность рисунка), язык . В лечении грибковой инфекции ротовой полости важное место занимает . Препаратами выбора для местного лечения в течение многих лет были нистатин и амфотерицин В, так как они плохо всасываются в кишечном тракте и. Онлайн-аптека Планета Здоровья — это удобный сервис для поиска лекарств, проверки наличия препаратов в ближайшей аптеке и быстрого оформления онлайн заказа. На сайте представлен широкий ассортимент лекарственных препаратов. Форма средства от грибка важна так же, как и компоненты состава. . В то же время откладывать лечение грибка на месяцы тоже не стоит, любой патоген из тех, что . Не всегда недорогие и эффективные составы одобрены в период беременности. Допустимо: наружные средства категорий A и В. Категорически. Наружные препараты широкого спектра против грибка ногтей. Противогрибковые средства при кандидозе. . Наиболее токсичные препараты, для лечения глубоких поражений, продаются только по рецептам: в этих случаях потребуется комплексная терапия, с приёмом таблеток – антибиотиков и антимикотиков, а.
Средний курс лечения составляет 2 недели, но возможно увеличение срока терапии до 1,5 месяцев. . Если лечение оказалось недостаточно эффективным возможно увеличение курса на 3 дня, а также проведение повторной терапии через 10 дней. Лечение кандидоза на языке должно проводиться средствами, которые подобрал стоматолог. При этом диагнозе на слизистых . Избавиться от размножившихся на слизистых языка грибков рода Кандида без медицинских препаратов невозможно. Медикаменты должны: снять воспаление; активировать процессы. Молочница во рту у взрослых: симптомы, лечение. Из этой статьи Вы узнаете: Что такое оральный кандидоз, Как выглядит молочница на языке у взрослых, Эффективные таблетки против молочницы. Грибки кандиды в ротовой полости могут жить на различных участках слизистой оболочки . Бляшки могут образовываться не только на щеках, но и на деснах, небе, языке . Местное лечение – препараты, которые действуют на слизистую и не всасываются в кровь. Они останавливают рост и размножение кандид. ПРОТИВОГРИБКОВЫЕ СРЕДСТВА. Лечение грибка — Кремы/ Мази. . Распространение вредоносного грибка происходит благодаря высокой скорости . Правильно выбранный препарат позволит не только остановить течение болезни, а полностью от нее избавится. Поделиться. Назад к списку. Предназначен для лечения грибковых заболеваний ногтей. . Применение препарата продолжают до тех пор, пока инфицированная грибком . Один из самых известных и широко применяемых препаратов для лечения микозов кожи и ногтей. Часто используется одновременно и в виде таблеток, и в виде крема.
Выход крема Микодерил
22.07.2015
Уважаемые партнеры и клиенты,
компания ПАО «ОТИСИФАРМ» информирует вас о старте коммерческих продаж кремовой формы выпуска нового противогрибкового препарата МИКОДЕРИЛ.
МИКОДЕРИЛ крем является первым и на сегодняшний день единственным в России доступным аналогом1,2 популярного западного антимикотика с активным действующим веществом нафтифин.
С августа 2015 года МИКОДЕРИЛ доступен для розничной товаропроводящей цепочки в 3-х формах выпуска:
- МИКОДЕРИЛ, раствор для наружного применения, 1% — 10 мл
- МИКОДЕРИЛ, раствор для наружного применения, 1% — 20 мл
- МИКОДЕРИЛ, крем для наружного применения, 1% — 15 г
С момента появления кремовой формы выпуска, МИКОДЕРИЛ представляет собой специализированную профессиональную линейку средств, предназначенную для комплексного решения проблемы грибкового поражения ногтей (онихомикоза).
Раствор МИКОДЕРИЛ используется для устранения возбудителей грибковой инфекции непосредственно из ногтевых пластинок. Крем МИКОДЕРИЛ применяется при лечении сопутствующего грибкового поражения кожи стоп и/или кистей, в том числе для ликвидации грибковых клеток из окружающих ноготь мягких тканей, например, ногтевых валиков, часто вовлекаемых в патологический процесс. Комбинированная терапия помогает добиться полноценного терапевтического результата и снизить риск повторных эпизодов заболевания.
Для производства раствора и крема МИКОДЕРИЛ используется субстанция итальянской фармацевтической компании Sifavitor SRL, что гарантирует высокое европейское качество конечных продуктов, выпускаемых внутри линейки.
ПРЕИМУЩЕСТВА АКТИВНОЙ МОЛЕКУЛЫ ПРЕПАРАТА МИКОДЕРИЛ:
- мощный антимикотический препарат из группы низкомолекулярных аллиламинов
- широкий спектр противогрибкового действия – проявляет активность в отношении дерматомицетов, дрожжевых и плесневых грибов3 – основных возбудителей грибковых заболеваний кожи и ногтей
- высокая противогрибковая активность, превосходящая активность препаратов из группы имидазолов, например, лекарственных средств с действующим веществом клотримазол4
- первично фунгицидное действие на грибковые клетки3 – не просто тормозит их рост и размножение, а вызывает гибель
- наличие антибактериальной активности в отношении грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, которые могут вызывать вторичные бактериальные инфекции3
- дополнительное противовоспалительное действие, которое способствует быстрому исчезновению симптомов воспаления3, таких как покраснение, отечность, зуд и др.
- тройное действие (противогрибковое, антибактериальное, противовоспалительное) обеспечивает тройной отпор грибковой инфекции
- большая доказательная база и длительный срок использования в медицинской практике5
- представленность в отечественных национальных рекомендациях по лечению онихомикоза и дерматомикозов6
- применение в клинической практике одобрено FDA (Food and Drag Administration – управление по контролю за продуктами питания и лекарствами США)7
ПРЕИМУЩЕСТВА КРЕМА МИКОДЕРИЛ:
- быстро проникает в кожу, создавая устойчивые противогрибковые концентрации и фунгицидный эффект действующего вещества в различных ее слоях3
- благодаря кремовой основе, при нанесении на кожу, способствует ее смягчению
- быстро и полностью впитывается, не оставляя жирных разводов на коже и пятен на одежде
- имеет нейтральный запах
ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ КРЕМА МИКОДЕРИЛ:
- тройное действие препарата позволяет оптимизировать и упростить процесс лечения для пациентов, а также снизить возможные затраты на лечение.
Совокупность указанных выше характеристик позволяет рассматривать раствор и крем МИКОДЕРИЛ как средства выбора при лечении лиц с грибковым поражением ногтей.
Необходимо знать и помнить, грибковое поражение ногтей не просто эстетическая проблема. Оно никогда не проходит само по себе. С течением времени грибковая инфекция только прогрессирует, распространяясь на здоровые до того ногти, а также подвергает риску заражения окружающих.
Начать лечение никогда не поздно! Решить проблему комплексно может помочь МИКОДЕРИЛ.
- Данные Государственного реестра лекарственных средств, июнь 2015 г
- По сравнению c ценой оригинального препарата в аналогичной форме выпуска, по данным IMS за май 2015 г., фактическая цена в аптеке зависит от торговой наценки
- Инструкция по медицинскому применению препарата Микодерил, крем для наружного применения 1%
- Bertrand Favre et al. «Comparison of in vitro activities of 17 antifungal drugs against a panel of 20 dermatophytes by using a microdilution assay». Journal of Clinical Microbiology, Oct. 2003, p.4817-4819
- https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=naftifine
- Клинические рекомендации, Российское общество дерматовенерологов и косметологов, Москва-2012 г.
- http://google2.fda.gov/search?q=naftifine&client=FDAgov&site=FDAgov&lr=&…*
Венто
Действующие вещества: крезоксим-метил + эпоксиконазол + тебуконазол, 125 + 116 + 140 г/л.
Препаративная форма: концентрат суспензии.
Химический класс: стробилурины + производные триазолов.
Механизм действия: Крезоксим-метил подавляет прорастание спор патогенов за счет ингибирования процессов митохондрального дыхания клеток. Действующее вещество обладает защитным, лечебным и искореняющим действием с длительным остаточным эффектом. В растении действующее вещество распределяется за счет диффузии и закрепляется на поверхности листьев, проникая на их нижнюю сторону. Крезоксим-метил создает защитный «щит» на листьях обработанного растения, обеспечивая длительный фунгицидный эффект.
Эпоксиконазол и тебуконазол — системные вещества, распространяющиеся снизу вверх по растению. Оба являются ингибиторами биосинтеза стеринов, в том числе эргостерола, в клетках грибов, подавляя С-14-деметилирование взаимодействием с цитохромом Р-450. Эпоксиконазол к тому же подавляет образование апрессориев и развитие гиф гриба на листе (профилактическое действие). После произошедшего заражения действующие вещества тормозят рост очагов поражения грибами на листьях и внутри них.
Уникальность Венто заключается в том, что крезоксим-метил обеспечивает профилактическое действие, то есть препятствует заражению даже в условиях низких температур воздуха. Эпоксиконазол обеспечивает быстрое куративное (лечащее) действие. Тебуконазол за счет более медленного передвижения в растении обеспечивает продолжительное защитное действие.
Рис.1. Контроль
Рис.2. Венто 0,6 (конец кущения) + Флинт 0,7 (флаг-лист)
Спектр активности: на зерновых Венто обеспечивает защиту от всех видов ржавчины, мучнистой росы, септориоза, пиренофороза, гельминтоспориозов, прикорневых гнилей – церкоспореллезной и ризоктонизоной. На сахарной свекле продукт контролирует фомоз, мучнистую росу, церкоспороз, рамуляриоз. На подсолнечнике – ложная мучнистая роса, фомоз, фомопсис, ржавчина, септориоз, белая и серая гнили, альтернариоз.
Скорость воздействия: Венто очень быстро проникает в растение и распространяется по нему акропетально, то есть вверх по стеблю и от основания листа к его вершине. Воздействие на клетки грибов происходит с момента проникновения действующего вещества внутрь растения. Подавление ржавчинных грибов происходит в течение первых 2-х часов после проведения обработки. Сочетание крезоксим-метила и эпоксиконазола обеспечивают практически мгновенную остановку развития патогенных грибов.
Сроки применения: рекомендуются профилактические обработки зерновых культур фунгицидом Венто. Они эффективно предотвращают заражение растений, эффективно борются с прикорневыми гнилями и позволяют сдвинуть сроки появления листовых заболеваний на более поздние. Лечебные обработки (по симптомам) активно подавляют болезни независимо от степени поражения и должны быть проведены в фазу флаг –лист начало колошения (ВВСН 37 – 49). На сахарной свекле первую обработку против церкоспороза рекомендуется проводить при развитии заболевания не более 3 – 5%. Повторную обработку следует проводить через 21 день при появлении симптомов болезни.
Обработка подсолнечника против болезней стеблей и ржавчины должна быть проведена в фазу начало формирования корзинки, при которой прицветники имеют форму многоконечной звездочки или при последней возможности прохода наземного опрыскивателя без риска повреждения растений.
Физиологический эффект: обработка зерновых культур Венто помогает растениям противостоять неблагоприятным условиям окружающей среды (почвенная и воздушная засуха, гербицидный стресс) за счет физиологического действия. У обработанных растений оптимизируется водный обмен, регулируется гормональный баланс, активируется антиоксидантная защита, усиливается усвоение азота из почвы, запускаются антистрессовые механизмы. Благодаря вышеперечисленным свойствам продукт помогает зерновым сформировать высокий урожай особенно в условиях стресса. Растения более активно и эффективно усваивают азот из почвы, в результате чего также повышается урожайность. Благодаря физиологическому действию Венто продлевает вегетацию зерновых на 7 – 10 дней.
Обработки от кущения до выхода в трубку наиболее эффективны с точки зрения реализации физиологического эффекта Венто. Именно в этот срок закладывается запрограммированный генетикой урожай.
Период защитного действия: Венто обеспечивает защиту в течение 21 – 28 дней с момента обработки.
Кратность обработок: 2 обработки за сезон.
Совместимость: Венто хорошо совместим с другими средствами защиты растений, кроме препаратов, обладающих сильнокислой и сильнощелочной реакцией.
Расход рабочей жидкости: 200 – 400 л/га.
Приготовление рабочего раствора: перед применением рекомендуется встряхнуть канистру с фунгицидом. Бак опрыскивателя заполнить водой на ½ объема, включить мешалку и залить отмеренное количество препарата. Долить бак опрыскивателя до требуемого объема с одновременным перемешиванием. Перемешивание продолжать и во время опрыскивания для обеспечения однородности рабочего раствора.
Упаковка: канистра 10 л.
Температурный режим хранения: от 0 до + 30°С
Срок годности: 3 года.
Сравнение действия фунгицидных и фунгистатических противогрибковых средств на морфогенетическую трансформацию Candida albicans | Журнал антимикробной химиотерапии
Аннотация
Сравнивали одиннадцать различных противогрибковых агентов, и их способность ингибировать морфогенетические
трансформация Candida albicans была исследована вместе с их способностью ингибировать
рост, измеренный по методологии MIC. Фунгицидный потенциал каждого агента также был
определенный.Из протестированных противогрибковых средств только амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин.
ингибировал трансформацию при значениях суб-MIC; все три агента проявили фунгицидную активность при
концентрации близкие к МПК. Все остальные агенты были фунгицидными только в концентрациях, значительно превышающих
выше МПК и ингибирует морфогенетическую трансформацию только при концентрациях
над микрофоном. Эти данные предполагают, что фунгицидные противогрибковые агенты чаще действуют через
ингибирует морфогенетическую трансформацию C.albicans , в то время как фунгистатические агенты
не могут этого сделать и с большей вероятностью блокируют рост бутонами.
Введение
Candida albicans, диморфный гриб, вызывающий различные поверхностные и
глубоко укоренившиеся микозы, существуют в двух легко идентифицируемых морфологиях, а именно дрожжевых и гифах.
формы. 1 Есть некоторые свидетельства того, что гифальная форма
могут играть важную роль в патогенезе C.albicans, особенно с уважением
к способности организма проникать в клетки и ткани хозяина. 1 Точно так же гифальную форму часто считали
важна способность гриба прилипать к поверхности клеток. 1 Недавнее исследование показывает, что мутанты без гиф
avirulent, в отличие от вирулентного родительского штамма, предполагая, что способность образовывать гифы
могут играть важную роль в патогенезе C.albicans. 2
Принимая во внимание потенциальную роль этого диморфизма, понимание действия противогрибковых
агенты двух форм могут помочь в разработке лучших противогрибковых агентов. MIC
методологии, в том числе стандартизированные NCCLS, в значительной степени помогли
оценка противогрибковых средств против различных видов дрожжей. 3 Такая методика учитывает только торможение
роста клеток и не позволяет оценить влияние лекарств на трансформацию
от дрожжевой формы к гифальной форме.Недавно мы описали модифицированную версию NCCLS.
процедура, которая может быть использована для изучения влияния противогрибковых средств на морфогенетические
трансформация дрожжевых форм в гифы. 4
В этом исследовании мы использовали различные клинические и лабораторные штаммы для изучения эффектов широкого спектра
ряд противогрибковых препаратов на морфогенетическую трансформацию C. albicans. Наши
результаты показывают, что более фунгицидные противогрибковые агенты, например амфотерицин B и
эхинокандины, с гораздо большей вероятностью ингибируют трансформацию, чем менее фунгицидные
агенты, например азолы и флуцитозин.
Материалы и методы
Определение МИК и морфогенетической трансформации
Синхронизированная фаза дрожжей Клетки C. albicans использовали во всех экспериментах и были
подготовлен, как описано ранее. 4 C. albicans эталонных штаммов ATCC
и
3 и клинические изоляты 200/175, 352, 94/03, 94/14 и 94/57
использовались повсюду. Синхронизированные со стационарной фазой дрожжевые клетки собирали с помощью
центрифугирование, промыли трижды в 0.1 М фосфатно-солевой буфер и сразу же использовать
стандартные анализы MIC 3 и эксперименты по морфогенетической трансформации. 4 Влияние различных противогрибковых средств на
морфогенетическую трансформацию C. albicans оценивали путем исследования содержимого
96-луночных микротитровальных планшетов после 3 ч инкубации при 35 ° C с использованием фазово-контрастной микроскопии
(с использованием микроскопа Olympus CK и фазово-контрастного микроскопа Zeiss), как описано
ранее. 4
Минимальная фунгицидная концентрация
образцов (10 мкл) были удалены из всех лунок стандартных планшетов MIC и нанесены на них.
в прямоугольные чашки, содержащие агар с декстрозой Сабуро. Чашки инкубировали в течение
24–48
ч при 35 ° C. Минимальная фунгицидная концентрация (MFC) определялась как концентрация
противогрибковый агент, у которого количество колониеобразующих единиц было равно нулю.
Противогрибковые средства и химикаты
Итраконазол, кетоконазол и миконазол были приобретены у Janssen Pharmaceutica, Beerse,
Belguim.Флуконазол очищали (чистота 95%) из капсул Дифлюкана (Pfizer Central
Research, Sandwich, Великобритания). Амфотерицин B, туникамицин и флуцитозин были приобретены в
Sigma Chemical Co. (Сент-Луис, Миссури, США). Тербинафин и аморолфин были от Сандоз,
Вена, Австрия. Мулундокандин и акулеацин были синтезированы в Hoechst AG, Франкфурт,
Германия. MOPS и диметилсульфоксид (ДМСО) были от Sigma. Противогрибковые агенты были
растворенный в ДМСО, за исключением туникамицина и флуцитозина, которые были растворены в
стерильная дистиллированная вода.ДМСО (конечная концентрация <2% об. / Об.) Не влиял на МИК или морфогенетическая трансформация.
Результаты и обсуждение
Определения MIC и MFC
Ингибирование роста различными противогрибковыми агентами и МФЦ этих агентов для
Было исследовано несколько клинических изолятов и лабораторных штаммов C. albicans, . Все штаммы
были высокочувствительны к амфотерицину B (МИК 0.06-0,12 мг / л), туникамицин (МИК
0,12-0,25
мг / л) и акулеацина (МПК 0,25-0,5 мг / л), но менее чувствительны к мулундокандину (таблица). Амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин обычно были
фунгицидный при
концентрации, близкие к МИК (2-4 × МИК), в то время как туникамицин показал более
умеренная фунгицидная способность, поскольку она была фунгицидной при 8-16 × MIC (таблица). Из испытанных азольных противогрибковых средств итраконазол и кетоконазол показали:
хорошо
активность против всех C.albicans (таблица), а
флуконазол и миконазол показали хорошую активность против четырех из этих штаммов C. albicans (ATCC
, ATCC , 352 и 200/175) с диапазонами MIC 0,25-0,5.
мг / л и
0,06-0,25 мг / л соответственно. Однако при тестировании со штаммами 94/03, 94/14 и
94/57,
флуконазол и миконазол были значительно менее активны с диапазоном МИК 8 мг / л и
8–16
мг / л соответственно.Флуцитозин проявлял хорошую активность против шести штаммов и был неактивен.
против C. albicans ATCC , как описано ранее. 3 Напротив, тербинафин и аморолфин показали умеренную
активность против семи штаммов с диапазонами MIC 2-8 мг / л и 2-4 мг / л,
соответственно
(Таблица). Азолы и другие агенты проявляли фунгицидную способность только при
высокие концентрации (32-128 × МИК).
Влияние противогрибковых препаратов на морфогенетическую трансформацию
Влияние противогрибковых препаратов на морфогенетическую трансформацию различных C.albicans . Фунгицидные средства амфотерицин В, мулундокандин.
и акулеацин все блокировали морфогенетическую трансформацию при концентрациях ниже их
соответствующие значения МИК (таблица). Туникамицин также подавлял
морфогенетическая трансформация, но при концентрациях выше МИК (морфогенетическая
трансформация 0,25-0,5 мг / л; МПК 0,12-0,25 мг / л). Флуконазол и
миконазол имел
низкие МИК против четырех чувствительных к азолам штаммов и повлияли на морфогенетические
трансформация только при более высоких концентрациях (таблица).Влияние на
морфогенетическая трансформация наблюдалась при еще более высоких концентрациях на трех штаммах
с пониженной чувствительностью к азольным агентам (данные не представлены). Аналогично итраконазол и
кетоконазол, который был активен против всех штаммов по определению МИК, влиял только на
морфогенетическая трансформация при высоких концентрациях (таблица). Принадлежащий
оставаясь противогрибковыми агентами, флуцитозин был слабым ингибитором морфогенетических
трансформация, несмотря на его хорошую активность против шести штаммов, измеренную с помощью MIC.Тербинафин и аморолфин проявляли некоторую активность по оценке МПК, но мало влияли на
морфогенетическая трансформация (таблица).
Сравнение MIC, морфогенетической трансформации и MFC
Чтобы лучше описать различия, соотношение морфогенетической трансформации / МИК было
рассчитано для каждого противогрибкового средства (таблица). Эти соотношения можно использовать для
определить относительную эффективность каждого агента по подавлению роста и трансформации: (i) соотношение <1 (агенты, которые преимущественно ингибируют морфогенетическую трансформацию): амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин; (ii) соотношение 1-2 (с примерно равным влиянием на эти два процесса): туникамицин; и (iii) соотношение> 2 (агенты с более низкой способностью ингибировать
формы гиф и проявляют свою активность, подавляя дрожжевую форму): азолы, тербинафин,
флуцитозин и аморолфин.Также было рассчитано соотношение MFC / MIC (таблица). Данные свидетельствуют о том, что агенты с высоким фунгицидным потенциалом, например
амфотерицин B также обладает высоким потенциалом блокирования морфогенетической трансформации. Агенты с
низкий фунгицидный потенциал, например флуконазол, значительно менее способны ингибировать
морфогенетическая трансформация.
Комплекс изучения действия противогрибковых средств на морфогенетическую трансформацию
и MIC предоставляет дополнительную информацию о действии противогрибковых средств против обоих
дрожжевые и гифальные формы C.albicans и может быть связано с их фунгицидным действием.
потенциал. Наши данные предполагают, что фунгицидные агенты действуют как против морфогенетической трансформации, так и против морфогенетической трансформации.
и процесс бутонизации. Фунгицидные агенты, амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин,
нарушает мембрану 5 или целостность клеточной стенки, 6 и, следовательно, подавляет форму гиф на низком уровне
концентрации. Менее фунгицидные агенты (азолы, тербинафин и флуцитозин), проявляющие их
противогрибковое действие за счет ингибирования деметилазы цитохрома P450, скваленэпоксидазы 7 , 8 и синтеза РНК и ДНК, 5 соответственно, как правило, менее эффективны против
морфогенетическая трансформация, предполагающая, что они преимущественно ингибируют процесс почкования.Это
Заманчиво предположить, что способность амфотерицина B и эхинокандинов уменьшать грибковые
эффективная загрузка in vivo, по сравнению с азолами, частично может быть связано с их
способность влиять на морфогенетическую трансформацию.
В заключение, анализы морфогенетической трансформации и МИК, использованные в этом исследовании, объединили
с расчетом соотношения морфогенетическая трансформация / МИК, может помочь в предварительном
скрининг новых противогрибковых агентов.Действительно, некоторые виды противогрибковых средств ранее применялись.
с помощью методологии MIC продемонстрировали незначительную активность или ее отсутствие, хотя
эффективность in vivo — эхинокандины обычно проявляют слабую активность или не проявляют активности против Aspergillus spp. по оценке MIC, но эффективны in vivo и известны
уменьшить образование гиф. 6 Анализ морфогенетической трансформации очень
помогают в характеристике активности новых противогрибковых агентов и могут различать
фунгицидное из фунгистатических соединений.Анализ выполняется быстро: данные генерируются в течение 3 часов, так как
по сравнению с 48 часами для стандартных процедур MIC.
Таблица.
Сравнение МИК, морфогенетической трансформации и минимального фунгицидного действия
трансформация (MFC) противогрибковых агентов против C. albicans a
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 | 9015 9015 9015 8 | 16 |
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 8 | 16 |
Таблица.
Сравнение МИК, морфогенетической трансформации и минимального фунгицидного действия
трансформация (MFC) для противогрибковых средств против C.albicans a
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 | 9015 9015 9015 8 | 16 |
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 8 | 16 |
Ссылки
1.
Odds, F. C. (1988). Candida and Candidosis , 2-е изд. Баллиер Тиндалл, Лондон.
2.
Ло, Х. Дж., Колер, Дж. Р., Дидоменико, Б., Лёбенберг, Д., Каччапуоти, А. и Финк, Г. Р. (
1997
). Нефиламентные мутанты C. albicans являются авирулентными.
Ячейка
90
,
939
—
49. 3.
Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам. (1995). Эталонный метод для бульона
Разведение дрожжей на чувствительность к противогрибковым препаратам: предварительный стандарт M27-T. NCCLS,
Вилланова, П.А.
4.
Хоузер, С., Франколини, М. и Ислам, К. (
1996
). Влияние противогрибковых средств на
морфогенетическая трансформация Candida albicans in vitro.
Журнал
Антимикробная химиотерапия
38
,
579
‐87. 5.
Керридж Д. (
1986
). Механизм действия клинически важных противогрибковых препаратов.
Достижения в физиологии микробов
27
,
1
—
72. 6.
Курц, М. Б., Хит, И. Б., Марринан, Дж., Дрейкхорн, С., Ониши, Дж. И Дуглас, К. (
1994
). Морфологические эффекты липопептидов против Aspergillus fumigatus коррелят
с активностью против (1,3) -β-d-глюкансинтазы.
Противомикробное средство
Агенты и химиотерапия
38
,
1480
-9. 7.
Vanden Bossche, H. (1988). Механизм действия пиридиновых, пиримидиновых и азольных противогрибковых средств.В Ингибиторы биосинтеза стеролов: фармацевтические и агрохимические аспекты (Berg, D. &
Plempel, M. Eds), стр. 79–119. VCH Publishers Inc., Нью-Йорк.
8.
Райдер, Н. С. (
1988
). Механизмы действия и биохимическая селективность
аллиламиновые антимикотические средства.
Анналы Нью-Йоркской академии наук
544
,
208
‐20.
Британское общество антимикробной химиотерапии
Сравнение действия фунгицидных и фунгистатических противогрибковых средств на морфогенетическую трансформацию Candida albicans | Журнал антимикробной химиотерапии
Аннотация
Сравнивали одиннадцать различных противогрибковых агентов, и их способность ингибировать морфогенетические
трансформация Candida albicans была исследована вместе с их способностью ингибировать
рост, измеренный по методологии MIC.Фунгицидный потенциал каждого агента также был
определенный. Из протестированных противогрибковых средств только амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин.
ингибировал трансформацию при значениях суб-MIC; все три агента проявили фунгицидную активность при
концентрации близкие к МПК. Все остальные агенты были фунгицидными только в концентрациях, значительно превышающих
выше МПК и ингибирует морфогенетическую трансформацию только при концентрациях
над микрофоном. Эти данные предполагают, что фунгицидные противогрибковые агенты чаще действуют через
ингибирует морфогенетическую трансформацию C.albicans , в то время как фунгистатические агенты
не могут этого сделать и с большей вероятностью блокируют рост бутонами.
Введение
Candida albicans, диморфный гриб, вызывающий различные поверхностные и
глубоко укоренившиеся микозы, существуют в двух легко идентифицируемых морфологиях, а именно дрожжевых и гифах.
формы. 1 Есть некоторые свидетельства того, что гифальная форма
могут играть важную роль в патогенезе C.albicans, особенно с уважением
к способности организма проникать в клетки и ткани хозяина. 1 Точно так же гифальную форму часто считали
важна способность гриба прилипать к поверхности клеток. 1 Недавнее исследование показывает, что мутанты без гиф
avirulent, в отличие от вирулентного родительского штамма, предполагая, что способность образовывать гифы
могут играть важную роль в патогенезе C.albicans. 2
Принимая во внимание потенциальную роль этого диморфизма, понимание действия противогрибковых
агенты двух форм могут помочь в разработке лучших противогрибковых агентов. MIC
методологии, в том числе стандартизированные NCCLS, в значительной степени помогли
оценка противогрибковых средств против различных видов дрожжей. 3 Такая методика учитывает только торможение
роста клеток и не позволяет оценить влияние лекарств на трансформацию
от дрожжевой формы к гифальной форме.Недавно мы описали модифицированную версию NCCLS.
процедура, которая может быть использована для изучения влияния противогрибковых средств на морфогенетические
трансформация дрожжевых форм в гифы. 4
В этом исследовании мы использовали различные клинические и лабораторные штаммы для изучения эффектов широкого спектра
ряд противогрибковых препаратов на морфогенетическую трансформацию C. albicans. Наши
результаты показывают, что более фунгицидные противогрибковые агенты, например амфотерицин B и
эхинокандины, с гораздо большей вероятностью ингибируют трансформацию, чем менее фунгицидные
агенты, например азолы и флуцитозин.
Материалы и методы
Определение МИК и морфогенетической трансформации
Синхронизированная фаза дрожжей Клетки C. albicans использовали во всех экспериментах и были
подготовлен, как описано ранее. 4 C. albicans эталонных штаммов ATCC
и
3 и клинические изоляты 200/175, 352, 94/03, 94/14 и 94/57
использовались повсюду. Синхронизированные со стационарной фазой дрожжевые клетки собирали с помощью
центрифугирование, промыли трижды в 0.1 М фосфатно-солевой буфер и сразу же использовать
стандартные анализы MIC 3 и эксперименты по морфогенетической трансформации. 4 Влияние различных противогрибковых средств на
морфогенетическую трансформацию C. albicans оценивали путем исследования содержимого
96-луночных микротитровальных планшетов после 3 ч инкубации при 35 ° C с использованием фазово-контрастной микроскопии
(с использованием микроскопа Olympus CK и фазово-контрастного микроскопа Zeiss), как описано
ранее. 4
Минимальная фунгицидная концентрация
образцов (10 мкл) были удалены из всех лунок стандартных планшетов MIC и нанесены на них.
в прямоугольные чашки, содержащие агар с декстрозой Сабуро. Чашки инкубировали в течение
24–48
ч при 35 ° C. Минимальная фунгицидная концентрация (MFC) определялась как концентрация
противогрибковый агент, у которого количество колониеобразующих единиц было равно нулю.
Противогрибковые средства и химикаты
Итраконазол, кетоконазол и миконазол были приобретены у Janssen Pharmaceutica, Beerse,
Belguim.Флуконазол очищали (чистота 95%) из капсул Дифлюкана (Pfizer Central
Research, Sandwich, Великобритания). Амфотерицин B, туникамицин и флуцитозин были приобретены в
Sigma Chemical Co. (Сент-Луис, Миссури, США). Тербинафин и аморолфин были от Сандоз,
Вена, Австрия. Мулундокандин и акулеацин были синтезированы в Hoechst AG, Франкфурт,
Германия. MOPS и диметилсульфоксид (ДМСО) были от Sigma. Противогрибковые агенты были
растворенный в ДМСО, за исключением туникамицина и флуцитозина, которые были растворены в
стерильная дистиллированная вода.ДМСО (конечная концентрация <2% об. / Об.) Не влиял на МИК или морфогенетическая трансформация.
Результаты и обсуждение
Определения MIC и MFC
Ингибирование роста различными противогрибковыми агентами и МФЦ этих агентов для
Было исследовано несколько клинических изолятов и лабораторных штаммов C. albicans, . Все штаммы
были высокочувствительны к амфотерицину B (МИК 0.06-0,12 мг / л), туникамицин (МИК
0,12-0,25
мг / л) и акулеацина (МПК 0,25-0,5 мг / л), но менее чувствительны к мулундокандину (таблица). Амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин обычно были
фунгицидный при
концентрации, близкие к МИК (2-4 × МИК), в то время как туникамицин показал более
умеренная фунгицидная способность, поскольку она была фунгицидной при 8-16 × MIC (таблица). Из испытанных азольных противогрибковых средств итраконазол и кетоконазол показали:
хорошо
активность против всех C.albicans (таблица), а
флуконазол и миконазол показали хорошую активность против четырех из этих штаммов C. albicans (ATCC
, ATCC , 352 и 200/175) с диапазонами MIC 0,25-0,5.
мг / л и
0,06-0,25 мг / л соответственно. Однако при тестировании со штаммами 94/03, 94/14 и
94/57,
флуконазол и миконазол были значительно менее активны с диапазоном МИК 8 мг / л и
8–16
мг / л соответственно.Флуцитозин проявлял хорошую активность против шести штаммов и был неактивен.
против C. albicans ATCC , как описано ранее. 3 Напротив, тербинафин и аморолфин показали умеренную
активность против семи штаммов с диапазонами MIC 2-8 мг / л и 2-4 мг / л,
соответственно
(Таблица). Азолы и другие агенты проявляли фунгицидную способность только при
высокие концентрации (32-128 × МИК).
Влияние противогрибковых препаратов на морфогенетическую трансформацию
Влияние противогрибковых препаратов на морфогенетическую трансформацию различных C.albicans . Фунгицидные средства амфотерицин В, мулундокандин.
и акулеацин все блокировали морфогенетическую трансформацию при концентрациях ниже их
соответствующие значения МИК (таблица). Туникамицин также подавлял
морфогенетическая трансформация, но при концентрациях выше МИК (морфогенетическая
трансформация 0,25-0,5 мг / л; МПК 0,12-0,25 мг / л). Флуконазол и
миконазол имел
низкие МИК против четырех чувствительных к азолам штаммов и повлияли на морфогенетические
трансформация только при более высоких концентрациях (таблица).Влияние на
морфогенетическая трансформация наблюдалась при еще более высоких концентрациях на трех штаммах
с пониженной чувствительностью к азольным агентам (данные не представлены). Аналогично итраконазол и
кетоконазол, который был активен против всех штаммов по определению МИК, влиял только на
морфогенетическая трансформация при высоких концентрациях (таблица). Принадлежащий
оставаясь противогрибковыми агентами, флуцитозин был слабым ингибитором морфогенетических
трансформация, несмотря на его хорошую активность против шести штаммов, измеренную с помощью MIC.Тербинафин и аморолфин проявляли некоторую активность по оценке МПК, но мало влияли на
морфогенетическая трансформация (таблица).
Сравнение MIC, морфогенетической трансформации и MFC
Чтобы лучше описать различия, соотношение морфогенетической трансформации / МИК было
рассчитано для каждого противогрибкового средства (таблица). Эти соотношения можно использовать для
определить относительную эффективность каждого агента по подавлению роста и трансформации: (i) соотношение <1 (агенты, которые преимущественно ингибируют морфогенетическую трансформацию): амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин; (ii) соотношение 1-2 (с примерно равным влиянием на эти два процесса): туникамицин; и (iii) соотношение> 2 (агенты с более низкой способностью ингибировать
формы гиф и проявляют свою активность, подавляя дрожжевую форму): азолы, тербинафин,
флуцитозин и аморолфин.Также было рассчитано соотношение MFC / MIC (таблица). Данные свидетельствуют о том, что агенты с высоким фунгицидным потенциалом, например
амфотерицин B также обладает высоким потенциалом блокирования морфогенетической трансформации. Агенты с
низкий фунгицидный потенциал, например флуконазол, значительно менее способны ингибировать
морфогенетическая трансформация.
Комплекс изучения действия противогрибковых средств на морфогенетическую трансформацию
и MIC предоставляет дополнительную информацию о действии противогрибковых средств против обоих
дрожжевые и гифальные формы C.albicans и может быть связано с их фунгицидным действием.
потенциал. Наши данные предполагают, что фунгицидные агенты действуют как против морфогенетической трансформации, так и против морфогенетической трансформации.
и процесс бутонизации. Фунгицидные агенты, амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин,
нарушает мембрану 5 или целостность клеточной стенки, 6 и, следовательно, подавляет форму гиф на низком уровне
концентрации. Менее фунгицидные агенты (азолы, тербинафин и флуцитозин), проявляющие их
противогрибковое действие за счет ингибирования деметилазы цитохрома P450, скваленэпоксидазы 7 , 8 и синтеза РНК и ДНК, 5 соответственно, как правило, менее эффективны против
морфогенетическая трансформация, предполагающая, что они преимущественно ингибируют процесс почкования.Это
Заманчиво предположить, что способность амфотерицина B и эхинокандинов уменьшать грибковые
эффективная загрузка in vivo, по сравнению с азолами, частично может быть связано с их
способность влиять на морфогенетическую трансформацию.
В заключение, анализы морфогенетической трансформации и МИК, использованные в этом исследовании, объединили
с расчетом соотношения морфогенетическая трансформация / МИК, может помочь в предварительном
скрининг новых противогрибковых агентов.Действительно, некоторые виды противогрибковых средств ранее применялись.
с помощью методологии MIC продемонстрировали незначительную активность или ее отсутствие, хотя
эффективность in vivo — эхинокандины обычно проявляют слабую активность или не проявляют активности против Aspergillus spp. по оценке MIC, но эффективны in vivo и известны
уменьшить образование гиф. 6 Анализ морфогенетической трансформации очень
помогают в характеристике активности новых противогрибковых агентов и могут различать
фунгицидное из фунгистатических соединений.Анализ выполняется быстро: данные генерируются в течение 3 часов, так как
по сравнению с 48 часами для стандартных процедур MIC.
Таблица.
Сравнение МИК, морфогенетической трансформации и минимального фунгицидного действия
трансформация (MFC) противогрибковых агентов против C. albicans a
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 | 9015 9015 9015 8 | 16 |
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 8 | 16 |
Таблица.
Сравнение МИК, морфогенетической трансформации и минимального фунгицидного действия
трансформация (MFC) для противогрибковых средств против C.albicans a
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 | 9015 9015 9015 8 | 16 |
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 8 | 16 |
Ссылки
1.
Odds, F. C. (1988). Candida and Candidosis , 2-е изд. Баллиер Тиндалл, Лондон.
2.
Ло, Х. Дж., Колер, Дж. Р., Дидоменико, Б., Лёбенберг, Д., Каччапуоти, А. и Финк, Г. Р. (
1997
). Нефиламентные мутанты C. albicans являются авирулентными.
Ячейка
90
,
939
—
49. 3.
Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам. (1995). Эталонный метод для бульона
Разведение дрожжей на чувствительность к противогрибковым препаратам: предварительный стандарт M27-T. NCCLS,
Вилланова, П.А.
4.
Хоузер, С., Франколини, М. и Ислам, К. (
1996
). Влияние противогрибковых средств на
морфогенетическая трансформация Candida albicans in vitro.
Журнал
Антимикробная химиотерапия
38
,
579
‐87. 5.
Керридж Д. (
1986
). Механизм действия клинически важных противогрибковых препаратов.
Достижения в физиологии микробов
27
,
1
—
72. 6.
Курц, М. Б., Хит, И. Б., Марринан, Дж., Дрейкхорн, С., Ониши, Дж. И Дуглас, К. (
1994
). Морфологические эффекты липопептидов против Aspergillus fumigatus коррелят
с активностью против (1,3) -β-d-глюкансинтазы.
Противомикробное средство
Агенты и химиотерапия
38
,
1480
-9. 7.
Vanden Bossche, H. (1988). Механизм действия пиридиновых, пиримидиновых и азольных противогрибковых средств.В Ингибиторы биосинтеза стеролов: фармацевтические и агрохимические аспекты (Berg, D. &
Plempel, M. Eds), стр. 79–119. VCH Publishers Inc., Нью-Йорк.
8.
Райдер, Н. С. (
1988
). Механизмы действия и биохимическая селективность
аллиламиновые антимикотические средства.
Анналы Нью-Йоркской академии наук
544
,
208
‐20.
Британское общество антимикробной химиотерапии
Сравнение действия фунгицидных и фунгистатических противогрибковых средств на морфогенетическую трансформацию Candida albicans | Журнал антимикробной химиотерапии
Аннотация
Сравнивали одиннадцать различных противогрибковых агентов, и их способность ингибировать морфогенетические
трансформация Candida albicans была исследована вместе с их способностью ингибировать
рост, измеренный по методологии MIC.Фунгицидный потенциал каждого агента также был
определенный. Из протестированных противогрибковых средств только амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин.
ингибировал трансформацию при значениях суб-MIC; все три агента проявили фунгицидную активность при
концентрации близкие к МПК. Все остальные агенты были фунгицидными только в концентрациях, значительно превышающих
выше МПК и ингибирует морфогенетическую трансформацию только при концентрациях
над микрофоном. Эти данные предполагают, что фунгицидные противогрибковые агенты чаще действуют через
ингибирует морфогенетическую трансформацию C.albicans , в то время как фунгистатические агенты
не могут этого сделать и с большей вероятностью блокируют рост бутонами.
Введение
Candida albicans, диморфный гриб, вызывающий различные поверхностные и
глубоко укоренившиеся микозы, существуют в двух легко идентифицируемых морфологиях, а именно дрожжевых и гифах.
формы. 1 Есть некоторые свидетельства того, что гифальная форма
могут играть важную роль в патогенезе C.albicans, особенно с уважением
к способности организма проникать в клетки и ткани хозяина. 1 Точно так же гифальную форму часто считали
важна способность гриба прилипать к поверхности клеток. 1 Недавнее исследование показывает, что мутанты без гиф
avirulent, в отличие от вирулентного родительского штамма, предполагая, что способность образовывать гифы
могут играть важную роль в патогенезе C.albicans. 2
Принимая во внимание потенциальную роль этого диморфизма, понимание действия противогрибковых
агенты двух форм могут помочь в разработке лучших противогрибковых агентов. MIC
методологии, в том числе стандартизированные NCCLS, в значительной степени помогли
оценка противогрибковых средств против различных видов дрожжей. 3 Такая методика учитывает только торможение
роста клеток и не позволяет оценить влияние лекарств на трансформацию
от дрожжевой формы к гифальной форме.Недавно мы описали модифицированную версию NCCLS.
процедура, которая может быть использована для изучения влияния противогрибковых средств на морфогенетические
трансформация дрожжевых форм в гифы. 4
В этом исследовании мы использовали различные клинические и лабораторные штаммы для изучения эффектов широкого спектра
ряд противогрибковых препаратов на морфогенетическую трансформацию C. albicans. Наши
результаты показывают, что более фунгицидные противогрибковые агенты, например амфотерицин B и
эхинокандины, с гораздо большей вероятностью ингибируют трансформацию, чем менее фунгицидные
агенты, например азолы и флуцитозин.
Материалы и методы
Определение МИК и морфогенетической трансформации
Синхронизированная фаза дрожжей Клетки C. albicans использовали во всех экспериментах и были
подготовлен, как описано ранее. 4 C. albicans эталонных штаммов ATCC
и
3 и клинические изоляты 200/175, 352, 94/03, 94/14 и 94/57
использовались повсюду. Синхронизированные со стационарной фазой дрожжевые клетки собирали с помощью
центрифугирование, промыли трижды в 0.1 М фосфатно-солевой буфер и сразу же использовать
стандартные анализы MIC 3 и эксперименты по морфогенетической трансформации. 4 Влияние различных противогрибковых средств на
морфогенетическую трансформацию C. albicans оценивали путем исследования содержимого
96-луночных микротитровальных планшетов после 3 ч инкубации при 35 ° C с использованием фазово-контрастной микроскопии
(с использованием микроскопа Olympus CK и фазово-контрастного микроскопа Zeiss), как описано
ранее. 4
Минимальная фунгицидная концентрация
образцов (10 мкл) были удалены из всех лунок стандартных планшетов MIC и нанесены на них.
в прямоугольные чашки, содержащие агар с декстрозой Сабуро. Чашки инкубировали в течение
24–48
ч при 35 ° C. Минимальная фунгицидная концентрация (MFC) определялась как концентрация
противогрибковый агент, у которого количество колониеобразующих единиц было равно нулю.
Противогрибковые средства и химикаты
Итраконазол, кетоконазол и миконазол были приобретены у Janssen Pharmaceutica, Beerse,
Belguim.Флуконазол очищали (чистота 95%) из капсул Дифлюкана (Pfizer Central
Research, Sandwich, Великобритания). Амфотерицин B, туникамицин и флуцитозин были приобретены в
Sigma Chemical Co. (Сент-Луис, Миссури, США). Тербинафин и аморолфин были от Сандоз,
Вена, Австрия. Мулундокандин и акулеацин были синтезированы в Hoechst AG, Франкфурт,
Германия. MOPS и диметилсульфоксид (ДМСО) были от Sigma. Противогрибковые агенты были
растворенный в ДМСО, за исключением туникамицина и флуцитозина, которые были растворены в
стерильная дистиллированная вода.ДМСО (конечная концентрация <2% об. / Об.) Не влиял на МИК или морфогенетическая трансформация.
Результаты и обсуждение
Определения MIC и MFC
Ингибирование роста различными противогрибковыми агентами и МФЦ этих агентов для
Было исследовано несколько клинических изолятов и лабораторных штаммов C. albicans, . Все штаммы
были высокочувствительны к амфотерицину B (МИК 0.06-0,12 мг / л), туникамицин (МИК
0,12-0,25
мг / л) и акулеацина (МПК 0,25-0,5 мг / л), но менее чувствительны к мулундокандину (таблица). Амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин обычно были
фунгицидный при
концентрации, близкие к МИК (2-4 × МИК), в то время как туникамицин показал более
умеренная фунгицидная способность, поскольку она была фунгицидной при 8-16 × MIC (таблица). Из испытанных азольных противогрибковых средств итраконазол и кетоконазол показали:
хорошо
активность против всех C.albicans (таблица), а
флуконазол и миконазол показали хорошую активность против четырех из этих штаммов C. albicans (ATCC
, ATCC , 352 и 200/175) с диапазонами MIC 0,25-0,5.
мг / л и
0,06-0,25 мг / л соответственно. Однако при тестировании со штаммами 94/03, 94/14 и
94/57,
флуконазол и миконазол были значительно менее активны с диапазоном МИК 8 мг / л и
8–16
мг / л соответственно.Флуцитозин проявлял хорошую активность против шести штаммов и был неактивен.
против C. albicans ATCC , как описано ранее. 3 Напротив, тербинафин и аморолфин показали умеренную
активность против семи штаммов с диапазонами MIC 2-8 мг / л и 2-4 мг / л,
соответственно
(Таблица). Азолы и другие агенты проявляли фунгицидную способность только при
высокие концентрации (32-128 × МИК).
Влияние противогрибковых препаратов на морфогенетическую трансформацию
Влияние противогрибковых препаратов на морфогенетическую трансформацию различных C.albicans . Фунгицидные средства амфотерицин В, мулундокандин.
и акулеацин все блокировали морфогенетическую трансформацию при концентрациях ниже их
соответствующие значения МИК (таблица). Туникамицин также подавлял
морфогенетическая трансформация, но при концентрациях выше МИК (морфогенетическая
трансформация 0,25-0,5 мг / л; МПК 0,12-0,25 мг / л). Флуконазол и
миконазол имел
низкие МИК против четырех чувствительных к азолам штаммов и повлияли на морфогенетические
трансформация только при более высоких концентрациях (таблица).Влияние на
морфогенетическая трансформация наблюдалась при еще более высоких концентрациях на трех штаммах
с пониженной чувствительностью к азольным агентам (данные не представлены). Аналогично итраконазол и
кетоконазол, который был активен против всех штаммов по определению МИК, влиял только на
морфогенетическая трансформация при высоких концентрациях (таблица). Принадлежащий
оставаясь противогрибковыми агентами, флуцитозин был слабым ингибитором морфогенетических
трансформация, несмотря на его хорошую активность против шести штаммов, измеренную с помощью MIC.Тербинафин и аморолфин проявляли некоторую активность по оценке МПК, но мало влияли на
морфогенетическая трансформация (таблица).
Сравнение MIC, морфогенетической трансформации и MFC
Чтобы лучше описать различия, соотношение морфогенетической трансформации / МИК было
рассчитано для каждого противогрибкового средства (таблица). Эти соотношения можно использовать для
определить относительную эффективность каждого агента по подавлению роста и трансформации: (i) соотношение <1 (агенты, которые преимущественно ингибируют морфогенетическую трансформацию): амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин; (ii) соотношение 1-2 (с примерно равным влиянием на эти два процесса): туникамицин; и (iii) соотношение> 2 (агенты с более низкой способностью ингибировать
формы гиф и проявляют свою активность, подавляя дрожжевую форму): азолы, тербинафин,
флуцитозин и аморолфин.Также было рассчитано соотношение MFC / MIC (таблица). Данные свидетельствуют о том, что агенты с высоким фунгицидным потенциалом, например
амфотерицин B также обладает высоким потенциалом блокирования морфогенетической трансформации. Агенты с
низкий фунгицидный потенциал, например флуконазол, значительно менее способны ингибировать
морфогенетическая трансформация.
Комплекс изучения действия противогрибковых средств на морфогенетическую трансформацию
и MIC предоставляет дополнительную информацию о действии противогрибковых средств против обоих
дрожжевые и гифальные формы C.albicans и может быть связано с их фунгицидным действием.
потенциал. Наши данные предполагают, что фунгицидные агенты действуют как против морфогенетической трансформации, так и против морфогенетической трансформации.
и процесс бутонизации. Фунгицидные агенты, амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин,
нарушает мембрану 5 или целостность клеточной стенки, 6 и, следовательно, подавляет форму гиф на низком уровне
концентрации. Менее фунгицидные агенты (азолы, тербинафин и флуцитозин), проявляющие их
противогрибковое действие за счет ингибирования деметилазы цитохрома P450, скваленэпоксидазы 7 , 8 и синтеза РНК и ДНК, 5 соответственно, как правило, менее эффективны против
морфогенетическая трансформация, предполагающая, что они преимущественно ингибируют процесс почкования.Это
Заманчиво предположить, что способность амфотерицина B и эхинокандинов уменьшать грибковые
эффективная загрузка in vivo, по сравнению с азолами, частично может быть связано с их
способность влиять на морфогенетическую трансформацию.
В заключение, анализы морфогенетической трансформации и МИК, использованные в этом исследовании, объединили
с расчетом соотношения морфогенетическая трансформация / МИК, может помочь в предварительном
скрининг новых противогрибковых агентов.Действительно, некоторые виды противогрибковых средств ранее применялись.
с помощью методологии MIC продемонстрировали незначительную активность или ее отсутствие, хотя
эффективность in vivo — эхинокандины обычно проявляют слабую активность или не проявляют активности против Aspergillus spp. по оценке MIC, но эффективны in vivo и известны
уменьшить образование гиф. 6 Анализ морфогенетической трансформации очень
помогают в характеристике активности новых противогрибковых агентов и могут различать
фунгицидное из фунгистатических соединений.Анализ выполняется быстро: данные генерируются в течение 3 часов, так как
по сравнению с 48 часами для стандартных процедур MIC.
Таблица.
Сравнение МИК, морфогенетической трансформации и минимального фунгицидного действия
трансформация (MFC) противогрибковых агентов против C. albicans a
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 | 9015 9015 9015 8 | 16 |
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 8 | 16 |
Таблица.
Сравнение МИК, морфогенетической трансформации и минимального фунгицидного действия
трансформация (MFC) для противогрибковых средств против C.albicans a
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 | 9015 9015 9015 8 | 16 |
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 8 | 16 |
Ссылки
1.
Odds, F. C. (1988). Candida and Candidosis , 2-е изд. Баллиер Тиндалл, Лондон.
2.
Ло, Х. Дж., Колер, Дж. Р., Дидоменико, Б., Лёбенберг, Д., Каччапуоти, А. и Финк, Г. Р. (
1997
). Нефиламентные мутанты C. albicans являются авирулентными.
Ячейка
90
,
939
—
49. 3.
Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам. (1995). Эталонный метод для бульона
Разведение дрожжей на чувствительность к противогрибковым препаратам: предварительный стандарт M27-T. NCCLS,
Вилланова, П.А.
4.
Хоузер, С., Франколини, М. и Ислам, К. (
1996
). Влияние противогрибковых средств на
морфогенетическая трансформация Candida albicans in vitro.
Журнал
Антимикробная химиотерапия
38
,
579
‐87. 5.
Керридж Д. (
1986
). Механизм действия клинически важных противогрибковых препаратов.
Достижения в физиологии микробов
27
,
1
—
72. 6.
Курц, М. Б., Хит, И. Б., Марринан, Дж., Дрейкхорн, С., Ониши, Дж. И Дуглас, К. (
1994
). Морфологические эффекты липопептидов против Aspergillus fumigatus коррелят
с активностью против (1,3) -β-d-глюкансинтазы.
Противомикробное средство
Агенты и химиотерапия
38
,
1480
-9. 7.
Vanden Bossche, H. (1988). Механизм действия пиридиновых, пиримидиновых и азольных противогрибковых средств.В Ингибиторы биосинтеза стеролов: фармацевтические и агрохимические аспекты (Berg, D. &
Plempel, M. Eds), стр. 79–119. VCH Publishers Inc., Нью-Йорк.
8.
Райдер, Н. С. (
1988
). Механизмы действия и биохимическая селективность
аллиламиновые антимикотические средства.
Анналы Нью-Йоркской академии наук
544
,
208
‐20.
Британское общество антимикробной химиотерапии
Сравнение действия фунгицидных и фунгистатических противогрибковых средств на морфогенетическую трансформацию Candida albicans | Журнал антимикробной химиотерапии
Аннотация
Сравнивали одиннадцать различных противогрибковых агентов, и их способность ингибировать морфогенетические
трансформация Candida albicans была исследована вместе с их способностью ингибировать
рост, измеренный по методологии MIC.Фунгицидный потенциал каждого агента также был
определенный. Из протестированных противогрибковых средств только амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин.
ингибировал трансформацию при значениях суб-MIC; все три агента проявили фунгицидную активность при
концентрации близкие к МПК. Все остальные агенты были фунгицидными только в концентрациях, значительно превышающих
выше МПК и ингибирует морфогенетическую трансформацию только при концентрациях
над микрофоном. Эти данные предполагают, что фунгицидные противогрибковые агенты чаще действуют через
ингибирует морфогенетическую трансформацию C.albicans , в то время как фунгистатические агенты
не могут этого сделать и с большей вероятностью блокируют рост бутонами.
Введение
Candida albicans, диморфный гриб, вызывающий различные поверхностные и
глубоко укоренившиеся микозы, существуют в двух легко идентифицируемых морфологиях, а именно дрожжевых и гифах.
формы. 1 Есть некоторые свидетельства того, что гифальная форма
могут играть важную роль в патогенезе C.albicans, особенно с уважением
к способности организма проникать в клетки и ткани хозяина. 1 Точно так же гифальную форму часто считали
важна способность гриба прилипать к поверхности клеток. 1 Недавнее исследование показывает, что мутанты без гиф
avirulent, в отличие от вирулентного родительского штамма, предполагая, что способность образовывать гифы
могут играть важную роль в патогенезе C.albicans. 2
Принимая во внимание потенциальную роль этого диморфизма, понимание действия противогрибковых
агенты двух форм могут помочь в разработке лучших противогрибковых агентов. MIC
методологии, в том числе стандартизированные NCCLS, в значительной степени помогли
оценка противогрибковых средств против различных видов дрожжей. 3 Такая методика учитывает только торможение
роста клеток и не позволяет оценить влияние лекарств на трансформацию
от дрожжевой формы к гифальной форме.Недавно мы описали модифицированную версию NCCLS.
процедура, которая может быть использована для изучения влияния противогрибковых средств на морфогенетические
трансформация дрожжевых форм в гифы. 4
В этом исследовании мы использовали различные клинические и лабораторные штаммы для изучения эффектов широкого спектра
ряд противогрибковых препаратов на морфогенетическую трансформацию C. albicans. Наши
результаты показывают, что более фунгицидные противогрибковые агенты, например амфотерицин B и
эхинокандины, с гораздо большей вероятностью ингибируют трансформацию, чем менее фунгицидные
агенты, например азолы и флуцитозин.
Материалы и методы
Определение МИК и морфогенетической трансформации
Синхронизированная фаза дрожжей Клетки C. albicans использовали во всех экспериментах и были
подготовлен, как описано ранее. 4 C. albicans эталонных штаммов ATCC
и
3 и клинические изоляты 200/175, 352, 94/03, 94/14 и 94/57
использовались повсюду. Синхронизированные со стационарной фазой дрожжевые клетки собирали с помощью
центрифугирование, промыли трижды в 0.1 М фосфатно-солевой буфер и сразу же использовать
стандартные анализы MIC 3 и эксперименты по морфогенетической трансформации. 4 Влияние различных противогрибковых средств на
морфогенетическую трансформацию C. albicans оценивали путем исследования содержимого
96-луночных микротитровальных планшетов после 3 ч инкубации при 35 ° C с использованием фазово-контрастной микроскопии
(с использованием микроскопа Olympus CK и фазово-контрастного микроскопа Zeiss), как описано
ранее. 4
Минимальная фунгицидная концентрация
образцов (10 мкл) были удалены из всех лунок стандартных планшетов MIC и нанесены на них.
в прямоугольные чашки, содержащие агар с декстрозой Сабуро. Чашки инкубировали в течение
24–48
ч при 35 ° C. Минимальная фунгицидная концентрация (MFC) определялась как концентрация
противогрибковый агент, у которого количество колониеобразующих единиц было равно нулю.
Противогрибковые средства и химикаты
Итраконазол, кетоконазол и миконазол были приобретены у Janssen Pharmaceutica, Beerse,
Belguim.Флуконазол очищали (чистота 95%) из капсул Дифлюкана (Pfizer Central
Research, Sandwich, Великобритания). Амфотерицин B, туникамицин и флуцитозин были приобретены в
Sigma Chemical Co. (Сент-Луис, Миссури, США). Тербинафин и аморолфин были от Сандоз,
Вена, Австрия. Мулундокандин и акулеацин были синтезированы в Hoechst AG, Франкфурт,
Германия. MOPS и диметилсульфоксид (ДМСО) были от Sigma. Противогрибковые агенты были
растворенный в ДМСО, за исключением туникамицина и флуцитозина, которые были растворены в
стерильная дистиллированная вода.ДМСО (конечная концентрация <2% об. / Об.) Не влиял на МИК или морфогенетическая трансформация.
Результаты и обсуждение
Определения MIC и MFC
Ингибирование роста различными противогрибковыми агентами и МФЦ этих агентов для
Было исследовано несколько клинических изолятов и лабораторных штаммов C. albicans, . Все штаммы
были высокочувствительны к амфотерицину B (МИК 0.06-0,12 мг / л), туникамицин (МИК
0,12-0,25
мг / л) и акулеацина (МПК 0,25-0,5 мг / л), но менее чувствительны к мулундокандину (таблица). Амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин обычно были
фунгицидный при
концентрации, близкие к МИК (2-4 × МИК), в то время как туникамицин показал более
умеренная фунгицидная способность, поскольку она была фунгицидной при 8-16 × MIC (таблица). Из испытанных азольных противогрибковых средств итраконазол и кетоконазол показали:
хорошо
активность против всех C.albicans (таблица), а
флуконазол и миконазол показали хорошую активность против четырех из этих штаммов C. albicans (ATCC
, ATCC , 352 и 200/175) с диапазонами MIC 0,25-0,5.
мг / л и
0,06-0,25 мг / л соответственно. Однако при тестировании со штаммами 94/03, 94/14 и
94/57,
флуконазол и миконазол были значительно менее активны с диапазоном МИК 8 мг / л и
8–16
мг / л соответственно.Флуцитозин проявлял хорошую активность против шести штаммов и был неактивен.
против C. albicans ATCC , как описано ранее. 3 Напротив, тербинафин и аморолфин показали умеренную
активность против семи штаммов с диапазонами MIC 2-8 мг / л и 2-4 мг / л,
соответственно
(Таблица). Азолы и другие агенты проявляли фунгицидную способность только при
высокие концентрации (32-128 × МИК).
Влияние противогрибковых препаратов на морфогенетическую трансформацию
Влияние противогрибковых препаратов на морфогенетическую трансформацию различных C.albicans . Фунгицидные средства амфотерицин В, мулундокандин.
и акулеацин все блокировали морфогенетическую трансформацию при концентрациях ниже их
соответствующие значения МИК (таблица). Туникамицин также подавлял
морфогенетическая трансформация, но при концентрациях выше МИК (морфогенетическая
трансформация 0,25-0,5 мг / л; МПК 0,12-0,25 мг / л). Флуконазол и
миконазол имел
низкие МИК против четырех чувствительных к азолам штаммов и повлияли на морфогенетические
трансформация только при более высоких концентрациях (таблица).Влияние на
морфогенетическая трансформация наблюдалась при еще более высоких концентрациях на трех штаммах
с пониженной чувствительностью к азольным агентам (данные не представлены). Аналогично итраконазол и
кетоконазол, который был активен против всех штаммов по определению МИК, влиял только на
морфогенетическая трансформация при высоких концентрациях (таблица). Принадлежащий
оставаясь противогрибковыми агентами, флуцитозин был слабым ингибитором морфогенетических
трансформация, несмотря на его хорошую активность против шести штаммов, измеренную с помощью MIC.Тербинафин и аморолфин проявляли некоторую активность по оценке МПК, но мало влияли на
морфогенетическая трансформация (таблица).
Сравнение MIC, морфогенетической трансформации и MFC
Чтобы лучше описать различия, соотношение морфогенетической трансформации / МИК было
рассчитано для каждого противогрибкового средства (таблица). Эти соотношения можно использовать для
определить относительную эффективность каждого агента по подавлению роста и трансформации: (i) соотношение <1 (агенты, которые преимущественно ингибируют морфогенетическую трансформацию): амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин; (ii) соотношение 1-2 (с примерно равным влиянием на эти два процесса): туникамицин; и (iii) соотношение> 2 (агенты с более низкой способностью ингибировать
формы гиф и проявляют свою активность, подавляя дрожжевую форму): азолы, тербинафин,
флуцитозин и аморолфин.Также было рассчитано соотношение MFC / MIC (таблица). Данные свидетельствуют о том, что агенты с высоким фунгицидным потенциалом, например
амфотерицин B также обладает высоким потенциалом блокирования морфогенетической трансформации. Агенты с
низкий фунгицидный потенциал, например флуконазол, значительно менее способны ингибировать
морфогенетическая трансформация.
Комплекс изучения действия противогрибковых средств на морфогенетическую трансформацию
и MIC предоставляет дополнительную информацию о действии противогрибковых средств против обоих
дрожжевые и гифальные формы C.albicans и может быть связано с их фунгицидным действием.
потенциал. Наши данные предполагают, что фунгицидные агенты действуют как против морфогенетической трансформации, так и против морфогенетической трансформации.
и процесс бутонизации. Фунгицидные агенты, амфотерицин B, мулундокандин и акулеацин,
нарушает мембрану 5 или целостность клеточной стенки, 6 и, следовательно, подавляет форму гиф на низком уровне
концентрации. Менее фунгицидные агенты (азолы, тербинафин и флуцитозин), проявляющие их
противогрибковое действие за счет ингибирования деметилазы цитохрома P450, скваленэпоксидазы 7 , 8 и синтеза РНК и ДНК, 5 соответственно, как правило, менее эффективны против
морфогенетическая трансформация, предполагающая, что они преимущественно ингибируют процесс почкования.Это
Заманчиво предположить, что способность амфотерицина B и эхинокандинов уменьшать грибковые
эффективная загрузка in vivo, по сравнению с азолами, частично может быть связано с их
способность влиять на морфогенетическую трансформацию.
В заключение, анализы морфогенетической трансформации и МИК, использованные в этом исследовании, объединили
с расчетом соотношения морфогенетическая трансформация / МИК, может помочь в предварительном
скрининг новых противогрибковых агентов.Действительно, некоторые виды противогрибковых средств ранее применялись.
с помощью методологии MIC продемонстрировали незначительную активность или ее отсутствие, хотя
эффективность in vivo — эхинокандины обычно проявляют слабую активность или не проявляют активности против Aspergillus spp. по оценке MIC, но эффективны in vivo и известны
уменьшить образование гиф. 6 Анализ морфогенетической трансформации очень
помогают в характеристике активности новых противогрибковых агентов и могут различать
фунгицидное из фунгистатических соединений.Анализ выполняется быстро: данные генерируются в течение 3 часов, так как
по сравнению с 48 часами для стандартных процедур MIC.
Таблица.
Сравнение МИК, морфогенетической трансформации и минимального фунгицидного действия
трансформация (MFC) противогрибковых агентов против C. albicans a
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 | 9015 9015 9015 8 | 16 |
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 8 | 16 |
Таблица.
Сравнение МИК, морфогенетической трансформации и минимального фунгицидного действия
трансформация (MFC) для противогрибковых средств против C.albicans a
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 | 9015 9015 9015 8 | 16 |
| Противогрибковое средство . | микрофон . | MT . | MFC . | MT / MIC . | MFC / MIC . | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| a Значения MIC, морфогенетической трансформации (MT) и MFC равны выражается в виде средних значений (мг / л) для каждого противогрибкового агента. | |||||||
| b Медиана рассчитывалась только на основе чувствительных штаммов по оценке ВПК; люди с пониженной восприимчивостью или устойчивостью к лекарствам были исключены (см. текст). | |||||||
| Амфотерицин B | 0,06 | 0,02 | 0,25 | 0,33 | 4 | ||
| Акулеацин | 0,25 | 9015 9015 902 902 1 | 0,012 | 4 | 0,012 | 4 | |
| Туникамицин | 0,25 | 0,5 | 8 | 2 | 32 | ||
| 32 | |||||||
| 95 | 8 | 32 | 16 | 64 | |||
| Итраконазол | 0,5 | 8 | 32 | 16 | 64 | ||
| 64 | |||||||
| Миконазол b | 0,25 | 16 | 32 | 64 | 128 | ||
| Флюцитозин 65 9015 b 9005 | 64 | 128 | 128 | > 128 | |||
| Тербинафин | 8 | 32 | 128 | 4 | 16 | 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 9015 8 | 16 |
Ссылки
1.
Odds, F. C. (1988). Candida and Candidosis , 2-е изд. Баллиер Тиндалл, Лондон.
2.
Ло, Х. Дж., Колер, Дж. Р., Дидоменико, Б., Лёбенберг, Д., Каччапуоти, А. и Финк, Г. Р. (
1997
). Нефиламентные мутанты C. albicans являются авирулентными.
Ячейка
90
,
939
—
49. 3.
Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам. (1995). Эталонный метод для бульона
Разведение дрожжей на чувствительность к противогрибковым препаратам: предварительный стандарт M27-T. NCCLS,
Вилланова, П.А.
4.
Хоузер, С., Франколини, М. и Ислам, К. (
1996
). Влияние противогрибковых средств на
морфогенетическая трансформация Candida albicans in vitro.
Журнал
Антимикробная химиотерапия
38
,
579
‐87. 5.
Керридж Д. (
1986
). Механизм действия клинически важных противогрибковых препаратов.
Достижения в физиологии микробов
27
,
1
—
72. 6.
Курц, М. Б., Хит, И. Б., Марринан, Дж., Дрейкхорн, С., Ониши, Дж. И Дуглас, К. (
1994
). Морфологические эффекты липопептидов против Aspergillus fumigatus коррелят
с активностью против (1,3) -β-d-глюкансинтазы.
Противомикробное средство
Агенты и химиотерапия
38
,
1480
-9. 7.
Vanden Bossche, H. (1988). Механизм действия пиридиновых, пиримидиновых и азольных противогрибковых средств.В Ингибиторы биосинтеза стеролов: фармацевтические и агрохимические аспекты (Berg, D. &
Plempel, M. Eds), стр. 79–119. VCH Publishers Inc., Нью-Йорк.
8.
Райдер, Н. С. (
1988
). Механизмы действия и биохимическая селективность
аллиламиновые антимикотические средства.
Анналы Нью-Йоркской академии наук
544
,
208
‐20.
Британское общество антимикробной химиотерапии
Фунгицидное действие ресвератрола на инфекционные грибы человека
Adams, M.Л. и Квон, Г. С., Относительное состояние агрегации и гемолитическая активность амфотерицина В, инкапсулированного мицеллами конъюгата поли (этиленоксид) -блок-поли (N-гексил-L-аспартамид) -ацил: влияние длины ацильной цепи. J. Controlled Release , 87, 23–32 (2003).
Артикул
CAS
Google Scholar
Клемент, М. В., Хирпара, Дж. Л., Чаудхури, С. Х., и Первайз, С., Химиопрофилактический агент ресвератрол, натуральный продукт, полученный из винограда, запускает зависимый от передачи сигналов CD95 апоптоз в опухолевых клетках человека. Кровь , 92, 996–1002 (1998).
PubMed
CAS
Google Scholar
Daroch, F., Hoeneisen, M., Gonzalez, CL, Kawaguchi, F., Salgado, F., Solar, H., and Garcia, A., In vitro антибактериальная активность чилийских красных вин против Helicobacter pylori . Microbios , 104, 79–85 (2001).
PubMed
CAS
Google Scholar
Эль-Аттар, Т.М. и Вирджи, А. С. Модулирующее действие ресвератрола и кверцетина на рост и пролиферацию раковых клеток полости рта. Противораковые препараты , 10, 187–193 (1999).
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
Филип В., Плоцкова М., Смидркал Дж., Спичкова З., Мельзох К. и Шмидт С. Ресвератрол и его антиоксидантная и противомикробная эффективность. Food Chem. , 83, 585–593 (2003).
Артикул
CAS
Google Scholar
Гронбек, М., Дейс, А., Соренсен, Т. I., Беккер, У., Шнор, П., и Дженсен, Г., Смертность, связанная с умеренным потреблением вина, пива или спиртных напитков. Br. Med. J. , 310, 1165–1169 (1995).
CAS
Google Scholar
Hoos, G. и Blaich, R., Влияние ресвератрола на прорастание конидий и рост мицелия Botrytis cinerea и Phomopsis riticola . J. Phytopathol. , 129, 102–110 (1990).
Артикул
CAS
Google Scholar
Хси, Т. и Ву, Дж. М., Дифференциальные эффекты ресвератрола на рост, остановку клеточного цикла и индукцию апоптоза в клеточных линиях рака простаты человека. Exp. Cell Res. , 249, 109–115 (1999).
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
Ян, Б., Мартин, Э., Стуэбен, А., и Бхакди, С., Тестирование чувствительности Candida albicans и Aspergillus с помощью простого микротитратора с добавлением менадиона 3- (4,5 -диметил-2-тиазолил) -2,5-дифенил-2H-тетразолийбромид. J. Clin. Микробный. , 33, 661–667 (1995).
CAS
Google Scholar
Янг, М., Цай, Л., Удеани, GO, Замедление, KV, Томас, CF, Бичер, CWW, Фонг, HHS, Фарнсворт, Северная Каролина, Кингхорн, AD, Мехта, RG, Луна, RC, и Пеццуто. Дж. М., Химиопрофилактическая активность ресвератрола, натурального продукта, полученного из винограда, против рака. Science , 275, 218–220 (1997).
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
Клепсер, М.Э., Эрнст, Э. Дж., Льюис, Р. Э., Эрнст, М. Э. и Пфаллер, М. А., Влияние условий испытаний на результаты противогрибковой кривой зависимости времени от времени: предложение по стандартизированным методам. Антимикробный. Агенты Chemother , 42, 1207–1212 (1998).
PubMed
CAS
Google Scholar
Ли, Д.Г., Ким, Д.-Х., Пак, Ю., Ким, Х.К., Ким, Х.Н., Шин, Ю.К., Чой, С.Х., и Хам, К. -С., Фунгицидное действие противомикробных препаратов пептид PMAP-23, выделенный из миелоида свиньи против Candida albicans.Биохим . Biophys. Res. Commun. , 282, 570–574 (2001).
Артикул
CAS
Google Scholar
Ли, Д.Г., Пак, Ю., Ким, Х.Н., Ким, Х.К., Ким, П.И., Чой, Б.Х., и Хам, К. -С., Противогрибковый механизм антимикробного пептида, HP (2-20 ), Полученный из N-конца Helicobacter pylori Рибосомный белок L1 против Candida albicans . Biochem. Биофиз. Res. Commun. , 293, 231–238 (2002).
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
Pace-Asciak, CR, Hahn, S., Diamandis, EP, Soleas, G., and Goldberg, DM, Фенольные соединения красного вина, транс-ресвератрол и кверцетин блокируют агрегацию тромбоцитов человека и синтез эйкозаноидов: последствия для защиты от ишемическая болезнь сердца. Clin. Чим. Acta , 235, 207–219 (1995).
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
Ротондо, С., Райтар, Г., Манарини, С., Селардо, А., Ротилло, Д., де Гаэтано, Евангелиста, В., и Черлетти, К., Влияние трансресвератрола, природного полифенольного компонента на функцию полиморфно-ядерных лейкоцитов человека. Br. J. Pharmacol. , 123 (8), 1691–1699 (1998).
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
Тегос, Г., Стермитц, Ф. Р., Ломовская, О., Льюис, К., Множественные ингибиторы помпы обнаруживают заметную активность растительных антимикробных препаратов. Антимикробный. Агенты Chemother. 46, 3133–3141 (2002).
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
Юн, С.-Х, Ким, Ю. -С., Гим, С. -Й, Сонг, Б. -Х., И Бэ, Ю. -С., Ингибирование активности протеинкиназы СК с помощью ресвератрол, натуральное соединение красного вина и винограда. Life Sci ., 71, 2145–2152 (2002).
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
Фунгицидный эффект изокверцитрина за счет нарушения мембран
Основные моменты
- •
Изокверцитрин — это флавоноид, выделенный из Aster yomen .
- •
Изокверцитрин нарушает липидный бислой, что приводит к увеличению проницаемости мембраны.
- •
Изокверцитрин оказывает фунгицидное действие через нарушение мембран.
Abstract
Изокверцитрин — это флавоноид, выделенный из Aster yomen , который использовался как традиционное лекарственное растение. В настоящем исследовании мы исследовали противогрибковую активность и основной механизм действия изокверцитрина.Изокверцитрин оказал сильное действие в тесте на чувствительность к патогенным грибам и почти не имел гемолиза. Анализы высвобождения пропидия иодида и калия были проведены на Candida albicans , и эти исследования подтвердили, что изокверцитрин вызывает повреждение мембраны, тем самым увеличивая проницаемость. Мембранный потенциал анализировали с использованием 3,3′-дипропилтиакарбоцианина иодида [DiSC 3 (5)], и на переход мембранного потенциала указывало увеличение интенсивности флуоресценции.Для дальнейшего анализа этих результатов с использованием модельных мембран были приготовлены гигантские однослойные везикулы и большие однослойные везикулы, которые инкапсулировали кальцеин, и обнаружение утечки кальцеина из липосом показало, что мембрана была нарушена. Мы также подтвердили нарушение мембраны, наблюдая за неупорядоченным статусом липидного бислоя с флуоресценцией 1,6-дифенил-1,3,5-гексатриена. Более того, при проточном цитометрическом анализе были выявлены изменения в размере и зернистости клетки. Все эти результаты предполагали нарушение мембраны, а степень нарушения оценивалась в пределах 2.От 3 нм до 3,3 нм по данным флуоресцентного изотиоцианат-декстранового анализа. В совокупности изокверцитрин оказывает фунгицидное действие, нарушая мембрану клеток.
Сокращения
МИК
минимальная ингибирующая концентрация
МТТ
3- (4,5-диметил-2-тиазолил) -2,5-дифенил-2 H -тетразолийбромид
DiSC 3 (5)
3, 3′-дипропилтиакарбоцианин
GUV
гигантская однослойная везикула
LUV
большая однослойная везикула
PE
фосфатидилэтаноламин
DPH
1,6-дифенил-1,3,5-гексатриен
FITC
000
000
000
0004 флуоресцеанат флюоресцеан.
Противогрибковая активность
Нарушение мембраны
Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (0)
Просмотреть аннотацию
Copyright © 2014 Elsevier B.V.
Рекомендуемые статьи
Цитирующие статьи
Оценка фунгицидных эффектов посткультуральной среды выбранных плесневых грибов и бактерий в отношении грибов Basidiomycetes, вызывающих разрушение древесины :: BioResources
Бетлей И., Богуслав А. и Краевски К. Дж. (2020). « Оценка фунгицидных эффектов посткультуральной среды отобранных плесневых грибов и бактерий в отношении Basidiomycetes грибов, вызывающих разрушение древесины ,» BioRes. 15 (2), 2471-2482.
Abstract
Результаты посткультуральной фунгицидной среды из Trichoderma viride Pers. и Alternaria alternata (Fr.) Keissl. плесневые грибы и бактерий Acetobacter xylinum были изучены относительно выбранных грибов, принадлежащих к базидиомицетам, вызывающим гниение древесины. Полученные результаты подтвердили, что посткультуральные жидкости, полученные в результате культивирования различных микроорганизмов, могут оказывать дифференцированное фунгицидное действие на дереворазрушающие грибы.Самая низкая концентрация жидкости из культуры A. xylinum , добавленной к ростовой среде исследуемых грибов, которая полностью подавляла рост, составила 5 мл / 100 мл. Фунгицидное действие жидкости из культуры плесневых грибов на тестируемые древесно-гниющие грибы изменилось. быть определенно низким. Trametes versicolor (L.) Lloyd оказался наиболее чувствительным видом. Pleurotus cornucopiae (Paulet) Rolland продемонстрировал полную устойчивость к добавляемой в питательную среду жидкости, полученной из плесневых грибов.Бактериальная культуральная жидкость A. xylinum может быть подвергнута дальнейшему анализу как естественный биоцид для защиты древесины от древесных грибков.
Скачать PDF
Полная статья
Оценка фунгицидных эффектов посткультуральной среды отдельных плесневых грибов и бактерий в отношении базидиомицетов Грибы, вызывающие разрушение древесины
Изабела Бетлей, Андрес Богуслав * и Кшиштоф Й. Краевский
Результаты пост-культуральной фунгицидной среды из Trichoderma viride Pers.и Alternaria alternata (Fr.) Keissl. плесневые грибы и бактерий Acetobacter xylinum были изучены относительно выбранных грибов, принадлежащих к Basidiomycetes , которые вызывают гниение древесины. Полученные результаты подтвердили, что посткультуральные жидкости, полученные в результате культивирования различных микроорганизмов, могут оказывать дифференцированное фунгицидное действие на дереворазрушающие грибы. Самая низкая концентрация жидкости из культуры A. xylinum , добавленной к ростовой среде исследуемых грибов, которая полностью подавляла рост, составляла 5 мл / 100 мл.Фунгицидное действие жидкости из культуры плесневых грибов на испытанные древесно-гниющие грибы оказалось определенно низким. Trametes versicolor (L.) Lloyd оказался наиболее чувствительным видом. Pleurotus cornucopiae (Paulet) Rolland продемонстрировал полную устойчивость к добавляемой в питательную среду жидкости, полученной из плесневых грибов. Бактериальная культуральная жидкость A. xylinum может быть подвергнута дальнейшему анализу как естественный биоцид для защиты древесины от древесных грибков.
Ключевые слова: фунгициды; Жидкая среда для посткультуры; Базидиомицеты
Контактная информация: Институт дерева и мебели Варшавского университета деревянных наук — SGGW, ул. Новурсыновска, 159, 02-776 Варшава, Польша;
* Автор для переписки: [email protected]
ВВЕДЕНИЕ
Долговечность и сохранность древесины, предназначенной для специального использования, могут быть гарантированы соответствующим выбором средств защиты и методов пропитки.Консерванты для древесины — это химические соединения, рыночная стоимость и использование которых регулируются ограничительными положениями Регламента ЕС 528/2012 о поставках и использовании биоцидных продуктов на рынке. Ограничительный закон о биоцидных средствах не позволяет размещать на рынке соединения с доказанной вредностью для человека, животных и окружающей среды. Изменения в биоцидном законе привели к отказу от многих эффективных пропиток, ранее использовавшихся для защиты древесины. В частности, продукты, содержащие соединения хрома и мышьяка, фенолы, соединения нефти и соединения фтора, были навсегда сняты с рынка.Текущая ситуация на рынке консервантов для древесины включает ограниченную группу активных веществ, в основном соединения меди, бор, четвертичные аммониевые соли, комплексы HDO, пропиконазол, тебуконазол и т. Д. . По данным Европейского химического агентства (ECHA 2019), разрешено использование биоцидных средств для пропитки древесины, содержащих 39 видов веществ. Список действующих веществ не является закрытым, поскольку Регламент ЕС 528/2012 дает возможность проводить научные исследования по выбору новых активных веществ с высокой фунгицидной эффективностью и гарантированным уровнем токсикологической и экотоксикологической безопасности.Принимая во внимание безопасность использования биоцидов, проводятся исследования для оценки фунгицидной активности веществ природного происхождения, таких как экстракты растений, алкалоиды, эфирные масла, а также веществ, продуцируемых микроорганизмами (Kundzewicz and Ważny 1994; Cofta и др. 2014; Адедеджи и др. 2017). Многие вещества природного происхождения действительно обладают фунгицидной активностью, что было подтверждено тестов in vitro (Barbero-López et al. 2018).
Исследования влияния катехинов, в частности 1,2-бензолдиола (катехола), 1,3,5-бензентриола и диметилтерефталата, на рост Schizophyllum commune Fr. были проведены Nandika et al. (2019). Эти исследователи подтвердили, что 12% -ная концентрация соединений эффективно подавляет развитие древесных грибков. Фунгицидные свойства экстрактов тика против грибков, вызывающих гниение белой и коричневой древесины, были предметом исследования Brocco et al. (2017). Авторы исследования отметили, что образцы древесины, пропитанные вакуумным методом экстрактами 20-летнего тика, устойчивы к процессам биодеградации, вызванным тестовыми грибами. Silveira et al. (2017) получил аналогичные положительные результаты при использовании дубильных веществ для защиты древесины акации от белых гниющих грибов . Вещества, полученные из древесины в качестве фунгицидов, были предметом исследования Salido et al. (2015), Alejo-Armijo et al. (2017) и Кадир и Хейл (2019).
Фунгицидные или фунгистатические свойства также приписываются определенным группам микроорганизмов и их метаболитов. Fidanza and Caneva (2019) сообщили, что выбранные виды Bacillus sp. и многочисленные плесневые грибы, принадлежащие к родам: Aspergillus , Penicillium , Candida , Fusarium или Trichoderma проявляют фунгицидную и бактерицидную активность против широкой группы микроорганизмов.В то же время данные, предоставленные ECHA, показывают, что такие микроорганизмы, как Bacillus amyloliquefaciens , Bacillus subtilis , Bacillus thuringiensis subsp. israelensis , штамм SA3A и серотип h24, штамм AM65-52 перечислены как активные вещества и разрешены для использования в биоцидных продуктах, предназначенных для дезинфекции в ветеринарии и для борьбы с насекомыми (ECHA 2019).
Анализ возможности использования метаболитов из культуры Trichoderma viride для биологической защиты древесины от разложения был проведен еще в начале 90-х годов Кундзевичем и Вани (1994).
В этом исследовании была предпринята попытка оценить действие фунгицидной среды после посева из культуры выбранных плесневых грибов: Trichoderma viride Pers., Alternaria alternata (Fr.) Keissl. и бактерии: Acetobacter xylinum против грибков, вызывающих гниение древесины. Выбор указанных микроорганизмов был продиктован следующими критериями: выбранные плесневые грибы демонстрируют высокую скорость роста и относительно устойчивы к консервантам древесины, что позволяет предположить, что они могут продуцировать метаболиты, которые защищают клетки грибов от токсичности биоцидов. Acetobacter xylinum является компонентом биопленки чайного гриба, которая производит многие химические вещества с антимикробной или антиоксидантной активностью, которые также могут быть протестированы как биоциды, действующие против разлагающих древесину микроорганизмов. Представленные результаты носят характер скрининговых исследований, целью которых является предварительное и приблизительное определение фунгицидной активности как потенциальных факторов, поддерживающих устойчивость биоматериалов, таких как древесина и древесные материалы, к грибкам.С точки зрения оценки эффективности биоцидов этот вид исследований важен, и, кроме того, он позволяет относительно быстро оценить влияние исследуемых веществ на развитие микроорганизмов. Исследование проводилось на средах, оказывающих все большее влияние на потенциальные биозащитные свойства. Предварительная оценка фунгицидной активности питательных сред, полученных при культивировании плесневых грибов и бактерий, позволила определить самую низкую концентрацию (МПК), полностью подавляющую рост тестируемых грибов, способных к гниению древесины.Полученные результаты являются основой для планирования дальнейших научно-исследовательских работ, направленных на улучшение биозащитных свойств различных материалов (дерево, древесные материалы) на основе использования факторов естественной устойчивости, полученных при культивировании микроорганизмов.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ
Материалы
Материалом, который использовали для оценки фунгицидных свойств, была посткультуральная жидкая среда, полученная из 14-дневной культуры плесневых грибов Trichoderma viride Pers., штамм A-102, Alternaria alternata (Fr.) Keissl., штамм A-166 и бактерии Acetobacter xylinum , штамм ATCC 23767. Плесневые грибы выращивали на жидкой мальтозной среде, содержащей 2,5% экстракта мальтозы (Biomaxima, Люблин, Польша). Бактерии выращивали на жидкой среде, содержащей 2,5% маннита (Pol-Aura, Забже, Польша), 0,3% пептона (Biomaxima, Люблин, Польша) и 0,5% дрожжевого экстракта (Biomaxima, Люблин, Польша). Культивирование микроорганизмов проводили в термостате в течение 14 дней в следующих условиях: плесневые грибы — 22 ° С, бактерии — 26 ° С.Относительная влажность на участке испытаний составляла 66% ± 2%. Для оценки фунгицидного эффекта использовали только жидкую посткультурную среду, и она не подвергалась модификации. Для этого жидкость отделяли от микроорганизмов с помощью бумажного фильтра. Затем, чтобы исключить присутствие микроорганизмов в приготовленной посткультуральной жидкой среде, ее стерилизовали методом шприцевого фильтра. Для удаления всех микробиологических структур использовали фильтры с диаметром пор 0,25 мкм (Nalge Company, Рочестер, Нью-Йорк, США).Приготовленную таким образом жидкость использовали в качестве исследовательского материала для оценки биоцидного эффекта. Оценка фунгицидных свойств посткультуральной жидкости из плесневых грибов и бактерий проводилась в отношении штаммов Basidiomycetes грибов, вызывающих глубокое разложение древесины: Trametes versicolor (L.) Lloyd, штамм 30, Coniophora puteana (Schumach. ) П. Карст. штамм EB 97 и Pleurotus cornucopiae (Paulet) Rolland (нет данных). Базальные культуры грибов выращивали на мальтозно-агаровой среде, содержащей 2.5% экстракт мальтозы (Biomaxima, Люблин, Польша) и 2,5% агар (Difco, Нью-Джерси, США). Штаммы грибов, использованные в исследовании, были получены из коллекции Департамента древесины и защиты древесины Варшавского университета естественных наук — SGGW в Варшаве.
Методы
Фунгицидные свойства жидкой среды после культивирования плесневых грибов и бактерий против базидиомицетов определяли путем определения процента ингибирования роста по отношению к росту контрольных грибов, i.е. , в контрольных культурах, не содержащих фунгицидов в среде. Стерилизованную среду после культивирования добавляли к стерильной среде, содержащей 2,5% мальтозы и 2,5% агара. Температура среды поддерживалась на уровне 42 ± 2 ° C. Жидкую среду из микробной культуры добавляли к мальтозно-агаровой среде в количестве 1, 5, 10, 15, 20 и 30 мл таким образом, чтобы конечный объем среды составлял 100 мл. После тщательного перемешивания содержимого около 10 мл среды добавляли в чашки Петри диаметром 90 мм, куда централизованно инокулировали исследуемые грибы.Размер посевного материала каждого гриба составлял 5 мм. Культивирование проводили при температуре и влажности 25 ° C и 66% ± 2% соответственно. Оценка влияния посткультуральной жидкой среды на рост тестируемых грибов проводилась путем измерения диаметра роста мицелия T. versicolor , C. puteana и P. направления. Измерения роста производились с интервалом 48 часов. Тесты завершали в день полного роста контрольной среды.Каждое исследование проводилось в трех экземплярах.
Стандарты испытаний
Для проверки статистических гипотез был использован дисперсионный анализ для единой классификации с использованием статистики Snedecor. Статистический вывод проводился для уровня значимости α = 0,05. В случае отклонения нулевой гипотезы следующим шагом было сравнение среднего множественного критерия сравнения — теста Тьюки. Статистическая гипотеза была следующей:
H0: Ø 0,5 = Ø 1 = Ø 5 = Ø 10 = Ø 15 = Ø 20 = Ø 30 = Ø K
h2: Есть как минимум два значительных различия.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Анализ результатов испытаний показал, что посткультуральная жидкая среда, полученная при культивировании плесневых грибов T. viride и A. alternata , подавляла рост T. versicolor , вызывающий гниение белой древесины, но только на определенном уровне концентрации. В случае низкой доли посткультуральной жидкой среды (1 мл / 100 мл и 5 мл / 100 мл) в питательной среде T. versicolor не наблюдалось различий в диаметре роста по сравнению с контрольными условиями на шестой день наблюдения. .Четко видимая зона ингибирования роста грибов появилась в тесте, в котором плотность посткультуральной среды в питательной среде составляла 10 мл / 100 мл (Таблица 1). В отличие от T. versicolor , гриб, вызывающий бурую гниль древесины — C. puteana , оказался более устойчивым к фунгицидному действию посткультуральной жидкой среды, чем T. versicolor , о чем свидетельствует диаметр гриба. рост грибка на среде (Таблица 2). Тем не менее, было отмечено, что фунгицидные эффекты проявлялись уже при самых низких концентрациях послевкультурной жидкости в среде для выращивания.Анализировали результаты, полученные в последний день измерения, когда в контрольном образце был достигнут полный рост мицелия среды. Было обнаружено, что ингибирующее действие на рост грибка C. puteana ингредиентами, содержащимися в посткультуральной жидкой среде от плесневых грибов, проявляется в тесте, в котором доля посткультуральной среды была наименьшей. Было обнаружено полное отсутствие активности по ингибированию роста по отношению к тестируемому грибку P. cornucopiae (таблица 3).В последний день наблюдения не наблюдали значимых различий в диаметре роста мицелия среды в контрольных условиях и во всех вариантах исследования, содержащих различные доли сред из культур T. viride и A. alternata . Брюс и Хайли (1991) наблюдали очень похожий эффект воздействия T. viride на рост T. versicolor , что может указывать на то, что указанный гриб, вызывающий гниение белой древесины, относительно устойчив к потенциальному фунгицидному действию метаболиты синтезируются т.Вирид . Низкая биоцидная активность посткультуральной среды T. viride в отношении роста C. puteana не коррелирует с результатами других авторов, которые на клеточном уровне получили сильный лизис клеток C. puteana за счет действие метаболитов, полученных из культуры плесневых грибов (de Vries and Wessels, 1973). Гораздо более сильное действие фунгицида было получено при исследовании влияния среды, полученной из бактериальной культуры A. xylinum , на ростовую активность исследуемых грибов.Добавление 10% бактериальной культуральной среды к среде для роста грибов практически полностью подавляло рост T. versicolor . В последний день размножения наблюдался небольшой рост грибка. В случае влияния посткультуральной жидкой среды A. xylinum на рост P. cornucopiae и C. puteana эффективная фунгицидная активность была продемонстрирована для концентраций 5% и выше. Фунгицидные свойства A.xylinum против грибков, вызывающих гниение древесины, не подвергались анализу, в отличие от других организмов, принадлежащих к Actinobacteria , таких как Streptomyces exfoliatus или бактерий Pseudomonas spp., использование которых для защиты древесины было оценено другими исследователями (Susi et al. 2011; Sharma et al. 2016).
Таблица 1. Диаметр роста T. versicolor на среде, содержащей жидкую среду после культивирования с T.viride, A. alternata и A. xylinum Культура
Таблица 2. Диаметр роста C. puteana на среде, содержащей жидкую среду после культивирования из T. viride, A. alternata и A. xylinum Культура
Таблица 3. Диаметр роста P. cornucopiae на среде, содержащей жидкую среду после культивирования из T. viride, A. alternata и A.xylinum Культура
Процентная скорость роста грибов на средах, содержащих различные пропорции посткультуральной жидкой среды, полученной при культивировании плесневых грибов и бактерий, представлена в Таблице 4 и на Рис. 1, 2 и 3. В исследованиях, посвященных фунгицидному действию посткультуральной жидкой среды из плесневых грибов на гриб T. versicolor , были обнаружены статистически значимые различия между контролем и средой, содержащей 5% и более высокую концентрацию. посткультурной жидкой среды.В случае гриба C. puteana статистически значимые различия в росте по сравнению с контрольным образцом были обнаружены на среде, содержащей 15% и более высокую концентрацию посткультуральной среды. Аналогичный анализ действия экстрактов грибов на рост C. puteana был проведен Yildiz et al. (2019). Фунгицидное действие экстрактов грибов на многие сапрофитные и паразитарные грибы было изучено Океке и др. . (1992), Судирман и др. .(1992) и Хайли (1997). Эта активность была связана с производством метаболитов с антибиотическими функциями многими грибами, которые подавляют развитие других организмов (Ян и др. , 1993).
Таблица 4. Процент роста грибов на среде, содержащей посткультурную жидкую среду из плесневых грибов и бактерий
Ни одна из примененных концентраций жидкой среды после культивирования из культуры плесневых грибов не достигла полного ингибирования роста тестируемых грибов.Вероятно, что, несмотря на использование высоких концентраций посткультуральной среды, доля активных веществ с фунгицидной активностью не должна быть высокой. Было продемонстрировано, что многие факторы могут влиять на биоцидную эффективность. Как биодоступность данных веществ, так и метод и условия экстракции могут повлиять на полученные результаты токсичности (Jo et al .2014).
В случае оценки фунгицидного действия посткультуральной жидкой среды, полученной из культуры A.xylinum по отношению к тестируемым грибам, статистически значимые различия между контролем и тестируемыми образцами были обнаружены при гораздо более низких концентрациях, чем это было в случае оценки эффективности питательной среды от плесневых грибов.
Рис. 1. Относительный процент роста T. versicolor на среде, содержащей посткультуральную жидкую среду из культуры A. xylinum
Фиг.2. Относительный процент роста C. puteana на среде, содержащей посткультуральную жидкую среду из культуры T. viride
Рис. 3. Относительный процент роста P. cornucopiae на среде, содержащей посткультуральную жидкую среду из культуры A. alternata
ВЫВОДЫ
- Результаты этого исследования показали, что тестируемые грибы проявляли различные уровни чувствительности к токсическим эффектам среды из микробной культуры.
- Посткультуральная среда, полученная из культивирования плесневых грибов A. alternata и T. viride , не вызывала столь выраженного ингибирования роста грибов, как это было в эксперименте с использованием жидкой среды из бактериальной культуры.
- P. cornucopiae оказался видом, нечувствительным к токсическому воздействию посткультурной среды от плесневых грибов.
- Посткультуральная среда из культур грибов A. alternata и T. viride не показала явной фунгицидной активности против тестируемых грибов, вызывающих глубокую гниль древесины.
- Посткультуральная среда из бактерий A. xylinum показала сильную фунгицидную активность против тестируемых древесных грибов, что дает основание для ее дальнейшего использования в тестах для определения биозащитных показателей в практических условиях использования в древесине и древесине. материалы.
БЛАГОДАРНОСТИ
Авторы благодарят Варшавский университет естественных наук — SGGW за финансовую поддержку.
ССЫЛКИ
Адедеджи, Г.А., Огунсанво, О. Ю., Элуфиой, Т. О. (2017). «Количественная оценка фитохимических и биоцидных действий Lawsonia inermis Linn. экстракты против древесных термитов и грибов », Interntional Biodeterioration and Biodegradation 116 (1), 155-162. DOI: 10.1016 / j.ibiod.2016.10.026
Алехо-Армихо, А., Глибота, Н., Фриас, М. П., Альтарехос, Дж., Альвес, А. Г., Ортега-Моренте, Э. и Салидо, С. (2017). «Антимикробная и антибиотикопленочная активность процианидинов, экстрагированных из лаврового дерева, в отношении ряда микроорганизмов пищевого происхождения», International Journal of Food Science and Technology 52 (11), 679-686.DOI: 10.1111 / ijfs.13321
Барберо-Лопес, А., Очоа-Ретамеро, А., Лопес-Гомес, Ю., Вильппо, Т., Веняляйнен, М., Лавола, А., Юлкунен-Тийтто, Р., и Хаапала, А. ( 2018). «Активность использованной корицы молотого кофе против дереворазрушающих грибов in vitro», BioResources 13 (3), 6555-6564. DOI: 10.15376 / biores.13.3.6555-6564
Brocco, V.F., Peas, J. B., Da Costa, L.G., Brazolin, S., and Arantes, M. D. Ch. (2017). «Потенциал экстрактов сердцевины тикового дерева в качестве натурального консерванта», журнал Journal of Cleaner Production 142 (4), 2093-2099.DOI: 10.1016 / j.jclepro.2016.11.074
Брюс А. и Хайли Т. Л. (1991). «Контроль роста древесных гниющих базидиомицетов с помощью Trichoderma spp. и другие потенциально антагонистические грибы », Forest Products Journal 41 (2), 63-67.
Cofta, G., Wiśniewska, P. W., and Przybył, A. K. (2014). «Środki ochrony drewna — Alkaloidy», Aura Ochrona Środowiska 6 (14), 23-24.
де Фриз, О. М. Х., и Весселс, Дж. Г. Х. (1973). «Эффективность препарата литического фермента из Trichoderma viride в высвобождении сферопластов из грибов, в частности базидиомицетов», Антони ван Левенгук 39 (3), 397-400.
Kundzewicz, A.W., and Ważny, J. (1994). «Biologiczna metoda ochrony drewna — Wyniki wstępne», в: Ochrona Drewna — XVII Sympozjum, Wyd. SGGW , Варшава, Польша, стр. 57-63.
Фиданза, М. Р., Канева, Г. (2019). «Природные биоциды для сохранения каменного культурного наследия: обзор», Journal of Cultural Heritage 38 (4), 271-286. DOI: 10.1016 / j.culher.2019.01.005
Хайли, Т. Л. (1997). «Контроль разложения древесины с помощью Trichoderm a ( Gliocladium ) virens I.Антагонистические свойства », Material und Organismen 31 (2), 79-90.
Европейское химическое агентство (ECHA) (2019). «Информация о биоцидах» (https://echa.europa.eu/pl/information-on-chemicals/biocidal-active-substances), по состоянию на 10 ноября 2019 г.
Джо, В. С., Хоссейн, М., и Парк, С. С. (2014). «Токсикологические профили ядовитых, съедобных и лекарственных грибов», Mycobiology 42 (3), 215-220. DOI: 10.5941 / MYCO.2014.42.3.215
Кадир, Р., и Хейл, М. (2019). «Биоцидный потенциал экстрактивных веществ четырех малазийских древесных пород против подземных термитов и грибков гниения древесины», European Journal of Wood and Wood Products 77 (6), 147-155. DOI: 10.1007 / s00107-018-1361-5
Нандика Д., Шьямсу К., Аринана А., Кусумавардхани Д. Т. и Фитриана Ю. (2019). «Биоактивность катехина из гамбира (Uncaria gambir Roxb.) Против дереворазрушающих грибов», BioResources 14 (3), 5646-5656. DOI: 10.15376 / biores.14.3.5646-5656.
Океке Б., Стейман Р. и Бенуа Дж. У. (1992). «Производство фунгицидов из метаболитов грибов: новая перспектива в биологической борьбе с Pyricularis oryzae », Mededelingen van de Faculteit Landbouwwetenschappen, Rijksuniversiteit Gent 57, 403-410.
Регламент (ЕС) № 528/2012 Европейского парламента и совета от 22 мая 2012 г. о выпуске на рынок и использовании биоцидных продуктов.
Салидо, С., Перес-Бонилья, М., Адамс, Р. П., и Альтарехос, Дж. (2015). «Фенольные компоненты и антиоксидантная активность экстрактов древесины из 10 основных испанских сортов оливок», Журнал сельскохозяйственной и пищевой химии 63 (29), 6493-6500. DOI: 10.1021 / acs.jafc.5b02979
Шарма П., Чоудхари Б., Нагпуре А. и Гупта Р. К. (2016). «Противогрибковый потенциал изолята Streptomyces exfoliatus MT9 актиномицетов против древесных грибов», журнал Journal of Environmental Biology 37 (6), 1231-1237.DOI: 10.4103 / 2231-4040.111528.
Сильвейра, А. Г. Д., Сантини, Э. Дж., Кульчинский, С. М., Тревизан, Р., Вастовски, А. Д., Гатто, Д. А. (2017). «Потенциал дубильного экстракта в качестве натурального консерванта древесины Acacia mearnsii », Анналы Бразильской академии наук 89 (4), 3031-3038. DOI: 10.1590 / 0001-3765201720170485
Судирман, Л. И., Хуссейни, А. И., Ле Февр, Г., Кьер, Э. и Боттон, Б. (1992). «Скрининг около базидиомицетов для биологической борьбы с Rigidoporus lignosus , паразитом каучукового дерева Hevea brasiliensis », Mycological Research 96 (8), 621-625.DOI: 10.1016 / S0953-7562 (09) 80486-3
Susi, P., Aktuganov, G., Himanen, J., and Korpela T. (2011). «Биологический контроль гниения древесины против грибковой инфекции», , журнал экологического менеджмента, , 92 (7), 1681-1689. DOI: 10.1016 / j.jenvman.2011.03.004
Янг Д., Плант Ф., Бернье Л., Пише Й., Дессуро М., Лямм Г. и Уэллетт Г. (1993). «Оценка грибкового антагониста Phaeotheca dimorphospora для биологической борьбы с болезнями деревьев», Canadian Journal of Botany 71 (3), 426-433.DOI: 10.1139 / b93-047
Йылдыз, С., Йылдыз, Ю. C., и Yilmaz, A. (2019). «Устойчивость к гниению древесины сосны обыкновенной, пропитанной биозащитным экстрактом Agaricus campestris », Мадерас. Ciencia y Tecnología 21 (3), 405-412. DOI: 10.4067 / S0718-221X20100312
Статья подана: 29 ноября 2019 г .; Рецензирование завершено: 1 февраля 2020 г .; Принятые изменения: 10 февраля 2020 г .; Опубликовано: 12 февраля 2020 г.