Манту через год после бцж: Проба Манту в вопросах и ответах

Содержание

М | Медицинский центр «Сердолик»

Специфическая профилактика (Вакцинация и ревакцинация БЦЖ)

Вакцина БЦЖ была получена французскими учеными Calmette и Guerin в 1919 году из культуры МБТ бычьего типа, утратившей свои вирулентные свойства и сохранившей полностью все иммуногенные свойства, присущие МБТ.

Препараты вакцины БЦЖ и БЦЖ-М представляют собой живые микобактерии вакцинного штамма БЦЖ, лиофильно высушенные 1,5% растворе глютамината натрия, имеют вид белой высушенной массы.

Одна ампула вакцины БЦЖ – содержит 0,1 мг вакцины (20 доз по 0,05 мг). Одна ампула вакцины БЦЖ-М содержит 0,5 мг вакцины, что составляет 20 доз, каждая по 0,025 мг препарата. Это препарат пониженной антигенной нагрузки и используется для щадящей иммунизации.

Живые микобактерии штамма БЦЖ, размножаясь в организме привитого, приводят к развитию длительного специфического иммунитета к туберкулезу. Вакцины БЦЖ и БЦЖ-М используются для активной специфической профилактики туберкулеза.

Вакцинация БЦЖ

Первичную вакцинацию осуществляют здоровым новорожденным детям на 4-7 день жизни в отдельно отведенной комнате. Вводят вакцину строго внутрикожно, в верхнюю треть левого плеча.
Дети, не привитые в родильном отделении должны прививаться в детских поликлиниках в течение 2-х месяцев вакциной БЦЖ, без предварительной туберкулинодиагностики. Детям старше 2-х месячного возраста, перед вакцинацией необходимо проводить пробу Манту.
Вакцинируются дети с отрицательной реакцией на туберкулин.
Дети, не привитые в родильном отделении по медицинским противопоказаниям, должны прививаться на педиатрическом участке вакциной БЦЖ-М.
Интервал между пробой Манту и вакцинацией должен быть не менее 3 дней и не более 2-х недель.
Выписку новорожденного из родильного отделения можно проводить при условии обязательного обследования на туберкулез отца, родственников, проживающих в одной квартире.
При отсутствии рубца на прививку БЦЖ (БЦЖ-М) проба Манту ставится один раз в 6 месяцев и при отрицательной реакции на туберкулин дети прививаются в возрасте 2-х лет. При наличии некачественного рубца к году жизни дети повторно прививаются БЦЖ-М в возрасте 2-х лет при отрицательной пробе Манту.
С целью раннего выявления осложнений после прививки БЦЖ врачам педиатрам необходимо наблюдать прививочную реакцию в 1,3,6,9,12 месяцев.
Вакцинация (ревакцинация) БЦЖ проводится через 4 недели после других профилактических прививок, а после проведенной вакцинации БЦЖ другие профилактические прививки проводятся не ранее, чем через 2 месяца, то есть после заживления местной прививочной реакции.

При качественно проведенной вакцинации у 90-95% вакцинированных новорожденных к 4 месяцам жизни должен сформироваться рубчик размером от 5 до 10 мм.

Противопоказания к вакцинации новорожденных

Временные:

Сепсис новорожденных (допустимость прививки через 6 месяцев)
Внутриутробная инфекция (через 1 месяц после выздоровления)
Гнойные кожные заболевания (через 2 месяц после выздоровления)
Острые респираторные заболевания (через 1 месяц после выздоровления)
Гемолитическая болезнь новорожденных среднетяжелая и тяжелая формы (через 6 месяцев при отсутствии анемии)
Тяжелые повреждения ЦНС с выраженной неврологической симптоматикой (через 3 месяца после осмотра невропатологом)
Недоношенные дети 2-4 ст. (при достижении веса).

Постоянный медицинский отвод:

Врожденные ферментопатии
Иммунодефицитные состояния
Генерализованная БЦЖ – инфекция у других детей в семье
ВИЧ – инфекция у матери.

Ревакцинация БЦЖ

Ревакцинации подлежат здоровые дети и подростки в декретированных возрастах, имеющих отрицательную пробу Манту.
1-я ревакцинация детей (вакцинированных при рождении) производится в 6-7 лет (учащиеся 1-х классов).

2-я ревакцинация – в возрасте 14-15 лет (учащиеся 9-х классов), а также подросткам средних специальных учебных заведений (ПТУ, техникум) на первом году обучения. В неблагоприятных по эпидемиологии туберкулеза регионах проводится ревакцинация в междекретированых возрастах детям и подросткам, у которых отсутствуют прививочные знаки, через 2 года после вакцинации и 1 год после ревакцинации. В эти же сроки осуществляется ревакцинация детей и подростков, имеющих в декретированных возрастах ременные медицинские отводы от прививки.

Ревакцинация взрослых (18-30 лет) осуществляется в организованных коллективах. Сроки ревакцинации определяются с учетом эпидемиологической ситуации по туберкулезу в соответствующем регионе. Ревакцинация взрослых проводится при отрицательной и сомнительной реакции Манту.

Противопоказания к ревакцинации БЦЖ

Постоянный медицинский отвод:

Инфицированность МБТ или перенесенный туберкулез
Положительная или сомнительная реакция Манту
Осложненные реакции на предыдущее введение вакцины БЦЖ или БЦЖ-М
Заболевания крови
Злокачественные новообразования
Иммунодефицитные состояния. Лечение иммунодепрессантами
Беременность (все сроки).

Временные:

Аллергические болезни – кожные и респираторные (в стадии обострения) (допустимость прививки после выздоровления или достижения ремиссии по заключению специалиста)
Острые заболевания, включая период реконвалесценции, хронические заболевания в стадии обострения или декомпенсации (через 1 месяц после выздоровления, ремиссии).

Bolnica

Туберкулинодиагностика (Проба Манту)

Туберкулиновая проба Манту, в просторечье “пуговка” — это специфический диагностический тест (не путать с прививкой!), применяемый при массовом обследовании населения на туберкулез.

Для проведения туберкулиновых проб используют туберкулин, который по своему составу является сложным соединением. Он не содержит живых или убитых микобактерий туберкулеза, а только продукты их жизнедеятельности, элементы микробной клетки и часть среды, на которой росли микобактерии туберкулеза.

На введение туберкулина возникает ответная аллергическая реакция (положительная туберкулиновая проба) у привитых вакциной БЦЖ против туберкулеза (поствакцинальная аллергия) и у инфицированных микобактериями туберкулеза (инфекционная аллергия). В обоих случаях в организме обследуемого находятся туберкулезные палочки. Только в первом случае они внесены с вакциной BCG и поддерживают иммунитет к туберкулезу, а в другом попали в организм из окружающей среды и являются вирулентными, т. е. в определенных условиях могут вызвать заболевание.

Проба Манту не является прививкой, это метод выявления заболеваемости туберкулезом. Проводится ежегодно, а некоторым категориям детей (хронические заболевания легких, почек, сахарный диабет, лечение гормонами, ВИЧ-инфекция и др.) 2 раза в год. Проба Манту абсолютно безвредна как для здоровых, так и для больных детей.

Противопоказания к пробе Манту:

Кожные, острые и хронические инфекционные и соматические заболевания в периоде обострения;

Аллергические состояния, ревматизм в активной фазе, бронхиальная астма в стадии обострения;

В детских коллективах на карантинном режиме;

1 месяц после прививок.

Пробу Манту ставят через 1 месяц после исчезновения клинических симптомов или сразу после снятия карантина.

Учет результатов через 72 часа:

отрицательная проба – при полном отсутствии изменений на коже, либо «уколочная» реакция;

сомнительная – гиперемия (пятно) любого размера или папула (бугорок) 2 — 4 мм;

положительная – папула (бугорок) 5 мм и более;

гиперергическая – папула 15 мм и более и/или пузырьковая сыпь, воспаление лимфатических узлов при любом размере папулы.

В норме в течение 2-4 лет после прививки БЦЖ проба Манту положительная, это так называемая поствакцинальная аллергия, размер папулы к 4 годам уменьшается и становится отрицательным. Если в течение года ребенок заражается туберкулезом, то размер папулы резко увеличивается и она становится положительной. Такие дети нуждаются в срочном дообследовании и консультации в противотуберкулезном диспансере. Направление дает участковый педиатр или врач детского учреждения.

Ученые опровергли все мифы о туберкулезе

https://ria.ru/20190301/1551452911.html

Ученые опровергли все мифы о туберкулезе

Ученые опровергли все мифы о туберкулезе — РИА Новости, 01.03.2019

Ученые опровергли все мифы о туберкулезе

В России большинство населения контактировало с возбудителем туберкулеза. А самый распространенный в стране штамм устойчив практически ко всем… РИА Новости, 01.03.2019

2019-03-01T08:00

2019-03-01T13:25

наука

туберкулез

первый мгму имени сеченова

/html/head/meta[@name=’og:title’]/@content

/html/head/meta[@name=’og:description’]/@content

https://cdn25. img.ria.ru/images/155145/18/1551451815_0:154:3030:1858_1920x0_80_0_0_7c34da32f65d0f821488b26aa41f4e80.jpg

МОСКВА, 1 мар — РИА Новости, Альфия Еникеева. В России большинство населения контактировало с возбудителем туберкулеза. А самый распространенный в стране штамм устойчив практически ко всем противотуберкулезным препаратам. Почему важно вакцинировать детей БЦЖ и не отказываться от проб Манту — в материале РИА Новости. Контактируют, но не заболеваютКаждый год в мире туберкулезом заболевают около десяти миллионов человек. Примерно полтора миллиона умирают — больше, чем от других инфекций. И это несмотря на то, что с 2000-го удалось предотвратить 54 миллиона смертей от этой болезни, уверяют эксперты ВОЗ. «Россия, к сожалению, входит в число стран с наибольшим уровнем бремени туберкулеза. У нас более 80 процентов взрослого населения с учетом положительной реакции на кожные иммунологические тесты встречалось с туберкулезом. Что касается детей, то у них возможная положительная реакция на пробу Манту обусловлена как ответом на прививку БЦЖ — ее делают в роддоме и повторно в возрасте 6-7 лет — так и инфицированием микобактериями. Они могут попасть в организм ребенка при встрече с больным туберкулезом», — рассказал РИА Новости заведующий кафедрой фтизиопульмонологии и торакальной хирургии Первого МГМУ имени Сеченова профессор Дмитрий Гиллер.Бацилла Кальметта — Герена, или БЦЖ — единственная доступная сегодня противотуберкулезная вакцина. Она содержит штамм ослабленной туберкулезной палочки (Mycobacterium bovis), которая практически утратила вирулентность для человека. То есть заразить она не сможет, а вот защитить при встрече с возбудителем — вполне. Согласно различным научным исследованиям, эффективность этой прививки — 60-80 процентов. Ее действенность зависит от возраста человека: наибольшую защиту она обеспечивает новорожденным. «БЦЖ не столько предотвращает — хотя привитые, конечно, болеют намного реже, чем непривитые — сколько помогает. Вакцина облегчает болезнь, если она возникнет. У привитых практически не развиваются молниеносные смертельные формы туберкулеза. А так как Россия относится к странам с высоким уровнем заболеваемости, эта прививка — и по мнению ВОЗ, и по мнению наших ученых, — имеет очень большое значение для защиты прежде всего детей от этого тяжелого заболевания «, — подчеркивает Дмитрий Гиллер. Профессор не отрицает, что после БЦЖ бывают осложнения, например, воспаление лимфатических узлов или большой рубец на месте прививки, но «на всю Россию это доли процента». В большинстве же случаев вакцина предохраняет от болезни. Пора ли отменять МантуЕжегодно всех российских детей и подростков проверяют на туберкулез дополнительно. Им вводят внутрикожно туберкулин — смесь белков, углеводов и липидов, полученных экстракцией из клеток возбудителей туберкулеза Mycobacterium tuberculosis и Mycobacterium bovis, — и по реакции организма определяют, есть ли у них инфекция. Дело в том, что вещества, входящие в состав туберкулина, играют роль антигенов, иными словами провоцируют реакцию иммунной системы человека. Именно так и проводится знаменитая проба Манту.»Манту — это не прививка. Это своего рода кожный иммунологический тест. И он очень информативен у детей. Единственное, в первые пять лет после прививки вакциной БЦЖ эта проба может быть положительной — как ответ на прививку. Она не отличает болезнетворные микробы от прививочных. Поэтому если у ребенка после введения туберкулина покраснение на месте постановки пробы, это не значит, что он точно болен туберкулезом. Это может быть аллергической реакцией на введение препарата. В таких случаях проводят диагностику «Диаскинтестом», — уточнил Дмитрий Гиллер.»Диаскинтест» — разработка российских ученых. Проводится он примерно так же, как Манту, — внутрикожно. В отличие от туберкулина, сделанного из микобактерий патогенного штамма, аллерген «Диаскинтеста» содержит рекомбинантный белок, антигены которого есть в вирулентном штамме. Они появляются в период размножения микобактерий туберкулеза и отсутствуют в вакцинном штамме БЦЖ. Именно поэтому препарат умеет отличать патогенный штамм возбудителя от прививочного.По данным сотрудников Московского городского научно-практического центра борьбы с туберкулезом департамента здравоохранения города Москвы, «Диаскинтест», в отличие от пробы Манту, никогда не вызывает ложноположительной реакции у здоровых детей, привитых в прошлом БЦЖ. «Сейчас среди педиатров идет серьезная дискуссия, стоит ли заменить пробу Манту «Диаскинтестом». Дело в том, что оба эти метода несут примерно одну и ту же информацию. «Диаскинтест», на мой взгляд, более удобный. Он не вызывает аллергию на прививочный штамм микобактерий, а проба Манту дает реакцию организма, в том числе и на вакцину. Но для того чтобы тест дал положительный ответ, должно пройти какое-то время. То есть он не покажет, что ребенок болеет, до тех пор, пока не накопится достаточное количество болезнетворных бактерий. А вот проба Манту способна определить состояние, когда болезни еще нет, но ребенок имеет высокий шанс заболеть или уже болен, но это начало болезни. Поэтому лично я считаю, что оба теста для детей надо сохранить, каждый из них имеет свои плюсы и минусы, а вместе несут более полную информацию», — отметил профессор Гиллер. Выход естьГлавная проблема России в борьбе с туберкулезом — это штаммы его возбудителей, распространенные в нашей стране. Как выяснили отечественные исследователи, более половины обнаруженных у нас штаммов принадлежат к линии Beijing B0/W148. Ее представители отличаются высокой контагиозностью (то есть легко передаются) и высокой устойчивостью к большинству противотуберкулезных препаратов. Кроме того, эти бактерии хорошо выживают в человеческих макрофагах (иммунных клетках, поглощающих патогены). «По прошлогоднему отчету ВОЗ, во всем мире растет число лекарственно устойчивых форм туберкулеза. И в России — самый большой процент распространенности лекарственно-устойчивого туберкулеза на долю населения. И широкая устойчивость — грубо говоря, почти ко всему. В прошлом году во всех странах мира таких больных было чуть более восьми тысяч. Из них три с половиной тысячи проживали в России. Такого процента нет больше нигде. Вдобавок это сопряжено с очень низкой долей выздоровевших», — рассказал Дмитрий Гиллер.Согласно отчету ВОЗ, эффективность лечения туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью (к двум основным препаратам — рифампицину и изониазиду) оценивается в 55 процентов, с широкой лекарственной устойчивостью — в 28 процентов. Риск смерти при развитии туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью в мире по данным ВОЗ превышает 40 процентов.Чтобы помочь пациентам с этими формами заболевания, исследователи из Университета Джона Хопкинса предлагают синтезировать специфичные в отношении микобактерий антибиотики. Ученые уже получили кристаллы ДНК-гиразы микобактерий (Mycobacterium tuberculosis) в комплексе с ДНК и различными фторхинолонами. Предполагается, что эти данные можно будет использовать для создания противотуберкулезных препаратов.Российские исследователи продвинулись дальше. По словам профессора Гиллера, в течение последних семи лет ему с коллегами неоднократно удавалось вылечить пациентов с лекарственно-устойчивыми формами туберкулеза.»Туберкулез, не поддающийся терапии лекарствами, можно вылечить хирургическими методами. Свыше 95 процентов пациентов, прошедших лечение у нас в клинике фтизиопульмонологии Первого МГМУ до 2017 года (сейчас она передана Минздраву. — Прим. ред.) выздоровели и через пять лет были трудоспособны. То есть с применением хирургии эти самые опасные лекарственно- устойчивые формы туберкулеза излечимы. Но, конечно, лучше до этого не доводить. Поэтому новорожденным необходимо проводить прививки вакциной БЦЖ, детям и подросткам ежегодно проводить кожные иммунологические тесты с применением пробы Манту и/или «Диаскинтеста», а взрослым — хотя бы раз в год делать флюорографию. Это все значительно снижает риски пострадать от туберкулеза», — подчеркнул эксперт.

https://ria.ru/20181023/1531238651.html

https://ria.ru/20180607/1522231510.html

https://ria.ru/20170127/1486617577.html

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

2019

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

Новости

ru-RU

https://ria.ru/docs/about/copyright. html

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

https://cdn21.img.ria.ru/images/155145/18/1551451815_174:0:2857:2012_1920x0_80_0_0_a4ab16fa10abc8ccc2821f06d4424ad2.jpg

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

туберкулез, первый мгму имени сеченова

МОСКВА, 1 мар — РИА Новости, Альфия Еникеева. В России большинство населения контактировало с возбудителем туберкулеза. А самый распространенный в стране штамм устойчив практически ко всем противотуберкулезным препаратам. Почему важно вакцинировать детей БЦЖ и не отказываться от проб Манту — в материале РИА Новости.

Контактируют, но не заболевают

Каждый год в мире туберкулезом заболевают около десяти миллионов человек. Примерно полтора миллиона умирают — больше, чем от других инфекций. И это несмотря на то, что с 2000-го удалось предотвратить 54 миллиона смертей от этой болезни, уверяют эксперты ВОЗ.

«Россия, к сожалению, входит в число стран с наибольшим уровнем бремени туберкулеза. У нас более 80 процентов взрослого населения с учетом положительной реакции на кожные иммунологические тесты встречалось с туберкулезом. Что касается детей, то у них возможная положительная реакция на пробу Манту обусловлена как ответом на прививку БЦЖ — ее делают в роддоме и повторно в возрасте 6-7 лет — так и инфицированием микобактериями. Они могут попасть в организм ребенка при встрече с больным туберкулезом», — рассказал РИА Новости заведующий кафедрой фтизиопульмонологии и торакальной хирургии Первого МГМУ имени Сеченова профессор Дмитрий Гиллер.

Бацилла Кальметта — Герена, или БЦЖ — единственная доступная сегодня противотуберкулезная вакцина. Она содержит штамм ослабленной туберкулезной палочки (Mycobacterium bovis), которая практически утратила вирулентность для человека. То есть заразить она не сможет, а вот защитить при встрече с возбудителем — вполне.

Согласно различным научным исследованиям, эффективность этой прививки — 60-80 процентов. Ее действенность зависит от возраста человека: наибольшую защиту она обеспечивает новорожденным.

23 октября 2018, 03:14НаукаРоссийские ученые создали прибор для ранней диагностики рака и туберкулеза

«БЦЖ не столько предотвращает — хотя привитые, конечно, болеют намного реже, чем непривитые — сколько помогает. Вакцина облегчает болезнь, если она возникнет. У привитых практически не развиваются молниеносные смертельные формы туберкулеза. А так как Россия относится к странам с высоким уровнем заболеваемости, эта прививка — и по мнению ВОЗ, и по мнению наших ученых, — имеет очень большое значение для защиты прежде всего детей от этого тяжелого заболевания «, — подчеркивает Дмитрий Гиллер.

Профессор не отрицает, что после БЦЖ бывают осложнения, например, воспаление лимфатических узлов или большой рубец на месте прививки, но «на всю Россию это доли процента». В большинстве же случаев вакцина предохраняет от болезни.

Пора ли отменять Манту

Ежегодно всех российских детей и подростков проверяют на туберкулез дополнительно. Им вводят внутрикожно туберкулин — смесь белков, углеводов и липидов, полученных экстракцией из клеток возбудителей туберкулеза Mycobacterium tuberculosis и Mycobacterium bovis, — и по реакции организма определяют, есть ли у них инфекция. Дело в том, что вещества, входящие в состав туберкулина, играют роль антигенов, иными словами провоцируют реакцию иммунной системы человека. Именно так и проводится знаменитая проба Манту.

«Манту — это не прививка. Это своего рода кожный иммунологический тест. И он очень информативен у детей. Единственное, в первые пять лет после прививки вакциной БЦЖ эта проба может быть положительной — как ответ на прививку. Она не отличает болезнетворные микробы от прививочных. Поэтому если у ребенка после введения туберкулина покраснение на месте постановки пробы, это не значит, что он точно болен туберкулезом. Это может быть аллергической реакцией на введение препарата. В таких случаях проводят диагностику «Диаскинтестом», — уточнил Дмитрий Гиллер.

«Диаскинтест» — разработка российских ученых. Проводится он примерно так же, как Манту, — внутрикожно. В отличие от туберкулина, сделанного из микобактерий патогенного штамма, аллерген «Диаскинтеста» содержит рекомбинантный белок, антигены которого есть в вирулентном штамме. Они появляются в период размножения микобактерий туберкулеза и отсутствуют в вакцинном штамме БЦЖ. Именно поэтому препарат умеет отличать патогенный штамм возбудителя от прививочного.

По данным сотрудников Московского городского научно-практического центра борьбы с туберкулезом департамента здравоохранения города Москвы, «Диаскинтест», в отличие от пробы Манту, никогда не вызывает ложноположительной реакции у здоровых детей, привитых в прошлом БЦЖ.

«Сейчас среди педиатров идет серьезная дискуссия, стоит ли заменить пробу Манту «Диаскинтестом». Дело в том, что оба эти метода несут примерно одну и ту же информацию. «Диаскинтест», на мой взгляд, более удобный. Он не вызывает аллергию на прививочный штамм микобактерий, а проба Манту дает реакцию организма, в том числе и на вакцину. Но для того чтобы тест дал положительный ответ, должно пройти какое-то время. То есть он не покажет, что ребенок болеет, до тех пор, пока не накопится достаточное количество болезнетворных бактерий. А вот проба Манту способна определить состояние, когда болезни еще нет, но ребенок имеет высокий шанс заболеть или уже болен, но это начало болезни. Поэтому лично я считаю, что оба теста для детей надо сохранить, каждый из них имеет свои плюсы и минусы, а вместе несут более полную информацию», — отметил профессор Гиллер.

7 июня 2018, 11:05НаукаБиологи из России создали уникальную систему диагностики туберкулеза

Выход есть

Главная проблема России в борьбе с туберкулезом — это штаммы его возбудителей, распространенные в нашей стране. Как выяснили отечественные исследователи, более половины обнаруженных у нас штаммов принадлежат к линии Beijing B0/W148. Ее представители отличаются высокой контагиозностью (то есть легко передаются) и высокой устойчивостью к большинству противотуберкулезных препаратов. Кроме того, эти бактерии хорошо выживают в человеческих макрофагах (иммунных клетках, поглощающих патогены).

«По прошлогоднему отчету ВОЗ, во всем мире растет число лекарственно устойчивых форм туберкулеза. И в России — самый большой процент распространенности лекарственно-устойчивого туберкулеза на долю населения. И широкая устойчивость — грубо говоря, почти ко всему. В прошлом году во всех странах мира таких больных было чуть более восьми тысяч. Из них три с половиной тысячи проживали в России. Такого процента нет больше нигде. Вдобавок это сопряжено с очень низкой долей выздоровевших», — рассказал Дмитрий Гиллер.

Согласно отчету ВОЗ, эффективность лечения туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью (к двум основным препаратам — рифампицину и изониазиду) оценивается в 55 процентов, с широкой лекарственной устойчивостью — в 28 процентов. Риск смерти при развитии туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью в мире по данным ВОЗ превышает 40 процентов.Чтобы помочь пациентам с этими формами заболевания, исследователи из Университета Джона Хопкинса предлагают синтезировать специфичные в отношении микобактерий антибиотики. Ученые уже получили кристаллы ДНК-гиразы микобактерий (Mycobacterium tuberculosis) в комплексе с ДНК и различными фторхинолонами. Предполагается, что эти данные можно будет использовать для создания противотуберкулезных препаратов.27 января 2017, 13:14НаукаУченые выяснили, почему туберкулез не уничтожил все человечество

Российские исследователи продвинулись дальше. По словам профессора Гиллера, в течение последних семи лет ему с коллегами неоднократно удавалось вылечить пациентов с лекарственно-устойчивыми формами туберкулеза.

«Туберкулез, не поддающийся терапии лекарствами, можно вылечить хирургическими методами. Свыше 95 процентов пациентов, прошедших лечение у нас в клинике фтизиопульмонологии Первого МГМУ до 2017 года (сейчас она передана Минздраву. — Прим. ред.) выздоровели и через пять лет были трудоспособны. То есть с применением хирургии эти самые опасные лекарственно- устойчивые формы туберкулеза излечимы. Но, конечно, лучше до этого не доводить. Поэтому новорожденным необходимо проводить прививки вакциной БЦЖ, детям и подросткам ежегодно проводить кожные иммунологические тесты с применением пробы Манту и/или «Диаскинтеста», а взрослым — хотя бы раз в год делать флюорографию. Это все значительно снижает риски пострадать от туберкулеза», — подчеркнул эксперт.

Туберкулинодиагностика: проба Манту, Диаскинтест

Об услуге

Реакция Манту (туберкулиновая проба, «пуговка») и Диаскинтест у детей

Это внутрикожные тесты с очищенным (реакция Манту) или рекомбинантным туберкулезным аллергеном (Диаскинтест).

Реакция Манту, Диаскинтест — что это такое, прививка или нет, стоит ли родителям и детям бояться этих тестов? И в чем их отличие?

Чтобы полноценно ответить на этот вопрос, давайте вспомним о вакцинации от туберкулёза.
В первые дни после рождения в случае отсутствия противопоказаний детям делают БЦЖ или БЦЖ — М. Это и есть прививка от туберкулёза, её состав — ослабленные (в медицине они носят название аттенуированные) туберкулёзные палочки.
Реакция организма на введение пусть и ослабленных, но всё-таки живых, микроорганизмов у всех разная.
Чтобы оценить эту реакцию и делается проба Манту.

Итак, реакция Манту – это не прививка. А что показывает реакция Манту?

в первые 2 года от вакцинации БЦЖ реакция Манту отвечает на вопрос: сформировался ли адекватный иммунный ответ на вакцинацию против туберкулеза

затем ежегодная реакция Манту сравнивается с предыдущей, чтобы оценить, был ли контакт с туберкулезной инфекцией, есть ли угроза развития заболевания, так называемое бессимптомное тубинфицирование

в 7 лет после проведенной реакции Манту проводится отбор на ревакцинацию БЦЖ

если нет вакцинации БЦЖ – оценивается, был ли контакт с туберкулезной инфекцией или нет

Бояться процесса проведения пробы Манту не нужно — она в большинстве случаев не даёт побочных реакций.

Правила проведения реакции Манту:

место инъекции не рекомендуется мочить до проверки (72 часа), но если попали капли воды, это совсем не страшно

в меню не нужно вводить новые продукты (особенно маленьким детям)

если известно о пищевой непереносимости, то важно полностью исключить аллерген из рациона

место введения препарата не следует тереть, расчесывать и смазывать любыми наружными средствами

если ранее у Вашего ребенка была реакция гиперчувствительности на введение туберкулиновой пробы за 3 дня до проведения пробы: начните давать ребенку антигистаминный препарат (обязательно согласуйте со своим доктором)

реакция Манту проводится 1 раз в год

Противопоказания:

накануне проведенная вакцинация менее чем за 4 недели

острые заболевания и обострения хронических заболеваний

выраженный кожный синдром

реакция гиперчувствительности на ранее проводимые реакции Манту

Побочные реакции:аллергическая реакция на введение туберкулина.

Диаскинтест

С 8 лет у детей используется Диаскинтест: он схож с туберкулиновой пробой, где в виде аллергена выступает рекомбинатный белок схожий с туберкулезным агентом.

Диаскинтест отвечает только на один вопрос: есть или нет тубифицированность.

Многие родители считают, что Диаскинтест «чище, лучше переносится».

На самом деле, и на Диаскинтест бывают аллергические реакции, так же, как и на реакцию Манту.

Использовать Диаскинтест у детей ранее 8 лет можно, но все же по информативности он уступает реакции Манту и чаще дополняет туберкулиновую пробу при необходимости (по назначению доктора 2 этапом иммунодиагностики).

Если все же Вы решили вместо реакции Манту провести Диаскинтест у ребенка до 8 лет, будьте готовы, что детский коллектив, который посещает ребенок, вправе запросить у Вас справку от фтизиатра.

Принимая решение о том, каким тестом проводить иммунодиагностику ребенку, взвести все факторы и примите рациональное решение.

Важно:

При наличии определенных противопоказаний (реакция гиперчувствительности ранее на проведение внутрикожных проб) или информированном отказе родителей от применения внутрикожных проб ребенку возможно использование альтернативных методов обследования. Они включают исследование крови, основанное на выявлении высвобождения гамма-интерферона специфически сенсибилизированными лимфоцитами:

Серологическая диагностика туберкулеза методом T-SPOT.TB

Квантифероновый тест

Возможно за этими тестами будущее, но пока данные об его использовании у детей очень скудны. Минус этого лабораторного теста – высокая стоимость.

Центр вакцинации Династия проводит следующие виды туберкулинодиагностики у детей:

Реакция Манту

Диаскинтест

Важно: В день проверки внутрикожной пробы (реакции Манту, Диаскинтеста) можно сразу же провести плановую вакцинацию.

Реакция Манту (туберкулиновая проба, «пуговка») и Диаскинтест у взрослых

Это внутрикожные тесты с очищенным (реакция Манту) или рекомбинантным туберкулезным. Рутинной практики проведения внутрикожных проб у взрослых нет. Но если Вам доктор назначил эти пробы, он хочет получить ответ: есть тубинфицированность или нет.

Затем ежегодная реакция Манту сравнивается с предыдущей, чтобы оценить, был ли контакт с туберкулёзной инфекцией, если угроза развития заболевания, так называемое бессимптомное тубинфицирование.

Правила проведения реакции Манту или Диаскинтеста:

не рекомендуется до проверки (72 часа) посещать сауны, бани, но если попали капли воды на место постановки, это совсем не страшно

если известно о пищевой непереносимости, то важно полностью исключить аллерген из рациона

место введения препарата не следует тереть, расчесывать и смазывать любыми наружными средствами

Противопоказания:

ранее проведённая вакцинация менее чем за 4 недели до дня постановки пробы

острое заболевание и обострения хронических заболеваний

выраженный кожный синдром

реакция гиперчувствительности на ранее проводимые реакции Манту

Побочные реакции: аллергическая реакция на введение туберкулина.

Важно:

Серологическая диагностика туберкулеза методом T-SPOT.TB

Квантифероновый тест

Возможно за этими тестами будущее, но пока данные об его использовании у детей очень скудны. Минус этого лабораторного теста — высокая стоимость.

Центр вакцинации Династия проводит следующие виды туберкулинодиагностики у взрослых:

Реакция Манту

Диаскинтест

Если у Вас остались вопросы, Вы не уверены каким тестом провести Иммунодиагностику, не переживайте: консультация квалифицированного специалиста в нашем Центре проводится бесплатно перед проведением теста — нам важно, чтобы Вы понимали, что Вы проводите и зачем.

Реакция Манту в Одинцово и Звенигороде: сделать прививку манту взрослым и ребенку

Что показывает проба?

В юные годы любой из нас проходил эту процедуру: фельдшер делал укол между локтем и запястьем каждому ученику, а на следующий день измерял линейкой размеры «пуговки».

Туберкулин, применяемый при пробе Манту, — натуральный антиген, полученный из микобактерий. При введении туберкулина внутрикожно в борьбу с ними вступают лимфоциты, чья активность провоцирует воспаление и уплотнение в месте укола, причем реагируют на микобактерии лишь те лимфоциты, которые уже «встречали» туберкулез. Чем больше этих элементов крови окажут сопротивление возбудителю, тем интенсивнее и заметнее будет реакция Манту.

Реакция Манту: норма

Оценка пробы Манту проводится врачом или медицинской сестрой, прошедшей специальное обучение. Положительный результат еще не свидетельствует о заражении. Для постановки или опровержения диагноза понадобятся дополнительные исследования, которые назначит врач-фтизиатр.

Стоит учесть, что ответ организма на введение антигена микобактерии схож с аллергией, и если у человека есть аллергические заболевания, то результат может быть искажен. Также влияние на итог исследования оказывают кожные и обостренные хронические болезни.

Ошибочно отрицательный результат при остальных признаках, указывающих на туберкулез, возможен при недавнем заражении (не прошло 10 недель), при иммунодефицитном заболевании (ВИЧ).

Реакция Манту у взрослых

Если в детском возрасте нас опекали старшие, — родители, школьные врачи и учителя, — то сейчас пора взять ответственность за здоровье в собственные руки.

Туберкулиновую пробу взрослым проводят при подозрении на активную форму заболевания или после контакта с больным. Также иммунитет испытывают, если предстоит повторное введение вакцины БЦЖ.

Где сделать туберкулиновую пробу?

Если вы озаботились своим здоровьем и решили проверить иммунитет на устойчивость к возбудителям опасных заболеваний, обратитесь в медицинские центры в Звенигороде и Одинцово. Наши преимущества – это комплексное обслуживание, возможность пройти обследование, получить консультацию или лечение в рамках одной клиники, где используется только современное оборудование, сертифицированные препараты. Вам не нужно ждать в очередях, ведь мы понимаем, что, когда речь о здоровье, самая высокая цена – это время.

Мы заботимся о своих пациентах и предлагаем разумную экономию. Сколько стоит проба Манту с учетом скидок (предоставляются социально незащищенной категории граждан), можно узнать по номеру единого кол-центра.

Нет следа от БЦЖ — результаты пробы Манту

Среди общего количества больных туберкулезом 10 процентов всегда составляют дети, даже в благополучной Европе. Ежегодно в мире туберкулезом заболевают не менее 1 млн детей младше 15 лет. Во всех странах планеты только в 2016 году от туберкулеза умерли 253 тысячи детей.

Тем не менее детские фтизиатры часто сталкиваются с тем, что у родителей нет настороженности по отношению к этому заболеванию, они не понимают важности вакцинации БЦЖ, не разбираются, чем отличаются проба Манту и Диаскинтест. Наверное, именно от незнания появилось так много мифов о туберкулезе, которые приходится развеивать нашему эксперту.

Вакцина БЦЖ от туберкулеза

Миф 1. Прививка живой вакциной БЦЖ бесполезна, поскольку она нисколько не уменьшает риск заболеть туберкулезом.

На самом деле. БЦЖ — самая старая вакцина, проверенная уже не на одном поколении. Цель ее не та, что у вакцины против оспы — сделать прививку младенцу и стопроцентно гарантировать, что теперь человек ни разу в жизни не заболеет оспой. Задача БЦЖ ограничить туберкулезный процесс на уровне лимфатической системы, не дать развиться тяжелым генерализованным формам туберкулеза. Вот почему в стране нет туберкулезного менингита, костного туберкулеза, от которых защищает БЦЖ.

Сегодня ученые работают над более эффективной прививкой, но все равно пока это будет живая вакцина. Хотя в идеале нужна инактивированная.

По России охват вакцинацией БЦЖ среди новорожденных 81,2 процента. 10 лет назад было 95−97 процентов. Участковые педиатры стараются, чтобы невакцинированные дети все же получили прививку к году. Но в течение года эти дети могут заболеть туберулезом.

Миф 2. Иногда рубец поcле БЦЖ не появляется.

На самом деле. Эффективность прививки БЦЖ оценивается по двум позициям: сформировался ли рубец после вакцинации и есть ли положительная чувствительность к туберкулину в год. Если нет рубца и положительной реакции на пробу – значит, прививка не была сделана, что бы ни было указано в карте. Вакцинацию надо срочно делать.

Реакция на пробу Манту и ранняя диагностика туберкулеза

Миф 3. Проба Манту и Диаскинтест взаимозаменяемы.

На самом деле. Проба Манту нужна для отбора на прививку, а Диаскинтест необходим для раннего выявления туберкулеза. В России принят такой порядок: проба Манту остается для детей до 7 лет, а школьникам с 21 марта прошлого года применяется Диаскинтест. Его следует проводить ежегодно. Диаскинтест — оптимальный вариант скрининга, поскольку в отличие от пробы Манту он не дает аллергии. Но детям до 7 лет фтизиатры вынуждены оставить пробу Манту, которая, в отличие от других методов позволяет увидеть реакцию не только на туберкулез, но и на вакцину БЦЖ, а значит провести отбор на прививку – найти тех детей, кому нужна ревакцинация. Но в случае сомнительной пробы все равно должен проводиться Диаскинтест.

Миф 4. Нельзя мочить руку, на которой сделана проба Манту.

На самом деле. Мочить можно. Миф о том, что на пробу Манту ни в коем случае не должна попасть вода, зародился, когда много десятилетий тому назад туберкулин вводился накожно, для чего поверхностный слой кожи — эпидермис — рассекали ланцетом, предварительно капнув на это место туберкулином. Боялись, что если на раненый эпидермис попадет грязная вода, может случиться инфицирование ранки. Сейчас туберкулин вводят между эпидермисом и собственно дермой.

Миф 5. У родителей есть право отказаться от туберкулинодиагностики.

Да, это так. Но они должны понимать, что дети, не прошедшие ее, не допускаются ни в сад, ни в школу, ни в другое образовательное учреждение. Родители должны выбирать соответствующий вид образования – семейную, домашнюю, дистанционую формы обучения. Непроверенного ребенка нельзя вести в коллектив и подвергать других детей детей опасности. И если законный представитель ребенка отказался от прививки, он должен оповестить об этом органы опеки. И только в Самарской области 25 детей официально отстранены от посещений детсадов и школ.

Миф 6. Флюорография поможет выявить туберкулез у ребенка.

На самом деле, нет. Изменения в легких менее 1 см на ней не видны. Статистика говорит, что по флюорографии выявляется лишь 0,6% заболевших, тогда как с помощью Диаскинтеста и последующей мультиспиральной компьютерной томографии – 10%.

Когда на прием к фтизиатру приходят дети с плохой пробой Манту, врач просит родителей и других родственников ребенка принести ему и их флюорограммы. Иногда это вызывает возмущение взрослых. Но очень часто по пробе манту ребенка врачи выявляют бабушку на пенсии, которая ни разу не делала снимков легких и уже много лет болеет туберкулезом. Получается, флюорография поможет обеспечить ребенку здоровое окружение.

Симптомы туберкулеза у детей

Миф 7. У туберкулеза очевидные проявления. Они должны насторожить родителей, и тогда ребенка надо показать фтизиатру.

На самом деле. Чаще всего туберкулез у детей протекает бессимптомно. Если есть заметные признаки – это запущенный туберкулез. Если кашель продолжается более 2−3 недель, несмотря на то, что ребенок получает адекватное лечение, нужно обязательно показать его фтизиатру для исключения туберкулеза. Любые проявления интоксикационного характера – субфебрильная температура, потливость ночью – тоже должны насторожить родителей и врача. Ребенку часто ставят диагнозы бронхит или пневмония? Это также повод обратиться к фтизиатру и провести внеплановые пробы. Помните, с диагностической целью пробы можно делать столько, сколько нужно.

БЦЖ, манту и холодовая цепь. Воронежские врачи развеяли мифы о прививках и диагностике . Последние свежие новости Воронежа и области

Согласно Национальному календарю профилактических прививок, младенец должен получить первую вакцину в течение 24 часов после рождения. В течение года ребенка прививают против вирусного гепатита В, туберкулеза (БЦЖ), пневмококковой инфекции, дифтерии, коклюша, столбняка, полиомиелита и других опасных инфекций.

Некоторые родители отказываются от иммунизации ребенка, приводя различные аргументы. Корреспондент РИА «Воронеж» обсудила мифы и страшилки о прививках и диагностике туберкулеза с ведущими специалистами здравоохранения Воронежской области.

Суждение 1: «В советское время так много прививок не делали»

Действительно, одно из главных отличий иммунизации в СССР от современной – в количестве прививок. Советские календари прививок ведут свой отсчет с 1950-х годов, и включали они всего пять видов. Вакцины от дифтерии и столбняка существовали и раньше, но они не были обязательны.

Врачи подчеркивают, что только благодаря вакцинации в 1960-х годах удалось справиться с корью, а смертность от туберкулеза снизилась в десять раз после введения прививки БЦЖ. Резкое увеличение числа новых видов вакцин началось после 1980-х годов.

– Объясню на примере кори. У вируса кори контагиозность, то есть заразность, 100%. Это значит, что каждый вирус кори обязательно найдет себе «хозяина». И у этого человека, если он не будет привит, 100% разовьется заболевание. Больной вошел в автобус – и все пассажиры должны заразиться, но заболевает один, который не привит, – сказала заместитель главврача по эпидемиологии Воронежского областного клинического центра профилактики и борьбы со СПИД Тамара Ситник.

Сейчас среди жителей региона охват по всем видам прививок не ниже 98%. Защитить остальные 2% людей можно, поддерживая привитую прослойку населения в 95%. Так сохранится коллективный иммунитет.

– Микроорганизм – возбудитель болезни, – встретившись с этими 95% привитых, погибнет в их организме и не дойдет до непривитых, – объяснила специалист.

Еще одно отличие современных прививок: вакцины стараются делать комбинированными, и по составу они более очищенные, балластных веществ меньше. Гриппозные вакцины, которые вводили в советское время, были живыми. Сейчас вакцины синтезируются, и в их составе вообще нет вирусных частиц.

Суждение 2: «Ребенка заражают, вводя вирус»

Часто пациенты считают, что в прививках содержатся консерванты и вредные вещества. Кто-то думает, что когда делают прививку от гепатита B, то «вводят сам вирус».

– Вакцина против гепатита B синтетическая. Туда входит только тот самый антиген HBsAg, который «снят» с поверхности вируса и на который мы вырабатываем иммунный ответ. Самого живого вируса, чтобы ему размножаться и вызывать заболевание, в вакцине нет. То есть это абсолютно безвредно, – заверила Тамара Ситник.

Еще один подобный миф: новорожденных, которым делают в роддоме прививку в первые часы, «заражают желтухой».

– Мы ни в коем случае желтухой их не заражаем. А все проявления физиологической желтухи, которые бывают у новорожденных, возникают по внутренним причинам. После того как мы начали делать новорожденным прививки против гепатита B, проявлений желтухи не стало больше. Подобные страхи связаны с незнанием состава вакцины и непониманием принципа ее действия, – считает Тамара Ситник.

Суждение 3: «Прививку БЦЖ нельзя делать новорожденному»

В России современный штамм вакцины БЦЖ был разработан в 1950-е годы, но при этом он не устарел и не потерял способности вызывать иммунитет. В пользу БЦЖ говорят цифры.

– Ежегодно, по оценке ВОЗ, в мире 10 млн человек заболевают туберкулезом. Каждый десятый – ребенок, а из этого 1 млн заболевших детей каждый четвертый умирает. Более 140 стран в мире делают прививку БЦЖ, а в тех, что отказались от массовой иммунизации, практически ликвидирована заболеваемость туберкулезом. Тем не менее в этих странах в группах риска все равно вакцинация проводится, – подчеркнула заместитель главного врача областного клинического противотуберкулезного диспансера, главный внештатный специалист – детский фтизиатр департамента здравоохранения Ирина Иконина.

При этом прививку нужно делать в первые дни жизни ребенка, так как это самый опасный период.

– Дети умирают из-за туберкулеза обычно до пятилетнего возраста. Погибают те, кто заразился в первые дни жизни, не успев привиться. Из детей раннего возраста, которые за последнее годы умерли от туберкулеза, практически все без прививки БЦЖ. Родители рискуют, отказавшись от вакцинации, ведь ребенок выписывается из роддома домой, где бабушки, дедушки, тети, дяди, соседи. А больны или здоровы эти люди – родители не знают, иногда доверяют уход или присмотр за ребенком посторонним людям. Медикам часто даже не удается установить источник заражения туберкулезом малыша, – рассказала специалист.

В отличии от печальной мировой статистики, в России из всех людей, заболевших туберкулезом, дети составляют всего 3%, а в Воронежской области этот показатель меньше 2%. Также в регионе менее 1% отказов от прививки БЦЖ, тогда как в других регионах он может достигать 20%. Даже те, кто необдуманно отказывается прививать новорожденного в роддоме, все равно приходят к тому, чтобы сделать прививку через месяц или через год.

Суждение 4: «Проба Манту устарела»

Некоторые родители считают, что проба Манту устарела и вместо нее следует применять другие методы, например пробу Суслова.

Ирина Иконина отметила, что проба Манту проводится туберкулином – это один из старейших иммунобиологических препаратов, который применяется во всех странах. По определению Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) внутрикожная проба с туберкулином является золотым стандартом для обнаружения в организме микобактерий туберкулеза на ранних этапах, до локальных проявлений заболевания.

Пробу Суслова исследуют в Белоруссии, но официально на детях ее пока нигде не применяют. В Белоруссии, как и в России, для скрининга детей на туберкулез используют пробы Манту и «Диаскинтест».

– Если проба Манту показывает наличие любой микобактерии, то «Диаскинтест» указывает именно на активную, вирулентную, агрессивную микобактерию туберкулеза. По данным ВОЗ, микобактерией туберкулеза инфицирована треть населения Земли, но заболевают не все, а только под воздействием факторов риска или предрасположенности к этой инфекции. Поэтому важно своевременно выявить лиц из группы риска, а среди них могут быть и уже заболевшие. Это в первую очередь люди, у которых начала размножаться и проявлять свою агрессию туберкулезная палочка, – у них и становится положительна проба «Диаскинтест», – объяснила детский фтизиатр.

Реакцию Манту проводят в возрасте до семи лет, чтобы повторить прививку БЦЖ тем, кто не заразился туберкулезной инфекцией. После восьми лет значительное число детей уже инфицированы микобактерией, поэтому врачам важно установить не сам факт инфицирования, а именно риски заболевания, для этого идеально подходит «Диаскинтест».

При этом у родителей дошкольников есть выбор: в возрасте ребенка до семи лет они могут отказаться от Манту и сделать «Диаскинтест». Но в этом случае – при отказе от пробы Манту – вторую прививку БЖЦ ребенку провести будет невозможно.

– С «Диаскинтестом» мы работаем давно, а в качестве скрининга он применяется третий год. Из детей от восьми до 17 лет, которым мы ежегодно делаем пробы с «Диаскинтестом», меньше 1% дают положительный результат, а если сравнить с реакцией Манту, то это было 50-70%. Разница в том, что с помощью «Диаскинтеста» мы выявляем не всех инфицированных, как раньше, а именно тех, у которых очень высок риск заболеть. Поэтому при стойком улучшении эпидемиологической ситуации по туберкулезу в РФ (возможно, через десять лет это и произойдет), если откажемся от второй прививки БЦЖ в возрасте шести-семи лет, мы полностью перейдем на «Диаскинтест», – предположила специалист.

В коммерческих медорганизациях предлагают альтернативу: у ребенка берут венозную кровь и проводят анализ, подобный «Диаскинтесту», но в пробирке. Врачи отмечают, что подобные исследования делают в клиниках Санкт-Петербурга и Москвы, а в Воронеже лишь производят забор материала. Поэтому достоверность результата может быть под сомнением из-за неправильной транспортировки или форс-мажора в пути.

Суждение 5: «После вакцинации бывают реакции и осложнения»

Врачи не исключают, что после любой вакцинации возможны реакции как общего, так и местного характера, вплоть до тяжелых анафилактических. Наиболее часто встречающиеся местные реакции – покраснение, отек, припухлость, небольшое кратковременное повышение температуры.

Есть дети, предрасположенные к аллергическим реакциям на те или иные компоненты вакцины. Так бывает с вакцинами против гриппа, которые содержат куриный белок.

– Чтобы обезопасить пациента, перед прививкой должен быть осмотр у врача, который знает аллергологический анамнез. Или родители ребенка должны помочь и сообщить, если раньше были реакции на какие-то прививки. Если пациент имеет аллергологическую отягощенность, специалисты могут порекомендовать применение антигистаминных препаратов за две недели до прививки, но это решается индивидуально. Иногда перед вакцинацией по показаниям назначают и анализы, – рассказала доцент кафедры детских инфекционных болезней ВГМУ имени Бурденко, педиатр-инфекционист Воронежской областной детской больницы №2 Алла Макарова.

Осложнения на вакцинации бывают крайне редко, наиболее реактогенной из всех вакцин является отечественная АКДС-вакцина за счет коклюшного компонента. Решение о противопоказаниях к вакцинации принимает врач.

Суждение 6: «Вакцины неправильно хранят»

От качества вакцины зависит ее эффективность. Потому медики тщательно следят за транспортировкой препаратов на склад «Воронежфармации», а оттуда – в поликлиники. В санитарных правилах, приказах и нормативных документах есть термин, обозначающий соблюдение всех правил и температурных режимов при транспортировке медицинских иммунобиологических препаратов, – «холодовая цепь».

– Вакцину привозят в Воронежскую область в огромном рефрижераторе (холодильная установка. – Прим. РИА «Воронеж»), который в буквальном смысле обвешан терморегистраторами. На всем пути следования они фиксируют температуру и отклонения от режима. Вакцина выгружается на склад в одноразовых термоконтейнерах. После терморегистраторы подключаются к компьютеру. Так видно, как менялась температура в пути, – объяснила ведущий советник отдела санитарно-эпидемиологического благополучия населения департамента здравоохранения области Наталия Базыкина.

Сам склад также оснащен терморегистраторами: они есть на каждой полке. Когда вакцину нужно доставить со склада в поликлинику, ее тоже перевозят в термоконтейнере с терморегистратором. Человек, который занимается транспортировкой, обучен и знает, что делать в аварийной ситуации.

– Мы все время запрашиваем информацию о состоянии оборудования медорганизаций. Сейчас оснащаем их современными фармацевтическими холодильниками, которые подают звуковой сигнал при отключении электроснабжения. Также в каждой медорганизации есть схема, куда перенести вакцину в случае аварийной ситуации. Этому мы уделяем очень большое внимание, – заверила Наталия Базыкина.

Если человек хочет купить вакцину для себя, то ее тоже придется доставить соответствующим образом: в одноразовом термоконтейнере с одноразовым терморегистратором. Медицинский работник сначала оценит, как транспортировали вещество, и лишь потом будет его вводить.

Суждение 7: «Перед поездкой в экзотическую страну нужно сделать прививку»

Это хороший совет, говорят медики. Самый распространенный вопрос от жителей Воронежской области – где привиться от желтой лихорадки? Эта болезнь передается с укусом комаров в Африке и Южной Америке.

– Такую прививку можно сделать в Воронежской консультативно-диагностической поликлинике (Фридриха Энгельса, 80, телефон 277 22 78). Там круглый год есть вакцины, можно привиться на коммерческой основе, – сообщила Наталия Базыкина.

Часто жители Воронежа выезжают в эндемичные регионы России. В этом случае нужно делать прививку, обратившись в поликлинику по месту жительства. В 2019 году около 500 человек, которые поехали работать в эндемичные регионы страны (Сибирь, Ленинградская область и другие), бесплатно получили вакцину против клещевого энцефалита. Тех, кто собирается ехать в Среднюю Азию, прививают против брюшного тифа, вирусного гепатита А.

– В последние пять лет призывников прививаем бесплатно от пневмококковой инфекции, а также против менингококковой инфекции и гриппа. Те, кто не болел ветряной оспой, также могут привиться. В войсках солдата не привьют, поэтому следует обращаться в поликлинику по месту жительства. Также проводим вакцинации людей старше 60 лет против пневмококковой инфекции, – рассказала Наталия Базыкина.

Тем, у кого нет прививочного сертификата (кто не знает, какие прививки ему делали), советуют сдать анализы на напряженность иммунитета к каждому конкретному заболеванию: отдельно – к кори, краснухе, дифтерии и другим болезням. Такие анализы не входят в финансирование за счет ОМС.

Заметили ошибку? Выделите ее мышью и нажмите Ctrl+Enter

Убежище в Резиденции Болина Цивински Джексона | by Bohlin Cywinski Jackson

Ферма Wine Country, расположенная в долине Напа в Северной Калифорнии, была устаревшим фермерским домом, который был отремонтирован в современную резиденцию, соединяющую его жителей с окружающим ландшафтом. Клиенты, которые являются местными виноделами, хотели, чтобы дом сохранял очарование фермерского дома, но открывался для окружающей их среды.

«Когда все дома, дом — это все. Наш дом может быть маленьким, но в нем много удовольствия.Жизнь и работа дома 24 часа в сутки, 7 дней в неделю в течение последних 90 с лишним дней сделали это очевидным.
Что понравилось до карантина на COVID-19; теперь мы ценим еще больше — так почему? Это чувство. Как и окружающий пейзаж, он источает спокойствие, чистые линии, простые материалы. Он приземленный, незамысловатый — он увлекает вас и вызывает желание остаться.
Каждое утро, спускаясь по этой лестнице, я чувствую себя довольным. Он легкий, воздушный, интригующий, с первого взгляда на наш виноградник.Это хорошее начало дня. У каждой детали и каждой комнаты есть цель и причина, которые делают ее эффективной, очень функциональной и визуально привлекательной. Открытый макет способствует обмену опытом, стимулирует общение в реальном времени, спонтанное взаимодействие. Это держит нас на связи друг с другом. Уединение обеспечивает баланс, потому что очень важно иметь пространство и побыть в одиночестве, особенно когда вы вместе 24 часа в сутки, 7 дней в неделю. Более того, многие из наших любимых областей быстро меняются из «жизни» в «работу» и обратно в «жизнь».Откройте двери Fleetwood, и обеденная зона превратится в офис под открытым небом. Возможно, больше всего значит связь с природой. Будь то вид из окна, сидение на крыльце или двери Fleetwood, которые открываются, чтобы выйти на улицу, прямая связь с природой приносит фокус, перспективу, вдохновение и чувство спокойствия в наше заключение. В нестабильные времена всегда можно быть уверенным в одном: мы всегда найдем комфорт дома ».

В этой новой норме наши дома — это наши убежища.Как архитекторы, мы ориентируемся на целостное представление о том, что такое убежище. При проектировании мы изучаем световые узоры, эффективные планы этажей и создаем элементы неожиданности, такие как насадка для чтения или широкая внешняя дверь. Мы можем визуализировать и смоделировать, как, по нашему мнению, будут использоваться наши дома, но в конечном итоге испытание временем является истинным судьей наших усилий. Мы благодарны за то, что наши жилые проекты приносят утешение и комфорт в эти беспрецедентные и нестабильные времена.

Бакалавр коммуникаций и журналистики (BCJ) Прием в Индии

Вас интересует журналистика? Хотите заняться написанием статей или репортажем для печатных, аудио- и визуальных средств массовой информации? Бакалавр коммуникаций и журналистики — очень хороший курс для тех, кто пытается войти в сферу СМИ.Узнайте здесь подробности и перспективы в этой области.

Обзор

С развитием коммуникационных технологий и средств массовой информации растет спрос на курсы коммуникации и журналистики. Бакалавриат по коммуникациям и журналистике хорош тем, что существует множество вариантов для получения степени магистра и последипломного образования. В противном случае вы можете напрямую попасть в отрасль и получить ценный отраслевой опыт, чтобы подняться по карьерной лестнице.Вы можете выбирать из множества полей. Телевидение, радио и полиграфия предоставляют в этом отношении много возможностей. Интернет и мультимедийный сектор также предоставляют сложные, но привлекательные возможности.

Право на участие и продолжительность курса

Пройти 10 + 2 в любом из потоков с признанной доски с не менее 50% оценок. Продолжительность курса — 3 года для всех дневных курсов. Некоторые университеты также имеют возможность дистанционного обучения.

Подробнее о курсе

Курс начинается с того, что помогает вам понять множество различных форм общения, таких как вербальное, невербальное, письменное и визуальное общение. Общение — важный аспект, который отличает нас от животных, и этот курс помогает нам лучше понять, как оно влияет на нашу жизнь. В этом курсе рассматриваются различные средства связи и технологии, которые используются для передачи информации. Он расширяет ваши знания о журналистике и ее роли в современных обществах.Курс является сбалансированным для развития навыков журналистики на различных медиа-платформах. В этом курсе рассматриваются следующие темы: Введение в коммуникацию, политическая журналистика, журналистские расследования, криминальное освещение, медицинское освещение, репортажи с нуля, прямые телетрансляции, социальные сети и многое другое.

Возможности трудоустройства

Выпускники курсов по коммуникации и журналистике могут работать в различных секторах, таких как телеиндустрия, радиовещание, работа в газетах и журналах и т. Д.С ростом количества телеканалов и ростом популярности FM-каналов на радио открываются новые возможности как перед камерой, так и за ней. Кроме того, есть и другие роли, такие как мультимедиа, веб-менеджмент, реклама, медиа-администрирование и управление коммуникациями, как в корпоративном, так и в государственном секторе. Другие области, такие как связи с общественностью, реклама, управление кампаниями и стратегическая коммуникация, также предоставляют отличные возможности. Как упоминалось ранее, у вас есть возможность поступить в аспирантуру или получить диплом.

Зачисление в бакалавриат коммуникаций и журналистики (BCJ) на 2021-2022 учебный год

Вы хотите поступить на бакалавр коммуникаций и журналистики (BCJ) на 2021-2022 учебный год? Мы можем связать вас с подходящими колледжами и университетами, предлагающими курсы бакалавра коммуникации и журналистики (BCJ) в выбранных вами местах.

Подать заявку на получение степени бакалавра коммуникаций и журналистики (BCJ)

Новые соединения изохинолинамина и изоиндолохиназолинона проявляют антипролиферативную активность в клетках острого лимфобластного лейкоза

Реферат

Азотсодержащие гетероциклы, такие как хинолин, индолиновые продукты, а также хиназолиноновые продукты являются скелетными широкие биологические эффекты.В течение последних лет эти структуры интенсивно синтезировались и модифицировались для получения новых синтетических молекул, которые могут специфически ингибировать активность дисрегулируемых протеинкиназ в раковых клетках. В данном документе серия вновь синтезированных соединений изохинолинаминов (от FX-1 до 8) и изоиндолохиназолинона (FX-9, FX-42, FX-43) оценивалась в отношении их противолейкемического потенциала в отношении B- и T-острой лимфобластной болезни человека. лейкозные (ALL) клетки. Наблюдалось несколько биологических эффектов. Клетки B-ALL (SEM, RS4; 11) были более чувствительны к соединениям изохинолинаминов, чем клетки T-ALL (Jurkat, CEM).В клетках SEM метаболическая активность снижалась с 10 мкМ до 26,7% (FX-3), 25,2% (FX-7) и 14,5% (FX-8). 3- (п-Толил) изохинолин-1-амин FX-9 был наиболее эффективным агентом против B- и T-ALL клеток со значениями IC50 от 0,54 до 1,94 мкМ. Ни одно из тестируемых соединений не показало гемолиз на эритроцитах или цитотоксичность в отношении здоровых лейкоцитов. Антипролиферативный эффект FX-9 был связан с изменениями морфологии клеток и индукцией апоптоза. Кроме того, было обнаружено влияние FX-9 на передачу сигналов PI3K / AKT, MAPK и JAK / STAT, но оно было неоднородным.Тестирование функционального ингибирования 58 киназ не выявило специфической ингибирующей активности среди киназ, связанных с раком. В заключение следует отметить, что FX-9 проявляет значительную антилейкемическую активность в отношении B- и T-ALL-клеток, и его следует дополнительно изучить в отношении механизмов действия. Дальнейшие соединения текущей серии могут служить в качестве шаблонов для дизайна новых соединений и в качестве основных структур для подходов к модификации.

Ключевые слова: Острый лимфобластный лейкоз, Гетероциклы, Изохинолинамин, Изоиндолохиназолинон, Апоптоз, Ингибитор киназ

ВВЕДЕНИЕ

Гетероциклические молекулы действуют как высокофункциональные каркасы и привлекают большое внимание из-за их разнообразной биологической активности.Хинолин, хиназолиноны и индол являются хорошо известными азотсодержащими гетероциклическими структурами и встречаются в некоторых природных продуктах, таких как растения, грибы или морские организмы. Было продемонстрировано, что соединения с этими основными цепями обладают противомалярийным (Vandekerckhove and D’hooghe, 2015), антибактериальным (Naeem et al ., 2016), противогрибковым (Musiol et al ., 2010) действием, противовоспалительное (Mukherjee and Pal, 2013) или противоопухолевое действие (Mantu et al ., 2016).

Таким образом, интерес к таким молекулам постоянно возрастает, и были разработаны и оценены различные процедуры их синтеза и модификации.За прошедшие годы было описано несколько структурных модификаций и появилось множество гибридов. Таким образом, были идентифицированы новые слитые гетероциклические молекулы с повышенной биологической активностью, которые применимы для лечения различных заболеваний, включая рак (Akhtar et al ., 2017).

Однако их конкретные способы действия разнообразны, и сообщалось о широком спектре биологических и фармакологических свойств. Известные аналоги хинолина, такие как актиномицин D, доксорубицин или митоксантрон, вызывают цитотоксичность за счет интеркаляции ДНК или ингибирования топоизомеразы II (Musiol, 2017).Кроме того, структуры на основе индола (Yang et al ., 2017), хинолона (Solomon and Lee, 2011), а также хиназолинонов (Hameed et al , 2018) могут действовать как ингибиторы киназ, напрямую связываясь с АТФ. сайт связывания ферментов.

Недавно произведенные соединения часто оцениваются с точки зрения их потенциального применения в качестве фармацевтических препаратов. Стратегии раннего скрининга для первоначальной характеристики разрабатываются и обычно выполняются с использованием моделей in vitro на основе клеток или инструментов in silico .Помимо обычного тестирования стандартных клеточных и молекулярных маркеров, идентификация адресных функциональных белков как киназ является ключом к выяснению механизма действия соединений (Martell et al ., 2013; Cozza, 2017; Eastman, 2017). В идеале селективность новых ингибиторов киназ следует функционально оценивать на уровне белка на предмет их способности ингибировать катализируемый киназой фосфотрансфер АТФ на субстрат (Yanamandra et al ., 2015).

Большое количество одобренных FDA ингибиторов киназ, таких как гефитиниб (Kazandjian et al ., 2016), Idelalisib (Miller et al ., 2015) и Midostaurin (Stansfield and Pollyea, 2017) характеризуются хинолоновым, хиназолиноновым или индольным остовом (). Эти соединения специфически ингибируют киназную активность рецептора эпидермального фактора роста, изоформы p110δ фосфоинозитид-3-киназы (PI3K), а также FMS-подобного рецептора тирозинкиназы 3 и были успешно внедрены для лечения рака, включая лейкоз. Более того, многочисленные гетероциклические фармацевтические препараты с аналогичными каркасами в настоящее время оцениваются в различных доклинических и клинических исследованиях (Paubelle et al ., 2017; Вэй и Тионг, 2017; Гао и др. , 2018; Ли и др. , 2018). Ранее мы и другие продемонстрировали, что производное хинолина CX-4945 является мощным ингибитором казеинкиназы 2 (CK2), проявляя антипролиферативный потенциал в отношении клеток острого лимфобластного лейкоза (ALL) за счет подавления активности пути PI3K / AKT (Buontempo et al ). ., 2014; Рихтер и др. ., 2017). CK2 представляет собой сериновую треонинкиназу, которая фосфорилирует различные субстраты по многочисленным путям, включая PI3K / AKT, JAK / STAT и NFkB.CK2 часто нарушается при гематологической неоплазии, включая острый B- и T-клеточный лимфобластный лейкоз (Piazza et al ., 2012).

Химические структуры. (A) Гетероциклический изохинолин, хиназолиноны и индольные основы. (B) Утвержденные FDA ингибиторы киназ с хинолиновыми (гефитиниб), хиназинолоновыми (иделалисиб) или индольными (мидостаурин) каркасами.

Здесь серия вновь синтезированных слитых гетероциклических соединений (изохинолинаминов и производных изоиндолохиназолинонов) была впервые оценена в попытке оценить молекулы на их антипролиферативный потенциал против B- и T-ALL клеток.Биологическую активность соединений изучали с помощью анализов жизнеспособности клеток и методов скрининга киназной активности. Наши результаты показывают, что изохинолинамин FX-9 является наиболее активным кандидатом и проявляет наиболее сильную активность в отношении B- и T-ALL клеток.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Соединения

Молекулы хинолина и хиназолинонов (,) были синтезированы в ходе исследований оригинальных синтетических методик (Shen et al ., 2015, 2016; Feng and Wu, 2016). Чистота каждого соединения была выше 99% и подтверждена методами газовой хроматографии-масс-спектрометрии и ядерного магнитного резонанса (1 H-ЯМР и 13 C-ЯМР).Аналитические данные и спектры ЯМР опубликованы в рукописях синтеза (Shen et al ., 2015, 2016; Feng and Wu, 2016).

Таблица 1.

Структуры изоиндолохиназолинонов

Таблица 2.

Структуры изохинолинамина

ID	Структура	Химическая формула		9013 9013 9013	9013	9013	9013	C ₁₆ H ₁₄ N ₂	3- ( p -Толил) изохинолин-1-амин	234.3
FX-42		C ₁₆ H ₁₄ N ₂ O	6-Метокси-3-фенилизохинолин-1-амин	250,3
FX-43		C ₁₆ H ₁₄ N ₂	7-метил-3-фенилизохинолин-1-амин	234,3

Все соединения были растворены в диметилсульфоксиде, DGMSO Германия) до 10 мМ маточного раствора и хранили при -20 ° C.Рабочие растворы были приготовлены только что для экспериментального использования.

Клеточные линии и эксперименты на клеточных культурах

Человеческие линии клеток ALL SEM и RS4; 11 (обе B-ALL), а также Jurkat и CEM (оба T-ALL) были приобретены у DSMZ (Брауншвейг, Германия) и культивированы в соответствии с протоколу производителя. В среду добавляли 10% инактивированную нагреванием фетальную бычью сыворотку (Biochrom, Берлин, Германия) и 100 мкг / мл пенициллина и стрептомицина (Biochrom, Берлин, Германия). Клетки поддерживали в увлажненной атмосфере с 5% CO ₂ при 37 ° C.

Все соединения предварительно оценивали на их антиметаболическую активность против ВСЕХ клеточных линий с использованием анализа WST-1 (Roche, Mannheim, Germany), как описано ранее (Kretzschmar et al ., 2014). Анализ основан на восстановлении соли тетразолия WST-1 до растворимого формазана митохондриальными дегидрогеназами клеток. Количество формазанового красителя напрямую зависит от количества метаболически активных клеток. Клетки высевали в 96-луночные планшеты (5 × 10 ⁴ клеток / лунку в трех экземплярах) в 150 мкл среды и добавляли соединения с конечной концентрацией 5 мкМ или 10 мкМ.Контрольные клетки культивировали в их среде, содержащей ДМСО в той же концентрации, что и в клетках, подвергшихся воздействию соединения. Метаболическую активность оценивали через 72 часа инкубации. Затем в каждую лунку добавляли 15 мкл WST-1 и инкубировали еще 3 часа (37 ° C, 5% CO ₂). Поглощение измеряли на планшет-ридере Glomax (Promega, Mannheim, Germany) при длине волны 450 нм и эталонной длине волны 620 нм. Метаболическая активность выражалась в процентах от обработанных ДМСО контролей (= 100%).

Кроме того, антилейкемическая активность репрезентативного соединения дополнительно оценивалась на линиях B- и T-All клеток в течение до 72 часов с концентрациями в диапазоне 0,5–5,0 мкМ. Пролиферацию оценивали путем подсчета жизнеспособных клеток с использованием исключения красителя трипановый синий (Merck KGaA). Апоптоз анализировали с помощью окрашивания аннексином V FITC (BD Biosciences, Гейдельберг, Германия) и пропидиум йодидом PI (Sigma Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США), как описано ранее (Kretzschmar et al ., 2014). Измерение раннего апоптоза (Аннексин V-FITC + и PI–) и позднего апоптоза и некротических клеток (Аннексин V FITC + и PI +) проводили с помощью проточной цитометрии на приборе FACSCalibur (Becton Dickinson, Гейдельберг, Германия), а данные анализировали с помощью программного обеспечения CellQuest ( Бектон Дикинсон).Морфологию клеток оценивали с помощью окрашивания May Grünwald Giemsa, как описано ранее (Kretzschmar et al ., 2014). Клетки анализировали с помощью светового микроскопа Evos XL Core (Life technologies, Дармштадт, Германия).

Анализ гемолиза

Гемолитическую активность выбранных изохинолиновых соединений определяли по высвобождению гемоглобина из клеток цельной крови, как описано ранее (Maletzki et al ., 2014). Вкратце, цельную кровь здоровых доноров (n = 6) засевали в 96-луночные планшеты и инкубировали с 5 мкМ FX-3, FX-7, FX-8 или FX-9 в течение 120 мин.Клетки положительного контроля (= максимальный лизис) обрабатывали 1% додецилсульфатом натрия (SDS, Merck KGaA). После периода инкубации бесклеточные супернатанты переносили в новый 96-луночный планшет и измеряли поглощение на считывающем устройстве для планшетов Glomax (Promega) при 540 нм (эталонная длина волны: 690 нм). Гемолитическую активность определяли количественно по следующей формуле:% гемолиза = ((образец OD540 нм — буфер OD540 нм) / OD540 нм max — буфер OD540 нм)) × 100.

Анализ жизнеспособности клеток на лейкоцитах человека

Влияние на жизнеспособность лейкоцитов анализировали с помощью окрашивания кальцеин-ацетоксиметилэфиром (Calcein-AM; Invitrogen, Дармштадт, Германия).Человеческие лейкоциты из цельной крови шести здоровых доноров высевали в 96-луночные планшеты (1 × 10 ⁵ клеток / лунку в трех повторностях) после центрифугирования плотности фиколла и инкубировали с 5 мкМ FX-3, FX-7, FX-8 или FX-9 до 72 ч. Клетки, обработанные ДМСО, служили контролем живых клеток. Среду удаляли через 48 или 72 часа соответственно. Добавляли кальцеин-AM (4 мМ) и инкубировали в течение 30 минут (37 ° C, 5% CO ₂). Анализ выполняли на планшет-ридере Glomax (Promega) при длине волны возбуждения 485 нм (эмиссия 535 нм).Для оценки жизнеспособности клеток относительную интенсивность флуоресценции окрашенных кальцеином-AM клеток, обработанных ДМСО (= живой контроль), устанавливали на 100% и рассчитывали интенсивности флуоресценции образцов. Интенсивность флуоресценции пропорциональна количеству жизнеспособных клеток.

Анализ активности киназы CK2

Активность фермента определяли с помощью анализа ADP-Glo-Kinase в соответствии с протоколом производителя (Promega). Вкратце, FX-9 (0,1–5 мкМ), CX-4945 (0,1–5 мкМ) или ДМСО инкубировали с 50 нг рекомбинантного человеческого CK2α1 (Promega), 2.5 мкг субстрата CK2α1 (Promega), 10 мкМ АТФ в течение 60 мин при комнатной температуре. Киназная реакция была остановлена реагентом ADP-Glo для истощения оставшегося АТФ. На заключительном этапе преобразование АДФ в АТФ выполняли с помощью реагента для обнаружения киназы для получения люминесценции с использованием реакции люцифераза / люциферин. Люминесценцию измеряли с помощью считывающего устройства для 96-луночных планшетов Glomax (Promega). Излучаемый свет коррелирует с количеством АДФ, образованного в анализе киназы, что указывает на активность киназы.

Скрининг киназной активности

Киназную активность определяли с использованием Eurofins ’KinaseProfiler ^TM Service (Diversity Panel, # 50-015KP, Eurofins, Dundee, UK). Ферментативную активность измеряли по фосфорилированию субстрата. Панель из 58 киназ человека оценивали на Km для АТФ, а FX-9 тестировали при 2,5 мкМ. Результаты выражены в процентах от средней активности киназы в образцах положительного контроля. Значение положительного контроля считается 100%, и все тестируемые образцы были измерены относительно этого значения.Значения от 30% до 70% были определены как частичные совпадения, а результаты ниже 30% считались сильным попаданием.

Вестерн-блот

Клетки (1–5 × 10 ⁶) лизировали с использованием буфера RIPA (Cell Signaling, Danvers, MA, USA) и ультразвукового воздействия. Белки разделяли на Midi-гелях (Bio-Rad, Мюнхен, Германия), наносили на PVDF-мембрану (Bio-Rad) с использованием Trans-Blot ^® Turbo ^TM Transfer System (Bio-Rad, 2,5 A, 25 В, 10 мин), блокируют в блокирующем буфере LI-COR (LI-COR Biotechnology, Линкольн, Северная Каролина, США) и детектируют с помощью системы визуализации LI-COR Odyssey (LICOR Biotechnology) и программного обеспечения Image Studio Lite (LI-COR Biotechnology).Антитела перечислены в дополнительной таблице 1.

Статистический анализ

Результаты каждого эксперимента были описаны с использованием среднего значения и стандартного отклонения. Значимость между контролем и лечением рассчитывалась с использованием двустороннего теста Стьюдента t , программное обеспечение Excel, версия 2010 (Microsoft Deutschland GmbH, Мюнхен, Германия). Значение p <0,05 считалось значимым. Расчет значений IC50 проводили с использованием пакета GNUPLOT, версия 5.2 (SourceForge Media, Ла-Хойя, Калифорния, США).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Биологическая активность изоиндолохиназолинонов

Химическая структура восьми вновь синтезированных изоиндолохиназолинонов (FX-1-8) представлена в. Антиметаболические эффекты каждого соединения (5 мкМ, 10 мкМ) анализировали на двух линиях клеток B- и двух T-ALL после 72 часов воздействия (). Три соединения (FX-3, FX-7 и FX-8) проявляли противолейкемический потенциал в клеточных линиях B-ALL, на что указывает снижение метаболической активности более чем на 50% по сравнению с обработанными ДМСО контрольными клетками.Здесь самые сильные эффекты наблюдались при концентрации 10 мкМ в клетках SEM. Метаболическая активность снизилась до 26,7% (FX-3), 25,2% (FX-7) или 14,5% (FX-8). В концентрации 10 мкМ FX-2 проявлял наиболее сильные эффекты в клетках T-ALL. Метаболическая активность снизилась до 77,2% в CEM, а также до 54,3% в клетках Jurkat.

Таблица 3.

Влияние изоиндолохиназолиноновых соединений на метаболическую активность

FX-120-13% ± 4,7

ID	SEM		RS4; 11		CEM		Jurkat

	5 мкМ	10 мкМ	5 мкМ	10 мкМ	5 мкМ	10 мкМ	5 мкМ	10 мкМ
97,7% ± 7,3	99,3% ± 2,9	94,4% ± 4,1	87,1% ± 4,5	83,9% ± 6,6	93,4% ± 12,1	68,5 ± 14,8
FX -2	100,2% ± 3,1	69,8% ± 2,7	97,3% ± 1,2	79,8% ± 0,9	86,3% ± 4,9	77,2% ± 3,0	81,3% ± 13,8	54,3% ± 11,9
FX-3	32,0% ± 3,0	26,7% ± 4,3	73.8% ± 0,3	40,2% ± 3,7	76,2% ± 2,4	86,0% ± 4,9	57,9% ± 13,9	77,0% ± 1,2
FX-4	96,8% ± 1,0	64,9 % ± 3,5	91,2% ± 4,3	85,9% ± 4,5	101,8% ± 2,9	90,6% ± 2,5	90,4% ± 1,8	86,6% ± 0,8
FX-5	91,7% ± 4,2	74,7% ± 5,1	91,4% ± 5,8	86,7% ± 7,1	101.0% ± 1,8	95% ± 3,1	94,0% ± 4,5	96,5% ± 2,1
FX-6	72,1% ± 3,9	51,4% ± 7,6	76,6% ± 3,5	67,1 % ± 11,5	93,2% ± 1,6	107,1% ± 4,3	104,6% ± 1,8	97,5% ± 7,2
FX-7	52,1% ± 7,1	25,2% ± 3,7	61,3% ± 11,3	49,4% ± 7,6	96,1% ± 5,5	85,0% ± 3,6	91.4% ± 9,3	84,3% ± 10,3
FX-8	23,3% ± 4,6	14,5% ± 2,2	61,5% ± 8,7	55,8% ± 10,0	97,0% ± 4,5	% ± 1,9	95,2% ± 16,3	92,5% ± 14,0

Биологическая активность изохинолинаминов

Химические структуры вновь синтезированных изохинолинаминов (FX-9, FX-42, FX-43) представлены в. Антиметаболические эффекты соединений оценивали на клетках SEM и Jurkat через 72 часа воздействия ().FX-9 показал самый сильный эффект против обеих клеточных линий. При этом метаболическая активность была снижена до 1,2% в SEM и до 10,4% в Jurkat (оба 5 мкМ). Воздействие 10 мкМ FX-42 снизило метаболическую активность в клетках SEM до 24,5% и в Jurkat до 32,4%. FX-43 не индуцировал значительного воздействия на метаболическую активность в клетках ALL.

Таблица 4.

Влияние соединений изохинолинаминов на метаболическую активность

ID	SEM		Jurkat

	5 мкМ	10 мкМ	5 мкМ	10 мкМ
FX-9	1.2% ± 0,3	0,6% ± 0,2	10,4% ± 0,6	13,6% ± 2,3
FX-42	66,7% ± 0,4	24,5% ± 0,3	88,4% ± 12,6	32,4 % ± 1,0
FX-43	94,7% ± 2,7	94,3% ± 0,6	106,9% ± 6,7	103,6% ± 1,3

FX-соединения не обладают гемолитическим и лейкотоксическим действием

9 Чтобы проверить, были ли наблюдаемые эффекты специфичными для лейкозных клеток, цельную кровь или лейкоциты от шести здоровых доноров инкубировали с 5 мкМ FX-3, -7, -8 или -9 ().Гемолитическую активность FX-соединений определяли по высвобождению гемоглобина из клеток цельной крови после 120 мин инкубации (). Был индуцирован минимальный гемолиз со значениями ниже 20% по сравнению с положительным контролем (= максимальный лизис). Жизнеспособность лейкоцитов анализировали с использованием анализа на основе кальцеина. Воздействие FX-соединений в течение до 72 часов не оказывало значительного влияния на жизнеспособность клеток по сравнению с клетками, обработанными ДМСО (). Количество жизнеспособных клеток было выше 90% во всех образцах.

Анализ гемолиза и лимфотоксичности.(A) Гемолитическую активность FX-соединений (5 мкМ) определяли по высвобождению гемоглобина из клеток цельной крови после 120 мин инкубации. Положительные контроли (= максимальный лизис) обрабатывали 1% SDS. (B) Лейкоциты инкубировали в присутствии FX-соединений (5 мкМ) в течение 48 и 72 часов. Жизнеспособность анализировали с использованием Calcein-AM и количественно сравнивали с контролями, обработанными ДМСО, которые были установлены равными 100%. Результаты показывают данные шести разных здоровых доноров. Эксперименты проводили в трех экземплярах.Значения даны как среднее увеличение в x раз ± стандартное отклонение.

FX-9 влияет на морфологию и индуцирует апоптоз

Кроме того, мы выбрали FX-9 как лучший кандидат и более подробно охарактеризовали соединение в отношении его антипролиферативного потенциала на B- и T-ALL клетки. Таким образом, клетки подвергались воздействию концентраций 0,1–5,0 мкМ в течение 72 часов. Дозозависимый эффект FX-9 на пролиферацию наблюдался в клетках ALL (). FX-9 ингибировал пролиферацию клеток с 50% ингибирующей концентрацией (IC50) в диапазоне от 0.54 мкМ в RS4; 11 клеток до 1,94 мкМ в клетках CEM (). Клеточные линии B-ALL показали значительное ингибирование пролиферации, начиная с концентрации 0,5 мкМ. Пролиферация была значительно снижена до 69,5% в SEM, а также 60,0% в RS4; 11 по сравнению с контрольными клетками (= 100%). В клеточных линиях T-ALL пролиферация была значительно снижена, начиная с концентрации 2,5 мкМ. При этой концентрации пролиферация была подавлена в Jurkat до 16,3% и в CEM до 24,1% по сравнению с контрольными клетками (100%).

FX-9 подавляет пролиферацию клеток и вызывает изменения морфологии ВСЕХ клеток. Клетки B- и T-ALL подвергали воздействию FX-9 и ДМСО в течение до 72 часов для оценки пролиферации, морфологии и гибели клеток. (A) FX-9 значительно ингибировал пролиферацию B- и T-ALL клеток через 72 часа. (B) Морфология клеток оценивалась окрашиванием по Маю-Грюнвальду. Результаты отображаются в качестве примера для RS4; 11 и CEM через 48 часов. Цитоморфология была изменена в обеих клеточных линиях. Обработка FX-9 вызвала обширную цитоплазматическую вакуолизацию (красная стрелка), кариопикноз (черная стрелка), кариорексис (зеленая стрелка) и кариолиз (синяя стрелка).(C) Количество апоптотических и некротических клеток (мертвых клеток) в клеточных линиях B- и T-ALL анализировали с использованием окрашивания аннексином V и пропидием иодидом через 72 часа. FX-9 значительно индуцировал апоптоз во всех клеточных линиях. (D) Вестерн-блоттинг выявил, что апоптоз индуцировался путем каспазы 3, на что указывало повышенное количество расщепленного белка каспазы 3 в SEM и RS4, обработанных FX-9; 11 клеток через 48 часов. Результаты отображаются как среднее значение ± стандартное отклонение трех независимых экспериментов. Звездочка представляет статистически значимое различие между клетками, обработанными FX-9 и ДМСО, с ^* p <0.05.

Таблица 5.

Значения IC50 FX-9 на основе распространения

903 ± 0,01

	SEM	RS4; 11	Jurkat	CEM
0,54 ± 0,02	1,67 ± 0,03	1,94 ± 0,03

Для оценки возможных изменений клеточной морфологии клетки подвергались воздействию 1,0 мкМ или 2,5 мкМ FX-9 в течение 48 ч и анализировались с помощью света. микроскопия после окрашивания по Маю Грюнвальду ().Цитоморфология была изменена в клеточных линиях B- и T-ALL, как показано в качестве примера для клеток RS4; 11 и CEM. Воздействие 1,0 мкМ FX-9 приводило к увеличению количества вакуолей и кариопикноза в RS4; 11. Обширная цитоплазматическая вакуолизация, кариопикноз и кариолиз были индуцированы 2,5 мкМ FX-9 в RS4; 11, а также в клетках CEM.

Чтобы проверить, индуцирует ли FX-9 апоптоз, мы выполнили анализ проточной цитометрии с использованием окрашивания аннексином V и пропидием йодидом. Апоптоз выражается как общее количество раннеапоптотических и поздних апоптозных и некротических клеток.Дозозависимый эффект FX-9 на гибель клеток наблюдался в клетках B- и T-ALL после 72 часов воздействия лекарственного средства (дополнительный рисунок 1). FX-9 значительно индуцировал апоптоз во ВСЕХ линиях клеток по сравнению с клетками, обработанными ДМСО. Апоптоз увеличивался с 5 мкМ FX-9 в SEM до 75,9% против 7,4% (ДМСО), в RS4; 11 до 84,6% против 11,7% (ДМСО), в Jurkat до 48,7% против 18,7% (ДМСО). ), а также в ЦЕМ до 90,4% против 7,3% (ДМСО).

Для дальнейшего изучения того, умирают ли клетки в результате апоптоза, мы исследовали экспрессию каспазы 3 с помощью вестерн-блоттинга.Индукцию апоптоза каспазой 3 анализировали в SEM и RS4; 11 клеток, результаты представлены в. После инкубации в течение 48 часов повышенное количество расщепленной каспазы 3 было индуцировано 2,5 мкМ и 5,0 мкМ FX-9.

FX-9 влияет на передачу сигналов PI3K / AKT и MAPK

Чтобы охарактеризовать эффекты FX-9 на уровне белка, был проведен вестерн-блоттинг. Подробно, передача сигналов PI3K / AKT, JAK / STAT и MAPK была проанализирована в SEM и RS4; 11 клетках (). После инкубации FX-9 в течение до 48 ч экспрессия pAKT, pSTAT3, pERK и p-p38 была изменена.Наиболее сильные эффекты были обнаружены при 48-часовом воздействии FX-9. В клетках SEM FX-9 снижал уровень pAKT, p-p38 и pSTAT3, тогда как в клетках RS4; 11 происходило дозозависимое увеличение pERK.

FX-9 влияет на пути JAK / STAT, MAPK и PI3K / AKT. SEM и RS4; 11 клеток подвергали воздействию ДМСО, 2,5 мкМ или 5,0 мкМ FX-9 в течение 48 часов. Для количественной оценки использовалось программное обеспечение Image Studio Lite (версия 5.2, LI-COR Biotechnology) для определения интенсивности сигналов полос белка. Полосы белка нормализовали к полосе GAPDH соответствующего образца и рассчитывали отношение фосфорилированных форм к соответствующим интенсивностям сигналов общего белка.Значения выражены в виде отношения. ДМСО-контроль рассматривается как значение 1, и образцы измеряли по отношению к контролю. (A) FX-9 снижал уровни p-STAT3 в клетках SEM и увеличивал уровень белка pERK в RS4; 11 (B) FX-9 снижал уровни p-AKT и p-p38 в клетках SEM. Примерные результаты для SEM и RS4; отображаются 11 ячеек. GAPDH использовали в качестве контроля загрузки.

FX-9 не ингибирует активность CK2

FX-9 является аналогом хинолинамина и имеет сходство химической структуры с CX-4945, известным ингибитором фермента CK2.Чтобы исследовать, опосредованы ли эффекты, вызванные FX-9, через ингибирование CK2, мы проанализировали активность фермента CK2, используя люминесцентную систему обнаружения АДФ (). В присутствии 10 мкМ FX-9 активность CK2 существенно не изменилась. Напротив, активность фермента CK2 значительно снизилась с 1 мкМ CX-4945 до 3,4 ± 0,3% по сравнению с ДМСО (100%).

FX-9 не подавляет активность CK2. Рекомбинантный человеческий CK2 инкубировали с субстратом CK2α1, АТФ и увеличивающимися концентрациями FX-9 или CX-4945.Снижение активности фермента CK2 индуцировали 0,1 мкМ CX-4945. При применении FX-9 изменений активности фермента CK2 не наблюдалось. Результаты отображаются как среднее значение и стандартное отклонение трех технических повторов одного эксперимента.

Кроме того, активность других киназ была проанализирована в присутствии FX-9 с использованием радиометрического анализа. Поэтому была выбрана коммерчески разработанная панель человеческих киназ, связанных с MAPK, PI3K / AKT или путем клеточного цикла. Активности определяли против киназ человека на их Km для АТФ и с 2.5 мкМ FX-9. Результаты этого скрининга обобщены в. Воздействие 2,5 мкМ FX-9 не влияло на активность какой-либо из выбранных киназ.

Таблица 6.

Результаты скрининга киназной активности

906 901 Abl

9064 A

9013 9013 9013 9013 9013 9013 9013 9013 901

9013 9013 9013 901 901 906

906

9013 9064 1 9013

9013 9013 9013

903 4513 9013

9020 №

9064

9013 9013 9013 9013

9013 9013

Kinase / p85a)

Киназа	АТФ Km (мкМ)	Киназная активность (% контроля)	SD
2
ALK	200	112	10
AMPKα1	45	98	1
101 ASK3 200	15	92	0
CaMKI	200	100	4
CDK1 / cyclinB	45	97 1		97 1	90	9
CDK6 / cyclinD3	200	103	5
CDK7 / cyclinH / M AT1	90	91	0
CDK9 / циклин T1	45	86	3
CHK1	90	98	5
CK2α2	10	95	9
c-RAF	120	92	1
eEF-2K	15	86	4
EGFR	10	101	3
EphA5	10 10	83	5
Fyn	70	97	7
GSK3β	15	88	5
IGF-1R	200	89	10
IKKα	10	91	1
IRA
JAK2	45	111	4
KDR	90	83	3

9013		101 4	9
MAPKAP-K2	90	87	6
MEK1	10	90	2

84
Mnk2	120	90	11
MSK2	45	89	1
MST1	90	87	2
mTOR	70	100	2
NEK2	120		106	120		106	PKA	10	92	0
PKBα	155	98	4
PKCα	45	99 1		99 1	45	99 1	7
PKG1α	90	98	11
Plk3	70	99	2
PRAK	15	79	4
ROCK-I	70	93	4

Rsk1	45	95	5
SAPK2a	90	98	2
SRPK1	94			94		87	1
Киназа PI3 (p110b / p85a)	200	97	1
Киназа PI3 (p120g)	100	98 2	200	100	1
PI3-киназа (p110a / p85a)	200	101	1

9002 2 ОБСУЖДЕНИЕ

Целью настоящего исследования было оценить биологическую активность одиннадцати вновь синтезированных изоиндолохиназолинонов (от FX-1 до FX-8) и изохинолинаминов (FX-9, FX-42, FX-43) соединений против ОЛЛ клеток человека. .Соединения FX представляют собой азотсодержащие гетероциклические структуры с хинолином, хиназолинонами или индольными каркасами, которые были синтезированы недавно (Shen et al ., 2015, 2016; Feng and Wu, 2016). Эти основные структуры были тщательно исследованы на различных типах неопластических клеток и продемонстрировали антипролиферативную активность (He et al ., 2003; Dadashpour and Emami, 2018; Mphahlele et al ., 2018). Здесь мы впервые изучили эффективность этих новых синтезированных малых молекул в ВСЕХ клетках.

ALL представляет собой гематологическую неоплазию, характеризующуюся клональным накоплением B- или T-лимфобластных клеток-предшественников. Исход пациентов с ОЛЛ зависит от факторов, связанных с заболеванием или пациентом, включая возраст, генетические изменения или иммунофенотип (Terwilliger and Abdul-Hay, 2017). Таким образом, идентификация новых агентов, обладающих противолейкозным потенциалом, по-прежнему актуальна.

В настоящем исследовании две линии клеток B-ALL (SEM и RS4; 11) и две линии клеток T-ALL (Jurkat, CEM) с разным временем удвоения клеток и генетическими изменениями были выбраны в качестве моделей на основе линий клеток для оценки FX-соединения.Эти клеточные линии представляют ВСЕ подтипы, связанные с плохим клиническим исходом. Клетки B-ALL характеризуются перестройкой генов лейкемии смешанных линий (MLL) [t (4; 11)] (Stumpel et al ., 2009), в то время как клеточные линии T-ALL характеризуются сложными аберрантными тетраплоидными кариотипами и многочисленными генетическими мутации (Schneider et al ., 1977; Moore et al ., 1985). Более того, все клеточные линии демонстрируют аберрантно активированный PI3K / AKT (Schult et al ., 2010; Cani et al ., 2015) и сигнальный путь MAPK (Cani et al ., 2015).

Наши результаты показали, что метаболическая активность в клетках B-ALL была более снижена после воздействия изоиндолохиназолинонов, чем в клеточных линиях T-ALL. Наилучшие эффекты были вызваны FX-3, FX-7 и FX-8. Здесь клетки SEM были более чувствительны к этим FX-соединениям, чем клетки RS4; 11. Метаболическая активность была более снижена при применении FX-8. Интересно, что ни FX-3, ни FX-7, ни FX-8 проявляли биологическую активность в клеточных линиях T-ALL Jurkat и CEM.Наши результаты показали, что эти три соединения проявляют антилейкемический потенциал, специфичный для подтипа.

Соединения от FX-1 до FX-8 представляют собой молекулы изоиндоло [1; 2-b] хиназолина-10, которые модифицированы арилгалогенидом (Cl, F) или функциональными группами, такими как ацетильные или метильные группы. Добавление метильной группы или фторида к изоиндолохиназолинонам, по-видимому, влияет на биологическую активность в клетках B-ALL. Таким образом, положение и количество метильных групп потенциально важны, что продемонстрировано FX-4, FX-7 и FX-8.Добавление хлора или ацетильной группы к молекуле изоиндолохиназолинонов (FX-1, FX-3) не влияло на метаболическую активность ВСЕХ клеток. Карки и др. (2009) также продемонстрировали, что модификация хиноксалиновых структур влияет на антилейкемические клеточные эффекты. Авторы показали, что цитостатическая активность зависит от заместителей и их положения. Они определили, что производные хиноксалина с метильными или галогеновыми группами в положении 4 ^-го или 9 ^-го проявляют сильную противораковую активность.

Кроме того, биологическая активность трех изохинолинаминов (FX-9, FX-42, FX-43) оценивалась в отношении ВСЕХ клеток, например, на клетках SEM и Jurkat. Здесь метаболическая активность снижалась дозозависимо с FX-9 и FX-42 в обеих клеточных линиях, и FX-9 проявлял наиболее сильные эффекты. Эффект от метаболической активности FX-43 не наблюдался.

Соединения FX-9, FX-42 и FX-43 характеризуются структурой ядра изохинолинамина, которая связана с модифицированной фенильной группой [(3-8p-толил), 6-метилокс-3фенил или 7-метил-3. -фенил).Наш первый скрининг путем анализа метаболической активности показал, что FX-9 был наиболее активным соединением против B- и T-ALL клеток. Поэтому это соединение было выбрано для более подробной характеристики биологического эффекта.

Интересно, что эффекты, вызванные FX-9, на здоровые клетки крови можно исключить. Здесь не было индуцировано ни цитотоксичности, ни гемолитической активности. Кроме того, наши результаты показали, что антиметаболические эффекты, опосредованные FX-9, в клетках ALL были связаны с ингибированием пролиферации клеток и морфологическими изменениями.Цитоплазматическая вакуолизация, кариопикноз и кариолиз после воздействия FX-9 на B- и T-ALL клетки имели место и были явными признаками апоптоза (Hotchkiss et al ., 2009). Дальнейшие анализы экспрессии фосфатидилсерина на поверхности клеток с использованием окрашивания аннексином V, а также обнаружение расщепленного белка каспазы 3 продемонстрировали, что FX-9 является соединением, индуцирующим апоптоз для ВСЕХ клеток.

FX-9 представляет собой конденсированную кольцевую структуру с двумя молекулами гетероцикла (изохинолинамин, фенильное кольцо).Структура хинолина часто присутствует в ингибиторах многих киназ (Solomon and Lee, 2011). Кроме того, было продемонстрировано, что модифицированные изохинолином структуры обладают высоким сродством к ДНК (Musiol, 2017).

Одной из таких молекул на основе хинолина является CX-4945. CX-4945 блокирует активность CK-2 и сильно подавляет передачу сигналов PI3K / AKT, JAK / STAT и NFkB (Chon et al ., 2015). Гефитиниб также имеет хинолиновую составляющую. Гефитиниб является селективным ингибитором рецептора эпидермального фактора роста (EGFR), который предотвращает последующую активацию нижестоящих сигнальных каскадов, которые стимулируют пролиферацию, дифференциацию, выживание и миграцию клеток (Rahman et al ., 2014). Оба препарата одобрены как ингибиторы типа I и конкуренты АТФ, которые связываются с активной конформацией киназы в кармане АТФ (Cozza et al ., 2012; Wu et al ., 2015).

Мы предположили, что FX-9-опосредованные эффекты на ALL-клетки также можно объяснить сильным ингибированием дисрегулируемой передачи сигналов. Мы и другие показали, что ВСЕ клетки могут быть эффективно нацелены на специфическое ингибирование PI3K, mTOR или CK2 (Schult et al ., 2012; Neri et al ., 2014; Buontempo et al ., 2017). Фактически, наши результаты показали, что FX-9 не подавлял напрямую активность фермента CK2, как мы предполагали. Однако были обнаружены изменения в экспрессии ключевых сигнальных белков, таких как pAKT, pSTAT3, pERK или p-p38, но модуляция белков была гетерогенной между клетками SEM и RS4; 11. В клетках SEM FX-9 снижал передачу сигналов pAKT и pSTAT3, тогда как в клетках RS4; 11 происходило дозозависимое увеличение pERK. Обе клеточные линии демонстрировали разный базальный уровень pERK и pSTAT3.Следовательно, возможно, что передача сигналов изменяется через активацию петель обратной связи после воздействия FX-9.

Кроме того, мы стремились найти конкретную мишень для FX-9, выполнив скрининг активности киназ на панели из 58 ключевых киназ для выявления рака. Наши результаты показали, что ни один из протестированных ферментов не ингибировал свою активность. На основании этих результатов нельзя однозначно исключить, что FX-9 является ингибитором киназ. Геном человека кодирует 568 протеинкиназ, и большинство из них связано с инициацией и прогрессированием рака (Ardito et al ., 2017). В нашем исследовании мы проанализировали активность только 58 киназ.

Однако было также показано, что биоактивность структур на основе хинолина является результатом связывания ДНК и последующего ингибирования ДНК-зависимых ферментов, например, топоизомераз (Musiol, 2017). Следовательно, цитотоксичность, связанная с FX-9, также может быть объяснена интеркаляцией ДНК, и это должно быть уточнено в будущих исследованиях.

В заключение, ряд вновь синтезированных соединений изоиндолохин-азолинон и изохинолинамин был впервые проанализирован на предмет их противолейкемической активности.Результаты показали, что соединение 3- (п-толил) изохинолин-1-амин, названное FX-9, показало самый сильный антипролиферативный потенциал в отношении ВСЕХ клеток и не проявило цитотоксичности в отношении здоровых клеток крови. На основании этих результатов следует провести дальнейшие исследования для детального изучения механизмов действия. Кроме того, соединения из этой серии могут служить в качестве шаблонов для будущего дизайна новых соединений и в качестве базовой структуры для подходов к модификации.

СЕК.gov | Превышен порог скорости запросов

Чтобы обеспечить равный доступ для всех пользователей, SEC оставляет за собой право ограничивать запросы, исходящие от необъявленных автоматизированных инструментов. Ваш запрос был идентифицирован как часть сети автоматизированных инструментов за пределами допустимой политики и будет обрабатываться до тех пор, пока не будут приняты меры по объявлению вашего трафика.

Укажите свой трафик, обновив свой пользовательский агент, включив в него информацию о компании.

Для лучших практик по эффективной загрузке информации из SEC.gov, включая последние документы EDGAR, посетите sec.gov/developer. Вы также можете подписаться на рассылку обновлений по электронной почте о программе открытых данных SEC, включая передовые методы, которые делают загрузку данных более эффективной, и улучшения SEC.gov, которые могут повлиять на процессы загрузки по сценарию. Для получения дополнительной информации обращайтесь по адресу [email protected].

Для получения дополнительной информации см. Политику конфиденциальности и безопасности веб-сайта SEC. Благодарим вас за интерес к Комиссии по ценным бумагам и биржам США.

Идентификатор ссылки: 0.5dfd733e.1631992912.86e60b49

Дополнительная информация

Политика безопасности в Интернете

Используя этот сайт, вы соглашаетесь на мониторинг и аудит безопасности. В целях безопасности и обеспечения того, чтобы общедоступная услуга оставалась доступной для пользователей, эта правительственная компьютерная система использует программы для мониторинга сетевого трафика для выявления несанкционированных попыток загрузки или изменения информации или иного причинения ущерба, включая попытки отказать пользователям в обслуживании.

Несанкционированные попытки загрузить информацию и / или изменить информацию в любой части этого сайта строго запрещены и подлежат судебному преследованию в соответствии с Законом о компьютерном мошенничестве и злоупотреблениях 1986 года и Законом о защите национальной информационной инфраструктуры 1996 года (см. Раздел 18 U.S.C. §§ 1001 и 1030).

Чтобы обеспечить хорошую работу нашего веб-сайта для всех пользователей, SEC отслеживает частоту запросов на контент SEC.gov, чтобы гарантировать, что автоматический поиск не влияет на возможность доступа других лиц к контенту SEC.gov. Мы оставляем за собой право блокировать IP-адреса, которые отправляют чрезмерное количество запросов. Текущие правила ограничивают пользователей до 10 запросов в секунду, независимо от количества машин, используемых для отправки запросов.

Если пользователь или приложение отправляет более 10 запросов в секунду, дальнейшие запросы с IP-адреса (-ов) могут быть ограничены на короткий период.Как только количество запросов упадет ниже порогового значения на 10 минут, пользователь может возобновить доступ к контенту на SEC.gov. Эта практика SEC предназначена для ограничения чрезмерного автоматического поиска на SEC.gov и не предназначена и не ожидается, чтобы повлиять на людей, просматривающих веб-сайт SEC.gov.

Обратите внимание, что эта политика может измениться, поскольку SEC управляет SEC.gov, чтобы гарантировать, что веб-сайт работает эффективно и остается доступным для всех пользователей.

М | Медицинский центр «Сердолик»

Специфическая профилактика (Вакцинация и ревакцинация БЦЖ)

Вакцинация БЦЖ

Противопоказания к вакцинации новорожденных

Ревакцинация БЦЖ

Противопоказания к ревакцинации БЦЖ

Bolnica

Ученые опровергли все мифы о туберкулезе

Контактируют, но не заболевают

Пора ли отменять Манту

Выход есть

Туберкулинодиагностика: проба Манту, Диаскинтест

Об услуге

Реакция Манту (туберкулиновая проба, «пуговка») и Диаскинтест у детей

Реакция Манту, Диаскинтест — что это такое, прививка или нет, стоит ли родителям и детям бояться этих тестов? И в чем их отличие?

Итак, реакция Манту – это не прививка. А что показывает реакция Манту?

Правила проведения реакции Манту:

Противопоказания:

Диаскинтест

Диаскинтест отвечает только на один вопрос: есть или нет тубифицированность.

Важно:

Центр вакцинации Династия проводит следующие виды туберкулинодиагностики у детей:

Реакция Манту (туберкулиновая проба, «пуговка») и Диаскинтест у взрослых

Правила проведения реакции Манту или Диаскинтеста:

Противопоказания:

Важно:

Центр вакцинации Династия проводит следующие виды туберкулинодиагностики у взрослых:

Реакция Манту в Одинцово и Звенигороде: сделать прививку манту взрослым и ребенку

Что показывает проба?

Реакция Манту: норма

Реакция Манту у взрослых

Где сделать туберкулиновую пробу?

Нет следа от БЦЖ — результаты пробы Манту

Вакцина БЦЖ от туберкулеза

Реакция на пробу Манту и ранняя диагностика туберкулеза

Симптомы туберкулеза у детей

БЦЖ, манту и холодовая цепь. Воронежские врачи развеяли мифы о прививках и диагностике . Последние свежие новости Воронежа и области

Суждение 1: «В советское время так много прививок не делали»

Суждение 2: «Ребенка заражают, вводя вирус»

Суждение 3: «Прививку БЦЖ нельзя делать новорожденному»

Суждение 4: «Проба Манту устарела»

Суждение 5: «После вакцинации бывают реакции и осложнения»

Суждение 6: «Вакцины неправильно хранят»

Суждение 7: «Перед поездкой в экзотическую страну нужно сделать прививку»

Убежище в Резиденции Болина Цивински Джексона | by Bohlin Cywinski Jackson

Бакалавр коммуникаций и журналистики (BCJ) Прием в Индии

Обзор

Право на участие и продолжительность курса

Подробнее о курсе

Возможности трудоустройства

Зачисление в бакалавриат коммуникаций и журналистики (BCJ) на 2021-2022 учебный год

Новые соединения изохинолинамина и изоиндолохиназолинона проявляют антипролиферативную активность в клетках острого лимфобластного лейкоза

Реферат

ВВЕДЕНИЕ

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Соединения

Таблица 1.

Таблица 2.

Клеточные линии и эксперименты на клеточных культурах

Анализ гемолиза

Анализ жизнеспособности клеток на лейкоцитах человека

Анализ активности киназы CK2

Скрининг киназной активности

Вестерн-блот

Статистический анализ

РЕЗУЛЬТАТЫ

Биологическая активность изоиндолохиназолинонов

Таблица 3.

Биологическая активность изохинолинаминов

Таблица 4.

FX-соединения не обладают гемолитическим и лейкотоксическим действием

FX-9 влияет на морфологию и индуцирует апоптоз

Таблица 5.

FX-9 влияет на передачу сигналов PI3K / AKT и MAPK

FX-9 не ингибирует активность CK2

Таблица 6.

СЕК.gov | Превышен порог скорости запросов

Дополнительная информация

Политика безопасности в Интернете

Добавить комментарий Отменить ответ