Антитела к гепатиту с положительные: Вирусный гепатит С. Анализы для первичного выявления заболевания. Обследование контактных лиц

Содержание

H-Clinic Экспертная помощь при инфекционных заболеваниях

15.05.2020

Гепатит С – это вирусная инфекция, которая поражает печень. Проявления ее могут быть очень разнообразными – от нетяжелого заболевания, которое проходит без лечения через несколько недель, до серьезной, хронической болезни, которая без специальной терапии может приводить к развитию цирроза печени и гибели пациента. В то же время хронический гепатит С нередко длительное время протекает бессимптомно, и человек может даже не подозревать о наличии у него данного заболевания.

Чтобы выявить максимальное число людей, зараженных вирусом, в нашей стране проводится скрининговое обследование разных групп населения на гепатит С. Это исследование крови на антитела, его также называют исследование – anti-HCV. Скрининговое обследование – это диагностическая процедура, которая позволяет с высокой степенью вероятности исключить болезнь среди людей, у которых нет явных симптомов. Иными словами, это лабораторный или инструментальный метод, который позволяет быстро, эффективно и недорого обследовать большое количество людей, которые не имеют жалоб, для того чтобы на ранних стадиях выявить заболевание, и излечить его в более короткие сроки и с лучшими результатами. Подобным примером является флюорографический скрининг взрослых для выявления заболеваний легких (в первую очередь, туберкулеза).

Однако подобные скрининговые методы, как правило, не являются окончательными в постановке диагноза, и требуют дальнейшего дообследования. В случае с гепатитом С таким уточняющим анализом является определение РНК вируса гепатита С в крови, который позволяет выявить непосредственно сам вирус, вернее, его генетический материал.

Как мы уже неоднократно упоминали в нашем блоге, просто наличие антител не является основанием для установления диагноза в случае с большинством инфекций. Дело в том, что антитела образуются как защитная реакция организма на проникновение чужеродного агента, и могут сохраняться очень длительное время даже после выздоровления. Таким образом, человек, у которого при скрининговом обследовании обнаружены антитела к гепатиту С, может и не иметь вируса в крови, а значит и самого заболевания. Такое возможно, если заболевание было перенесено в острой форме и иммунитет смог без помощи лекарств самостоятельно избавиться от вируса. Самовыздоровление от вирусного гепатита С, к сожалению, происходит достаточно редко – около 15-20% от всех случаев заражения вирусом. Также положительный анализ на anti-HCV антитела обычно длительно сохраняется у людей, излечившихся от гепатита после получения курса противовирусных препаратов. Для того, чтобы уточнить, присутствует ли до сих пор вирус в организме пациента врач и назначает анализ – ПЦР РНК вируса гепатита С. Выявление в крови РНК вируса гепатита С будет говорить о наличии активно протекающего заболевания, которое требует начала специфической терапии.

Кровь на РНК можно исследовать качественным методом и количественным. В соответствии с названием, качественный метод отвечает только лишь на вопрос, присутствует ли вирус в организме; при исследовании же количественным методом мы получаем информацию, сколько именно единиц вируса содержится в 1 мл крови, то есть можем судить о том, насколько активно размножается вирус.

Дополнительно к анализу на РНК ВГС перед лечением также рекомендуется определение генотипа вируса. Вирус гепатита С имеет 6 генотипов и большое число подтипов. В нашей стране наиболее распространены первые генотипы 1, 2 и 3. Основная информация, которую дает врачу результат данного анализа, — к каким препаратам вирус чувствителен, то есть определяет выбор правильной схемы лечения. Конечно, в наше время существуют уже и так называемые «пангенотипические» схемы, которые эффективны против всех генотипов вируса. Однако в случае, если генотип вируса известен, количество схем, из которых можно выбирать наиболее подходящую каждому конкретному пациенту (с учетом сопутствующих заболеваний и других лекарственных препаратов, которые тот принимает), существенно расширяется. Также данный результат дает дополнительную информацию при дальнейшем наблюдении за пациентом. В случае, если после проведенного курса терапии вновь выявляется вирус, можно с большей вероятностью выяснить, является ли это неудачей лечения или повторным заражением. Именно поэтому в современных рекомендациях по лечению гепатита С – как в Европе, так и в Америке рекомендуется проводить генотипирование до начала терапии.

Помимо обследования до начала терапии, анализ на ПЦР РНК ВГС необходим для суждения об исходах лечения. Как уже упоминалось, анализ на anti HCV (антитела к вирусу гепатита С) в этом случае, наиболее вероятно, будет сохраняться положительным, и значит, не несет никакой ценной информации для врача. Критерием же полного излечения является отсутствие вируса в крови через 12 недель после проведенного курса терапии.

Хотелось бы отметить, что, если у вас в крови обнаружены антитела к гепатиту С, даже в случае абсолютно нормального самочувствия, необходимо обратиться к врачу для дообследования. Вялотекущее воспаление в печени рано или поздно приводит к перестройке ее ткани, ухудшению функции и, в конце концов, к развитию цирроза. Существующие же в наше время схемы терапии гепатита С позволяют в достаточно короткие сроки (обычно за 3 месяца), с минимальной вероятностью побочных эффектов и высокой эффективностью избавиться от вируса. Именно поэтому лечение хронического гепатита С в настоящее время рекомендуется всем пациентам с достоверно установленным диагнозом.

Автор: врач-инфекционист Университетской клиники H-Clinic Дегтярёва Светлана Юрьевна.

Медицинский редактор: руководитель Университетской клиники, к.м.н., врач-инфекционист Коннов Данила Сергеевич.

Возврат к списку

Антитела к вирусу гепатита С, IgG (иммуноблот)

Высокоспецифичное исследование, использующееся для верификации положительных результатов скрининговых тестов на наличие антител к вирусу гепатита С.

Метод позволяет выполнять раздельную оценку наличия специфических IgG антител к различным антигенам вируса гепатита С (структурным нуклеокапсидным: Cor-1 и Cor-2 и неструктурным: хеликаза, NS3, NS4, NS5). Используется в качестве подтверждающего исследования для уточнения неясных результатов скрининговых ИФА тестов, направленных на суммарную оценку наличия антител к вирусу гепатита С. Первый шаг в лабораторной диагностике гепатита С – скрининговое исследование на наличие специфических антител к вирусу методом иммуноферментного анализа (ИФА) (см. тест № 79). Положительный результат теста на антитела, полученный при первичном тестировании, подлежит обязательной перепроверке в дополнительных более специфичных исследованиях, чтобы исключить ненужные медицинские исследования и лишние психологические травмы. Этот тест, как и другие ИФА-тесты, может иногда давать ложноположительный результат вследствие перекрёстных реакций и неспецифического связывания, определяющихся индивидуальными особенностями сыворотки пациента. Технологии скрининговых и подтверждающих тестов в разных лабораториях часто различаются, в некоторых случаях результаты, полученные в разных лабораториях, расходятся. При выявлении у обследуемого человека антител к вирусу, которые могут присутствовать в крови как при текущей инфекции, так и после выздоровления, далее наиболее важно, в клиническом плане, подтвердить или исключить текущую инфекцию. Для этого служат ПЦР-тесты, выявляющие РНК вируса в крови (см. тесты № 321 и № 323). Положительный результат ПЦР-тестирования означает присутствие вируса гепатита С в крови, дополнительное определение генотипа вируса (см. тест № 324) помогает определить тактику лечения пациента. Отрицательный результат ПЦР-теста говорит об отсутствии вируса в крови в момент взятия пробы, что может быть как в случае, если инфицирования данным вирусом не было, так и в случае избавления от вируса после инфекции в прошлом (спонтанно или в результате лечения) или временного подавления репликации вируса.

Поэтому в случаях, когда результат теста на антитела положителен, а результат ПЦР-теста на РНК вируса отрицателен, человек рассматривается как потенциально инфицированный, и в этих ситуациях особенно важно, в том числе и психологически, убедиться в достоверности результатов определения антител.

Верифицировать результаты определения антител скрининговых ИФА-тестов помогает высокоспецифичное развёрнутое исследование антител методом иммуноблота, которое позволяет не только выявить, но также и идентифицировать антитела, направленные против определённых структурных и неструктурных компонентов вируса гепатита С, имеющих разную значимость.

Как и ИФА-тесты, этот метод информативен, в среднем, начиная с 3 — 4 недели инфекции – период появления в крови специфических антител.

Исключения:

«диагностическое окно» в течение инкубационного периода и очень ранней острой фазы, когда иммунный ответ задерживается, поскольку вирусная нагрузка очень мала;
иммуносупрессированные пациенты;
новорождённые с перинатальной инфекцией (нетипичная картина связанная с антителами матери).

Подтверждение инфекции вирусом гепатита С в этих ситуациях возможно лишь положительным результатом при повторных исследованиях вирусной РНК методом ПЦР.

Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи. С общими рекомендациями для подготовки к исследованиям можно ознакомиться здесь >>.

Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Способ представления результата: на бланке результата отражен результат выявления антител к используемым антигенам, раздельно для Cor-1 и Cor-2, хеликаза, NS3, NS4, NS5 (отрицательный/сомнительный/положительный). Выдаётся общее заключение, сделанное на основании комплексной оценки результатов.
Отрицательный результат иммуноблота: человек не был инфицирован вирусом гепатита С (результат скрининговых ИФА тестов – ложноположительный).

Исключения:

«диагностическое окно» в течение инкубационного периода и очень ранней острой фазы, когда иммунный ответ задерживается, поскольку вирусная нагрузка еще очень мала;
иммуносупрессированные пациенты;
новорождённые с перинатальной инфекцией (нетипичная картина связанная с антителами матери).

В этих случаях подтверждение инфекции вирусом гепатита С возможно только с помощью повторных ПЦР-исследований.

Положительный результат иммуноблота: была инфекция вирусом гепатита С.
Сомнительный результат: возможно, была инфекция вирусом гепатита С.

Гепатит

Гепатит «С»

Лабораторная диагностика вирусного

гепатита „С” в нашей лаборатории.

       Гепатит С является инфекцией, возбудитель
которой распространяется среди людей исключительно путем абиогенной
«кровяной» трансмиссии. Вирусом гепатита С (HCV) инфицировано около 3%
населения Земного шара и фактически речь идет о пандемии. После резкого
снижения количества случаев гемотрансфузионного гепатита С (благодаря
антивирусному контролю донорской крови) инфицированность поддерживается
за счет парентеральных инъекций наркотиков и других процедур, связанных
с повреждением кожи и слизистых оболочек. Вирус гепатита «С» при
попадании в организм поражает клетки печени и в 50-80% случаев заражение
ведет к персистенции вируса, которая служит главной причиной
хронического гепатита и его тяжелейших осложнений — цирроза и первичного
рака печени.
      В ответ на попадание в организм человека
инородных частиц, таких, как вирусы, иммунная система вырабатывает
иммуноглобулины — защитные антитела. Эти антитела выявляют специальным
анализом методом ИФА, скрининговым исследованием, используемым для
установления факта инфицирования человека вирусом гепатита С.
Антитела бывают двух классов — G и M, что в анализах пишется, как IgG и
IgM (Ig – immunoglobulin (иммуноглобулин) — это латинское название
антител). Anti-HCV total (anti-НСV, анти-hcv) — суммарные антитела
(классов IgG и IgM) к антигенам вируса гепатита C. Тест на определение
этих маркеров проводится всем пациентам, когда хотят проверить, есть ли
у них гепатит С.
      На основе гомологии нуклеотидных
последовательностей РНК предложено дифференцировать 6 основных генотипов
и более сотни субтипов, обозначаемых латинскими буквами в порядке их
открытия (1а, 1b, 1с, 2а, 2b, 2с, 3а и т.д.). Определение генотипа имеет
большое значение для предсказания эффективности антивирусной терапии,
прогноза тяжести и исхода заболевания. Кроме прогностических целей,
расшифровка генотипа интересна в плане этиологии инфекции.
Частота выявления анти-HCV среди PHK-HCV позитивных образцов крови
приближается к 100%. На фоне хронической инфекции антитела выявляются
постоянно, а после элиминации вируса сохраняются (прежде всего
анти-Core) в течение 4-8 и более лет. Поэтому формальное наличие
анти-HCV не всегда говорит о присутствии вируса в организме и не
позволяет судить об активности процесса. Примерно у 5% больных
хроническим гепатитом С PHK-HCV может обнаруживаться при отсутствии
анти-HCV. Для суждения о вирусной нагрузке, активности HCV-репликации,
риске хронизации, разграничении острого и хронического гепатита,
длительности инфекционного процесса и степени поражения печени
целесообразно использовать определение спектра, а также наблюдать за их
количественной и качественной динамикой.
Было показано, что наличие в сыворотке анти-HCV Core является достаточно
надежным маркером вирусной репликации.

     Трактовка полученных
результатов .
Anti-HCV присутствуют как при остром (они могут обнаруживаться уже с 4 —
6 недели после инфицирования), так и при хроническом гепатите, также
встречаются у тех, кто переболел гепатитом С и выздоровел
самостоятельно. У таких людей данный маркер может обнаруживаться в
течение 4 — 8 и более лет после выздоровления. Поэтому положительный
анализ на anti-HCV не является достаточным для того, чтобы установить
диагноз. На фоне хронической инфекции суммарные антитела выявляются
постоянно, а после успешного лечения сохраняются длительное время
(прежде всего за счет anti-HCV core IgG, о них написано ниже), при этом
их титры постепенно снижаются.
Важно знать, что антитела к гепатиту С не защищают от развития
HCV-инфекции и не обеспечивают надежного иммунитета против повторного
инфицирования.
     Anti-HCV core IgG
—антитела класса G к ядерным (core) белкам HCV
появляются с 11-12 недели после инфицирования, поэтому для диагностики
возможных «свежих» случаев инфицирования используют Anti-HCV
(суммарные), которые появляются раньше, достигают пика концентрации к 5
— 6 месяцу с момента инфицирования и при хроническом течении болезни
выявляются в крови пожизненно. При перенесенном гепатите С титр антител
cor класса IgG постепенно снижается и может достигнуть неопределяемых
величин через несколько лет после выздоровления.
    Anti-HCV IgM
—антитела класса IgM к антигенам вируса гепатита C. Anti-HCV
IgM могут определяться в крови уже через 4-6 недель после инфицирования,
их концентрация быстро достигает максимума. После завершения острого
процесса уровень IgM падает и может повышаться вновь во время
реактивации инфекции, поэтому принято считать, что эти антитела являются
признаком острой инфекции или хронической с признаками реактивации. При
остром гепатите С длительное обнаружение антител класса М, является
фактором, прогнозирующим переход заболевания в хроническую форму.
Считается, что обнаружение anti-HCV IgM может отражать уровень виремии и
активность гепатита С, однако не всегда при реактивации хронического
вирусного гепатита «С» anti-HCV IgM выявляются. Также есть случаи, когда
при хроническом гепатите С в отсутствии реактивации обнаруживаются
anti-HCV IgM.
Спектр anti-НСV (core, NS3, NS4, NS5) — это специфические антитела к
отдельным структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С. Их
определяют для суждения о вирусной нагрузке, активности инфекции, риске
хронизации, разграничении острого и хронического гепатита, степени
поражения печени. Обнаружение антител к каждому из антигенов имеет
самостоятельное диагностическое значение. Anti-HCV состоят их
структурных (core) и неструктурных (NS3, NS4, NS5) белков (протеинов).
     Anti-NS3
выявляются на самых ранних этапах сероконверсии. Высокие титры anti-NS3
характерны при остром гепатите С и могут являться самостоятельным
диагностическим маркером острого процесса. При остром процессе высокая
концентрация anti-NS3 обычно свидетельствует о значительной вирусной
нагрузке, а длительное сохранение их в острой фазе связано с высоким
риском хронизации инфекционного процесса.
Anti -NS4 и anti-NS5, как правило, появляются в более поздние сроки. При
хроническом вирусном гепатите «С» определение anti-NS4 в высоких титрах
может свидетельствовать о длительности инфекционного процесса и, по
некоторым данным, имеет связь со степенью поражения печени. Выявление
anti-NS5 в высоких титрах часто свидетельствует о присутствии вирусной
РНК, а в острой стадии является предиктором хронизации инфекционного
процесса. Снижение титров NS4 и NS5 в динамике может являться
благоприятным признаком, указывающим на формирование
клинико-биохимической ремиссии. Титры anti-NS5 могут отражать
эффективность противо-вирусной терапии, причем их повышенные значения
характерны для лиц, не отвечающих на терапию. После выздоровления титры
anti-NS4 и anti-NS5 снижаются с течением времени.

Вирус
гепатита С (HCV) качественно, ПЦР.
Определяется РНК вируса гепатита С в крови. Положительный результат
свидетельствует о репликации вируса. При положительном результате должно
проводиться количественное исследование, чтобы определить степень
виремии. Метод выбора — так называемый “Real time” ПЦР. РНК вируса
необходимо определять в случае положительного результата исследования на
антитела, кроме того, и при отрицательном результате, если подозревается
гепатит С (особенно в случае диализных пациентов). Исследование на РНК
вируса гепатита С показано для новорожденных, рождённых от матерей
больных гепатитом С. Так как у новорожденных в крови могут определяться
материнские антитела, по этой причине обнаружение антител к HCV не может
использоваться у этой категории пациентов.

Вирус гепатита С (HCV) количественно, ПЦР.
Исследование проводится для определения вирусной нагрузки.
Вирус гепатита С (HCV) (генотипирование), ПЦР.
Определяется генотип вируса для выбора схемы лечения. В настоящее время
в лабораторной практике определяется 5 генотипов.
Несмотря на высокую специфичность, современные ИФА-системы не
гарантированы от гипердиагностики, т.е. от ложноположительных
результатов. Для их исключения также требуется динамическая оценка на
основе индикации анти-HCV к дискретным антигенам.
Наряду с ложноположительными возможны и ложноотрицательные результаты,
когда анти-HCV антитела не удается обнаружить, несмотря на присутствие
вируса в организме.

Медицинские анализы — HCV суммарные ат (качественно) анализ в Сочи

Hepatitis C

— метод диагностики инфицированности гепатитом С посредством обнаружения в крови одновременно антител класса IgG и IgM (суммарных специфических антител, образующихся к белкам вируса гепатита С методом ИФА-иммуноферментный анализ). В норме антитела к вирусу гепатита С в крови отсутствуют. Основные показания к назначению: подозрение на вирусный гепатит, повышение активности печеночных ферментов, лица, входящие в группу риска — частые инъекции, переливания крови, наркомания, подготовка к операции, планирование беременности.

Возбудителем гепатита С является РНК-содержащий вирус. Ранее его называли «гепатит ни А ни В». Вирус передается через кровь и половым путем. Инкубационный период составляет от 2 недель до 6 месяцев. Хронический вариант течения гепатита С (хронический активный гепатит), наблюдаемый у значительной части больных, достигает 50% и часто развивается в цирроз печени.

Вирус гепатита С человека в своем составе содержит ряд белков, к которым образуются антитела. Это нуклеокапсидный белок (сердцевинный), оболочечный Е1, белки — NS1, NS2, NS3, NS4, NS5. К этим белкам и образуются антитела, которые можно обнаружить в сыворотке крови.

Появление суммарных антител к вирусу гепатита С у человека характеризуется вариабельностью, но в среднем продукция антител начинается с 3-6 недель после инфицирования. Первыми, с 3-6 недель заболевания, начинают образовываться антитела класса IgM. Через 1,5-2 месяца начинается заметная выработка антител класса IgG, достигая максимума концентрации к 3-6 месяцу заболевания. Этот вид антител может обнаруживаться в сыворотке крови годами. Следовательно, обнаружение суммарных антител позволяет провести диагностику гепатитом С начиная с 3-6 недель и более после инфицированности. Следует учитывать, что обнаружение антител класса IgM и IgG в такой трактовке метода (ИФА) является исследовательским, а потому недостаточным для постановки диагноза вирусного гепатита С и требует подтверждения методом иммуноблота (Western-blot). Учитывая чувствительность современных тест-систем (метод ИФА) проводить исследование рекомендуется не раньше 4-6 недель после возможного инфицирования.

РЕФЕРЕНТНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ

В норме антитела к гепатиту С не обнаруживаются.

Положительный результат

1). Острый гепатит С.

2). Хронический гепатит С.

3). Период выздоровления.

Отрицательный результат

1). Отсутствие инфицирования.

2). Отсутствие антител к вирусу гепатита С в следующих случаях: начало инкубационного периода и серонегативное течение болезни.

Определение суммарных антител классов M и G (anti-HCV IgG и anti-HCV IgM) к вирусу гепатита C (Hepatitis C virus) в крови

Суммарные антитела к вирусу гепатита С (HCV) представляют собой антитела классов IgM и IgG, направленные к комплексу структурных и неструктурных белков HCV. Это исследование является скрининговым для выявления HCV- инфицированных пациентов.
Антитела появляются в первые 2 недели заболевания и свидетельствуют о возможной инфицированности вирусом или перенесённой инфекции. Анти-HCV могут сохраняться в крови реконвалесцентов на протяжении 8−10 лет с постепенным снижением их концентрации. При хроническом ВГС антитела определяются постоянно и в более высоких титрах.

В соответствии с санитарно-эпидемиологическими правилами С.П. 3.1.3112-13 «Профилактика вирусного гепатита С» (утвержденными постановлением главного государственного санитарного врача РФ от 22 октября 2013 года № 58, введенными в действие 16 мая 2014 года) при положительном результате скринингового исследования в лаборатории «Садко» проводится подтверждающий тест — определение расширенного спектра антител класса IgG, IgM к структурным (core) и неструктурным белкам (NS3+NS4+NS5) вируса гепатита С.

Общая информация об инфекции

Гепатит — это вирусное заболевание, наиболее часто протекающее в виде посттрансфузионного гепатита с преобладанием безжелтушных и лёгких форм и склонное к хронизации процесса. Возбудитель — РНК-содержащий вирус из семейства Flaviviridae, который поражает клетки печени и вызывает гепатит. Среди всех возбудителей вирусных гепатитов у ВГС наибольшее количество вариаций, а благодаря высокой мутационной активности он способен избегать защитных механизмов иммунной системы человека. На основе филогенетического анализа выделено 6 генотипов HCV и более 80 субтипов, которые имеют разные значения для прогноза заболевания и эффективности противовирусной терапии.
У 40−75% пациентов регистрируют бессимптомную форму болезни, у 50−75% больных острым ВГС формируется хронический гепатит, у 20% из них развивается цирроз печени.
Основной путь передачи инфекции – через кровь (при переливании элементов крови и плазмы, пересадке донорских органов, через нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга). Вероятна передача вируса при половом контакте и от матери ребенку во время родов, но это происходит реже.
Отличительная черта ВГС — волнообразное течение заболевания, в котором выделяют три фазы: острую, латентную и фазу реактивации:
для острой фазы характерно повышение активности печёночных ферментов в сыворотке крови, нарастание титров антител классов IgM и IgG к нуклеокапсидному белку (core) вируса гепатита С, а также наличие РНК вируса в крови больного;
латентная фаза характеризуется отсутствием клинических проявлений, наличием в крови высоких титров антител класса IgG к структурному белку (core) вируса гепатита С и неструктурным белкам (NS3, NS4, NS5), отсутствием антител класса IgM и РНК вируса, либо их присутствием в низких концентрациях на фоне незначительного повышения активности печёночных ферментов в периоды обострения;
для фазы реактивации характерно появление клинических признаков, повышение активности печёночных ферментов, наличие антител класса IgG к структурному белку (core) вируса гепатита С и неструктурным белкам (NS3, NS4, NS5), присутствие РНК вируса и нарастание титров антител класса IgM в динамике.
Показания для назначения данного исследования:

клинические признаки вирусного гепатита и повышение уровня печеночных ферментов;
подготовка к оперативному вмешательству;
планирование беременности;
обследование людей из группы риска по заражению ВГС.

Литература:
1. Кишкун А.А. Иммунологические исследования и методы диагностики инфекционных заболеваний в клинической практике. — М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2009. С. 387-402.
2. Санитарно-эпидемиологические правила С.П. 3.1.3112-13 «Профилактика вирусного гепатита С» (утвержденны постановлением главного государственного санитарного врача РФ от 22 октября 2013 года № 58, веденны в действие 16 мая 2014 года).
3. Санитарно-эпидемиологические правила СП 3.1.958-99 « Профилактика вирусных гепатитов. Общие требования к эпидемиологическому надзору за вирусными гепатитами» ( утверждены постановлением Главного государственного санитарного врача РФ от 1 февраля 2000 года, введены в действие 1 июля 2000 года).
4. Ющук Н.Д., Климова Е.А., Знойко О.О. и др. Вирусные гепатиты. Клиника. Диагностика. Лечение. — М.: «ГЭОТАР-Медиа», 2014.

Вирус гепатита С (скрининг, анти-HCV, подтверждающий тест-маркерный спектр)

Вирус гепатита С (ВГС) является одной из основных причин хронических заболеваний печени во

всем мире. В настоящее время абсолютно очевидны серьезные проблемы, связанные с данной инфекцией: высокая частота формирования хронических форм, бессимптомное течение, манифестация заболевания на поздних стадиях (цирроз печени), четкая ассоциация с развитием гепатоцеллюлярной карциномы. Ассамблея ВОЗ в 2016 г. определила глобальную стратегию по борьбе с вирусными гепатитами, предполагающую элиминацию этих инфекций к 2030 г. Важнейшими целями этой программы, принятой 194 странами мира, являются сокращение числа новых случаев заражения вирусными гепатитами на 90% и числа случаев смерти от него на 65% по сравнению с уровнем 2016 г.

Актуальность проблемы объяснима еще и фактом выявления значительной частоты коинфекции ВГС и вирусом гепатита В (ВГВ). Маркеры вируса гепатита В (ВГВ) обнаруживаются у пациентов с ХГС в 22% случаев, что определяет важность вакцинации больных ХГС без коинфекции ВГВ против вирусного гепатита В. Установлена низкая частота перинатальной передачи ВГС от матерей с ХГС детям (3,5%), в то время как у женщин с сочетанием ХГС и ВИЧ-инфекции перинатальная передача ВГС составляет 14–16%.

Группы риска по заражению ВГС: медицинские работники; лица, использующие инъекционные наркотики; пациенты с ВИЧ; лица, которым были сделаны татуировки с помощью нестерильных инструментов; пациенты, получающие переливание крови или ее компонентов до 1992 г., пациенты отделений гемодиализа, дети, рождённые от матерей с ВГС.

Большинство пациентов с ОГС не демонстрируют каких-либо симптомов заболевания, у некоторых из них наступает спонтанная элиминация вируса, с которой ассоциируются следующие факторы: женский пол, молодой возраст, течение заболевания с клинической симптоматикой, клиренс РНК ВГС в течение 4 недель от начала клинической манифестации заболевания, генотип интерлейкина 28В (ИЛ 28В) СС. Однако ни один из этих параметров не может лечь в основу предсказания характера течения заболевания у каждого конкретного пациента.

Хронический гепатит С — хроническое заболевание печени, продолжающееся более 6 месяцев, в основе которого лежат инфицирование и поражение печени ВГС и манифестирующее морфологически некротическими, воспалительными и фибротическими изменениями печеночной ткани различной степени тяжести.

Диапазон исходов инфекции, вызванной ВГС, широк и колеблется от минимального до тяжелого поражения печени, включая развитие ЦП и ГЦК. Через 20– 30 лет после инфицирования ВГС вероятность развития ЦП колеблется от 4 до 45%. Прогрессирование фиброза печени имеет нелинейный характер и длится, как правило, в течение 20–40 лет от момента инфицирования. У части больных этот процесс происходит чрезвычайно медленно.

Выделен ряд факторов, которые могут оказывать отрицательное влияние на естественное течение гепатита С: возраст старше 40 лет к моменту инфицирования, мужской пол, раса (неевропейская), злоупотребление алкоголем, ожирение, нарушение обмена железа, метаболический синдром и др.

Поскольку гепатит С в большинстве случаев протекает без выраженных симптомов, для его выявления среди населения необходимо применение скрининговых тестов. В Российской Федерации контингенты, подлежащие обязательному обследования на гепатит С, определены СП 3.1.3112-13 «Профилактика гепатита С». Как правило, с целью скрининга достаточно проведения обследования на наличие антител к ВГС (анти-ВГС), однако в ряде случаев при скрининге необходимо одновременное обследование на наличие антител и РНК ВГС. Это касается ситуаций, при которых важно выявить заболевание на раннем сроке, еще до появления антител (доноры крови и органов), или, когда антитела могут не выявляться вовсе (лица с иммунодефицитом).

Верификация диагноза гепатита С основывается на обнаружении специфических маркеров гепатита С – определение суммарных антител к гепатиту С и маркерного спектра, состоящего из антител к структурным и неструктурным белкам вируса класса М и G.

Антитела класса М к core-антигену начинают выявляться в крови, начиная с 2 недели от начала заболевания, могут циркулировать как при остром, так и хроническом течении заболевания. Обнаружение антител класса М у новорожденного ребенка от матери, инфицированной гепатитом С, означает внутриутробное инфицирование плода. Антитела класса G начинают синтезироваться через 3-4 недели от начала заболевания, их циркуляция достаточно длительная.

При положительном результате на суммарные антитела в вирусу гепатита С (анти-HCV) обязательно необходимо проводить подтверждающее исследование, используя тест на выявление маркеров гепатита и определение РНК вируса с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени.

Показания к назначению: диагностика гепатита С.

Референсные значения: Отрицательный результат.

Необходимо воздержаться от приема пищи в течение 2-3 часов.

Отрицательный результат:

отсутствует инфицированность вирусом гепатита С;

«диагностическое окно» — ранняя фаза инфекции и концентрация антител еще крайне мала;

иммуносупрессированные пациенты.

Положительный результат: инфицированность вирусом гепатита С (необходимо дополнительно выявлять HCV РНК и подтверждать наличие антител определение подтверждающего теста с определением антител к структурным и неструктурным антигенам).

Если в подтверждающем тесте выявлены антитела только к одному из неструктурных антигенов вируса, результат считается неопределенным. Такие пациенты должны быть обследованы на наличие РНК вируса гепатита С, а через 2-3 недели от момента первого забора крови повторно исследовать кровь на наличие антител к гепатиту С.

Несмотря на высокую точность ИФА, на результаты диагностики могут повлиять: тяжелые иммунодефицитные состояния; беременность; рассеянный склероз; обострения респираторных заболеваний; вакцинация; аутоиммунные системные заболевания соединительной ткани; гематологические недоброкачественные опухоли; систематическое проведение гемодиализа.

Anti-HCV-total (антитела к антигенам вируса гепатита C)

Исследуемый материал
Сыворотка крови

Метод определения
Иммуноферментный анализ (ИФА).

Показатель, характеризующий наличие антител (независимо от класса М и G) к вирусу гепатита C.

Внимание. При положительных и сомнительных реакциях, срок выдачи результата может быть увеличен до 2-х рабочих дней.

Антитела класса М начинают вырабатываться через 4 — 6 недель после инфицирования, их концентрация быстро достигает максимума. По прошествии 5 — 6 месяцев уровень IgM падает и повышается вновь во время следующей реактивации инфекции. Антитела класса G появляются с 11 — 12 недели после инфицирования, достигают пика концентрации к 5 — 6 месяцу и сохраняются в крови на более-менее постоянном уровне в течение всего периода болезни и реконвалесценции. Таким образом, суммарный уровень антител (total) определяется с 4 — 5 недели после инфицирования и далее.

Особенности инфекции. Гепатит С — вирусное заболевание, характеризующееся поражением печени и аутоиммунными нарушениями, часто имеющее первично-хроническое и латентное течение. Протекает в желтушной (5%) или безжелтушной (95%) формах. Вирус гепатита С (ВГC) относится к флавивирусам, достаточно устойчив во внешней среде. Три структурных белка вируса имеют сходные антигенные свойства, обусловливая выработку anti-HCV-core. В настоящее время выделено 6 генотипов вируса. Высокая степень генетической изменчивости HCV способствует «ускользанию» вируса из-под иммунного ответа. С этим связаны трудности в создании вакцины и лабораторной диагностике (серонегативный гепатит С), а также частое первично-хроническое течение заболевания.

Гепатит С передается с кровью и биологическими жидкостями парентеральным, половым и трансплацентарным путями. Группу повышенного риска составляют лица, практикующие внутривенную наркоманию, беспорядочные половые связи, а также медицинские работники, пациенты, нуждающиеся в гемодиализе или переливаниях крови, заключенные. Проникая в организм, HCV попадает в макрофаги крови и гепатоциты печени, где происходит его репликация. Повреждение печени происходит в основном за счет иммунного лизиса, также вирус оказывает прямое цитопатическое действие. Сходство антигена вируса с антигенами системы гистосовместимости человека обусловливает возникновение аутоиммунных («системных») реакций. В программе системных проявлений HCV-инфекции могут возникать аутоиммунный тиреоидит, синдром Шегрена, идеопатическая тромбоцитопеническая пурпура, гломерулонефрит, ревматоидный артрит и др. По сравнению с другими вирусными гепатитами, гепатит С имеет менее яркую клиническую картину, чаще переходит в хронические формы. В 20 — 50% случаев хронический гепатит С приводит к развитию цирроза печени и в 1,25 — 2,50% — к развитию гепато-целлюлярной карциномы. С высокой частотой возникают аутоиммунные осложнения.

Инкубационный период — 5 — 20 дней. В конце инкубационного периода повышаются уровни печеночных трансаминаз, возможно увеличение печени и селезенки. Острый период протекает со слабостью, снижением аппетита. В трети случаев возникает лихорадка, артралгия, полиморфная сыпь. Возможны диспептические явления и полинейропатии. Холестаз возникает крайне редко (5% случаев). Лабораторные показатели отражают цитолиз. При высоком уровне трансаминаз (более 5 норм) и признаках печеночно-клеточной недостаточности следует заподозрить микст-инфекцию: HCV+HBV.

Оформление заявок для проведения исследований в ООО «ИНВИТРО» осуществляется по паспорту или документу, его заменяющему (миграционная карта, временная регистрация по месту жительства, удостоверение военнослужащего, справка из паспортного стола при утере паспорта, регистрационная карта учёта из гостиницы). Предъявленный документ в обязательном порядке должен содержать информацию о временной или постоянной регистрации на территории РФ и фотографию. При отсутствии паспорта (документа его заменяющего) пациент вправе оформить анонимную заявку для сдачи биоматериала. При анонимном обследовании, заявке и полученному от клиента образцу биоматериала присваивается номер, известный только пациенту, и медперсоналу, оформлявшему заказ.

! Результаты исследований, выполненных анонимно, не могут быть представлены для госпитализации, профессиональных осмотров и не подлежат регистрации в ОРУИБ.

Диагностика гепатита С и тесты на ВГС: антитела, ПЦР и др.

ИСТОЧНИКИ:

Younossi, ZM. Медицинский журнал Кливлендской клиники, мая 1997 года.

Де Медина, М. , Шифф, ER. Semin Liver Dis 1995.

Friedman, LS: Chronic Hepatitis, In: Tierney LM, McPhee SJ, Papadakis MA (eds): Current Medical Diagnosis and Treatment , 36-е издание, Appleton & Lange, Stamford CT, 1997.

Национальный центр биотехнологической информации: «FibroSURE ™ и FibroScan в отношении ответа на лечение при хроническом вирусе гепатита С.«

CDC:« Тестирование на инфекцию ВГС: обновленное руководство для клиницистов и лаборантов »,« Гепатит C: общая информация »,« Гепатит C: информация о тестировании и диагностике »,« Гепатит C: чего ожидать при прохождении тестирования ». , »« Рекомендации по тестированию на вирусную инфекцию гепатита С »,« Вирусный гепатит ».

UpToDate: «Диагностика и оценка хронической вирусной инфекции гепатита С», «Клинические проявления, диагностика и лечение острой вирусной инфекции гепатита С у взрослых.»

Американский фонд печени:« Диагностика гепатита С. »

Лабораторные тесты онлайн: «РНК».

The Hepatitis C Trust: «Острая фаза гепатита С.»

Департамент по делам ветеранов США: «Вирусный гепатит».

Американская ассоциация клинической химии (AACC), Лабораторные тесты онлайн: «Тестирование на гепатит С».

Asian Journal of Transfusion Science : «Вирус гепатита C: скрининг, диагностика и интерпретация лабораторных анализов».

Журнал клинической вирусологии : «Распространенность ложноположительных результатов на антитела к гепатиту С, Национальное исследование здоровья и питания (NHANES), 2007–2012 годы.»

Вашингтонский университет (Обучение и оценка инфекционных заболеваний):« Диагностическое тестирование гепатита С ».

Национальный проект по пропаганде лечения СПИДа: «Гепатит С — часто задаваемые вопросы».

Архив клинической микробиологии : «Оценка методов анализа и ложноположительные результаты в лабораторной диагностике вирусной инфекции гепатита С».

Послы заботы о гепатите C Выбор : «Гепатит С у детей».

Результаты и чего ожидать

Тест на антитела к гепатиту С — единственный способ проверить, есть ли у человека вирус гепатита С.Результаты могут быть сложными, поскольку положительный результат теста не всегда означает, что у кого-то есть гепатит С. Прочтите, чтобы узнать больше о тесте и о том, что показывают результаты.

Гепатит С — это вирус, поражающий печень. Если его не лечить, это может привести к заболеванию печени и другим серьезным долгосрочным проблемам со здоровьем.

Многие люди не осознают, что у них гепатит С. Существуют определенные факторы риска заражения вирусом, такие как возраст и контакт с кровью или биологическими жидкостями.

Тест на антитела — это анализ крови для проверки на наличие вируса гепатита С.

Антитело — это белок, вырабатываемый организмом для защиты от бактерий и болезней. Антитела могут обнаруживать вещества, которые могут нанести вред здоровью.

Медицинский термин для обозначения этих вредных веществ — антиген. Когда антитело распознает антиген, оно уничтожает его или останавливает его дальнейшее проникновение в организм.

Антитела специфичны для определенных бактерий или болезней, и они остаются в организме после того, как кто-то заразился.Это означает, что в будущем антитела смогут бороться с той же болезнью.

Тест на антитела к гепатиту С проверяет наличие антител к вирусу гепатита С. Если в организме есть антитела, это означает, что человек в какой-то момент заразился вирусом. Однако это не всегда означает, что у них все еще есть вирус.

Медицинский работник возьмет небольшой образец крови для отправки на анализ. Результаты могут вернуться через несколько дней или недель.

Есть два результата теста на антитела к гепатиту С.

Нереактивный или отрицательный результат теста означает, что у человека нет вируса. Исключение составляют случаи, когда кто-то недавно контактировал с вирусом, например, через зараженную кровь. В этом случае им нужно будет пройти еще один тест.
Реактивный или положительный результат теста означает, что человек был заражен вирусом в какой-то момент, но не означает, что он все еще есть.Потребуются дальнейшие тесты, чтобы проверить, активен ли вирус в организме и потребуется ли лечение.

Поделиться в PinterestПосле постановки диагноза будут проведены дальнейшие тесты, чтобы определить влияние вируса гепатита С на организм.

После того, как человеку поставлен диагноз гепатита С, ему необходимо будет пройти ряд различных тестов, чтобы увидеть, как вирус повлиял на его организм.

Эти тесты позволят проверить наличие повреждений печени, определить, насколько хорошо печень работает, и помогут медицинскому работнику принять решение о лечении.

Гепатит С лечат лекарствами, известными как противовирусные. Он получил такое название, потому что он направлен на выведение вируса из организма.

Еще одна цель препарата — замедлить повреждение печени. Это также может снизить вероятность заболевания раком печени или серьезного рубцевания печени, известного как цирроз.

Человеку с гепатитом C необходимо регулярно сдавать анализы во время лечения, чтобы видеть, насколько хорошо работает лекарство. Сохранение здоровья, достаточный сон и отказ от наркотиков и алкоголя могут помочь лечению.

Определение диагноза гепатита С может быть сложным или запутанным. Американский фонд печени предлагает информацию, поддержку и советы людям, у которых есть вирус.

После того, как человек получил реактивный или положительный результат теста на антитела к гепатиту С, ему необходимо будет пройти два контрольных теста.

Первый тест проверяет, есть ли у человека вирус; другой измеряет количество вируса в крови.

Первый тест — это качественный тест РНК гепатита С, также известный как тест ПЦР.Положительный результат означает, что человек заражен вирусом гепатита С. Отрицательный результат означает, что организм избавился от вируса без лечения.

Второй тест — это количественный тест на РНК гепатита С. Результат этого теста выражается числом, а не положительным или отрицательным. Это связано с тем, что тест сравнивает количество вируса в организме до, во время и после лечения.

Число, полученное в результате этого теста, называется вирусной нагрузкой. Чем меньше количество вируса гепатита С в крови, тем выше шансы, что человек сможет вывести вирус из своего организма.

После диагностики вируса гепатита С могут потребоваться другие тесты:

Тестирование на гепатиты A и B . Если человек ранее не подвергался воздействию этих форм вируса, он может пройти вакцинацию для защиты от него.
Тестирование для определения штамма гепатита C . В Соединенных Штатах есть три распространенных штамма, и лечение каждого из них немного отличается. Это называется тестом на генотип гепатита С.
Функциональные пробы печени . Они позволят определить степень воспаления или повреждения печени.
Визуальные тесты . Фотографирование печени может показать, есть ли у человека рак печени.

Поделиться на PinterestДетям-бумерам рекомендуется пройти тестирование на гепатит С, поскольку они подвергаются особому риску заражения вирусом.

Определенное поведение, опыт и медицинские процедуры повышают риск заражения вирусом гепатита С, который передается при контакте с кровью.

Факторы риска заражения вирусом:

ВИЧ-инфекция
использование игл для инъекций
наличие нескольких половых партнеров или половой партнер с хроническим гепатитом C
, перенесший трансплантацию органов или получивший донорство крови до 1992 г.
работало в сфере здравоохранения и контактировало с кровью или биологическими жидкостями
проходило гемодиализ, процесс, который фильтрует кровь
лечился от нарушения свертываемости крови белками крови до 1987 г.

Центры по контролю заболеваний и профилактика (CDC) советуют всем бэби-бумерам пройти тестирование на гепатит С.Бэби-бумеры — это люди, родившиеся между 1945 и 1965 годами. Вероятность заражения вирусом у них в пять раз выше, чем у других взрослых.

Непонятно, почему бэби-бумеры заболевают гепатитом С чаще, чем остальное население. В настоящее время исследователи считают, что это могло быть связано со стандартами медицинской практики в прошлом, до введения мер скрининга и инфекционного контроля.

Гепатит С — серьезный вирус, который может нанести значительный ущерб организму.Чем раньше будет обнаружен вирус, тем больше шансов вылечить его.

Люди, которые подвергались воздействию факторов риска или относятся к группе высокого риска, должны пройти тестирование.

Важно понимать, что означает положительный или отрицательный результат. Человек должен попросить медицинского работника дать четкое объяснение и совет, если он не уверен.

Результаты и чего ожидать

Тест на антитела — это анализ крови для проверки на наличие вируса гепатита С.

Есть два результата теста на антитела к гепатиту С.

Нереактивный или отрицательный результат теста означает, что у человека нет вируса. Исключение составляют случаи, когда кто-то недавно контактировал с вирусом, например, через зараженную кровь. В этом случае им нужно будет пройти еще один тест.
Реактивный или положительный результат теста означает, что человек был заражен вирусом в какой-то момент, но не означает, что он все еще есть.Потребуются дальнейшие тесты, чтобы проверить, активен ли вирус в организме и потребуется ли лечение.

Первый тест проверяет, есть ли у человека вирус; другой измеряет количество вируса в крови.

После диагностики вируса гепатита С могут потребоваться другие тесты:

Тестирование на гепатиты A и B . Если человек ранее не подвергался воздействию этих форм вируса, он может пройти вакцинацию для защиты от него.
Тестирование для определения штамма гепатита C . В Соединенных Штатах есть три распространенных штамма, и лечение каждого из них немного отличается. Это называется тестом на генотип гепатита С.
Функциональные пробы печени . Они позволят определить степень воспаления или повреждения печени.
Визуальные тесты . Фотографирование печени может показать, есть ли у человека рак печени.

Факторы риска заражения вирусом:

ВИЧ-инфекция
использование игл для инъекций
наличие нескольких половых партнеров или половой партнер с хроническим гепатитом C
, перенесший трансплантацию органов или получивший донорство крови до 1992 г.
работало в сфере здравоохранения и контактировало с кровью или биологическими жидкостями
проходило гемодиализ, процесс, который фильтрует кровь
лечился от нарушения свертываемости крови белками крови до 1987 г.

Обследование на гепатит С | Hepatitis C Trust

Необходимо сделать два теста, чтобы определить, есть ли у вас гепатит C:

Тест на антитела: который устанавливает, подвергались ли вы когда-либо воздействию вируса гепатита С.
ПЦР-тест: позволяет установить, активен ли вирус и нуждается ли он в лечении.

Два теста часто можно провести на одном образце крови, что означает, что вам может потребоваться сдать образец только один раз. После этого оба теста могут быть выполнены на вашем образце в лаборатории. Однако некоторые службы выполнят один тест, а затем перезвонят вам, чтобы получить дополнительный образец крови для выполнения второго теста.

Тест на антитела

Тест на антитела к гепатиту С — это первый проведенный тест.Это необходимо для того, чтобы определить, подвергались ли вы когда-либо воздействию вируса гепатита С. Он работает путем тестирования на наличие антител к вирусу, вырабатываемого вашей иммунной системой. Если вы получили отрицательный результат теста на антитела к гепатиту С, но испытываете симптомы или недавно подверглись заражению гепатитом С, вам, скорее всего, порекомендуют пройти второй тест.

Важно помнить, что существует «период окна». Это короткий период времени, когда ваша иммунная система может не успевать вырабатывать антитела.Обычно для развития этих антител требуется от шести до двенадцати недель. Однако у некоторых людей это может занять до шести месяцев. Поэтому, если у вас есть тест в течение этого периода окна, и результат отрицательный, это не обязательно означает, что у вас нет вируса.

Если вы получили положительный результат теста на антитела к гепатиту С, это не обязательно означает, что вы в настоящее время инфицированы. До 20% людей выводят вирус из своего тела естественным путем. Это называется «спонтанное очищение». Хотя они избавились от вируса, тесты все равно покажут наличие антител к гепатиту С.Есть вероятность, что вы, возможно, были инфицированы гепатитом С в прошлом, но больше не инфицированы.

Тест ПЦР

Если тест на антитела положительный, второй тест проверяет наличие вируса. Оба теста могут быть выполнены на основе одного полученного вами образца, поэтому это не всегда означает, что вам нужно проходить тестирование дважды. Однако некоторые службы тестирования по-прежнему сначала проверяют только наличие антител, а затем перезванивают вам для дальнейшего теста ПЦР.
Тест ПЦР (полимеразная цепная реакция) определяет, инфицированы ли вы в настоящее время, путем обнаружения генетического материала вируса в крови.Этот генетический материал называется РНК, и этот тест иногда называют тестом РНК.

Результаты испытаний обычно указываются как «необнаруживаемые» или «обнаруживаемые». Положительные результаты часто даются с точки зрения количества вируса, обнаруженного в единице крови. Это называется вирусной нагрузкой.

Вы должны получить результаты теста на антитела и теста ПЦР одновременно. Таким образом, вы сразу узнаете, инфицированы ли вы в настоящий момент, и вам необходимо обратиться к специалисту.

Тридцать два часто задаваемых вопроса о гепатите C

Ниже приводится список часто задаваемых вопросов относительно гепатита C: обновленный 2019 г.

1. Что такое гепатит С?

Гепатит С — это заболевание печени, вызываемое вирусом гепатита С (ВГС), который обнаруживается в крови людей, страдающих этим заболеванием. ВГС передается при контакте с кровью инфицированного человека. После контакта 85% этих людей становятся хронически инфицированными с 15% вероятностью развития цирроза, который вызывает рубцевание печени, в течение 25 лет.

2. Какие анализы крови доступны для проверки на гепатит С?

Существует несколько анализов крови, которые можно сделать, чтобы определить, инфицированы ли вы ВГС. Для подтверждения диагноза вам может потребоваться пройти один или два из перечисленных ниже тестов:

a) Anti-HCV (антитела к HCV)

RIBA (рекомбинантный иммуноблоттинг) Дополнительный тест, используемый для подтверждения положительного результата теста EIA Anti-HCV, не позволяет определить, является ли инфекция новой (острой), хронической (длительной) или больше не существует. В большинстве случаев этот тест больше не используется.

b) Качественные тесты для определения наличия или отсутствия вируса (РНК HCV)
Этот тест будет зарегистрирован как положительный (вирус присутствует) или отрицательный (вирус отсутствует)

c) Количественные тесты для определения количества (титр) вируса (РНК ВГС)
Один положительный результат ПЦР указывает на инфекцию ВГС. Единичный отрицательный тест не доказывает, что человек не инфицирован. Вирус может присутствовать в крови и просто не обнаруживаться с помощью ПЦР.Кроме того, у выздоровевшего человека, инфицированного в прошлом, может быть отрицательный результат.

При подозрении на гепатит С и отрицательном результате ПЦР необходимо повторить ПЦР. Этот тест будет зарегистрирован как «вирусная нагрузка», определяя количество присутствующего вируса. Эта вирусная нагрузка становится наиболее важной во время лечения, чтобы определить, является ли ответ на терапию.

3. Можно ли получить «ложноположительный» результат теста на ВГС?

Да. Ложноположительный тест означает, что тест выглядит как положительный, но на самом деле отрицательный.Чаще это происходит у людей с низким риском заболевания, на которое они проходят тестирование. Например, ложноположительные тесты на анти-ВГС чаще встречаются у таких людей, как доноры крови, которые относятся к группе низкого риска гепатита С. Поэтому важно подтвердить положительный результат теста на вирус гепатита С дополнительным тестом как наиболее ложноположительный результат теста. При дополнительном тестировании тесты на ВГС считаются отрицательными. Существуют определенные ситуации, когда у людей с аутоиммунными заболеваниями, такими как волчанка, может быть ложноположительный результат теста на антитела к ВГС.Подтверждение этого с помощью РНК HCV обычно будет отрицательным, что указывает на отсутствие активного гепатита C.

4. Можно ли получить «ложноотрицательный» результат теста на ВГС?

Да. Люди с ранней инфекцией могут еще не выработать достаточно высокий уровень антител, который можно измерить с помощью теста. Кроме того, у некоторых людей может отсутствовать (иммунный) ответ, необходимый для успешного прохождения теста.

5. Через какое время после контакта с вирусом гепатита С положительный результат теста на антитела к вирусу гепатита С?

Анти-HCV можно обнаружить у 7 из 10 человек при появлении симптомов и примерно у 9 из 10 человек в течение 3 месяцев после появления симптомов.Однако важно отметить, что у многих людей с гепатитом С симптомы отсутствуют. Многие чувствуют себя хорошо, не имеют никаких внешних симптомов или жалоб.

6. Через сколько времени после заражения ВГС положительный результат теста с помощью ПЦР?

ВГС можно обнаружить в течение 1-2 недель после заражения вирусом.

7. Кому следует пройти обследование на гепатит С?

Все бэби-бумеры должны пройти тестирование на гепатит С.Это люди 1945-1965 годов рождения. Вам необходимо пройти обследование независимо от факторов риска.
Лица, когда-либо употреблявшие запрещенные наркотики инъекционным путем, в том числе те, кто употреблял инъекционные наркотики один или два раза много лет назад

Гомосексуальные мужчины или женщины
Новые рекомендации Центров по контролю за заболеваниями гласят, что все «бэби-бумеры» проходят тестирование, независимо от их факторов риска ВГС. Бэби-бумеры родились в 1945-1965 годах.У бэби-бумеров как группы вероятность заражения ВГС в пять раз выше. У многих нет никаких симптомов, поэтому им нужно попросить пройти тест на ВГС — не думайте, что вы будете обследованы вашим врачом.
В этом видео д-ра Галати освещаются некоторые проблемы бэби-бумеров, связанные с ВГС.

8. Может ли у вас нормальный уровень печеночных ферментов (например, АЛТ) и все еще есть хронический гепатит С?

Да. У людей с хроническим гепатитом С уровень ферментов печени повышается и понижается с периодическим возвратом к норме или почти к норме.У некоторых людей уровень ферментов печени остается нормальным более года, но у них все еще есть хроническое заболевание печени. Если уровень ферментов печени в норме, пациенты должны повторно проверять уровень ферментов несколько раз в течение 6–12 месяцев.

9. Как человек мог заразиться гепатитом С?

ВГС передается главным образом при прямом контакте с кровью человека. Например, вы могли заразиться ВГС, если:

Вы когда-либо вводили уличные наркотики, на которых могла быть кровь другого человека, содержащая ВГС.В условиях опиоидного кризиса, с которым мы сталкиваемся, сейчас наблюдается рост числа новых случаев инфицирования гепатитом С.

10. Может ли ВГС передаваться половым путем?

Да, но это случается не очень часто. Обсудите эти вопросы с доктором Галати для получения дополнительной информации и рекомендаций. Гепатит С очень плохо передается половым путем.

11. Может ли ВГС передаваться при оральном сексе?

Нет никаких доказательств того, что ВГС передается при оральном сексе. Имейте в виду, что другое поведение, сопряженное с повышенным риском, может подвергнуть вас риску.Обсудите эти вопросы с доктором Галати для получения дополнительной информации.

12. Может ли ВГС передаваться внутри домохозяйства?

Да, но это случается не очень часто. Если ВГС распространяется внутри семьи, это, скорее всего, связано с прямым контактом с кровью инфицированного члена семьи. Случайный контакт с домашним хозяйством не является фактором риска гепатита С.

13. Поскольку для использования в банках крови были разработаны более совершенные тесты, каковы теперь шансы, что человек может заразиться вирусом гепатита С в результате переливания крови или продуктов крови?

Менее 1 шанса на миллион перелитых единиц.

14.

Следует ли беременным женщинам регулярно проходить тестирование на анти-ВГС?

ДА. Все беременные женщины должны пройти обследование как на гепатит В, так и на гепатит С.

15. Каков риск того, что инфицированные ВГС женщины передадут ВГС своим новорожденным младенцам?

Около 5 из каждых 100 младенцев, рожденных от инфицированных ВГС женщин, инфицированы. Это происходит во время родов, и нет никакого лечения, которое могло бы предотвратить это. У большинства младенцев, инфицированных ВГС при рождении, симптомы отсутствуют, и они хорошо себя чувствуют в детстве.Необходимы дополнительные исследования, чтобы выяснить, будут ли у этих детей проблемы из-за инфекции по мере взросления. Нет никаких методов лечения или руководств по лечению младенцев или детей, инфицированных ВГС. Детей с повышенным уровнем АЛТ (ферментов печени) следует направлять на обследование к специалисту, знакомому с ведением детей с заболеваниями, связанными с ВГС.

16. Следует ли посоветовать женщине с гепатитом С отказаться от грудного вскармливания?

Нет. Нет никаких доказательств того, что грудное вскармливание способствует распространению ВГС.ВГС-инфицированным матерям следует воздержаться от грудного вскармливания, если их соски потрескались или кровоточат.

17. Когда следует обследовать детей, рожденных от матерей с гепатитом С, на предмет заражения при рождении?

Детей не следует тестировать на анти-ВГС до 12–18 месяцев, поскольку до этого возраста могут сохраняться антитела к ВГС от матери. Если тестирование желательно до достижения 12-месячного возраста, ПЦР может быть проведена во время или после первого посещения ребенка здоровым ребенком в возрасте 1-2 месяцев.

18. Как люди, инфицированные ВГС, могут предотвратить передачу ВГС другим людям?

Не сдавайте кровь, органы, другие ткани или сперму.
Не передавайте личные вещи, на которых может быть ваша кровь, например зубные щетки, стоматологические приспособления, оборудование для ухода за ногтями или бритвы.
Прикрывайте порезы и кожные язвы, чтобы не допустить распространения ВГС.

19.Как человеку защитить себя от заражения гепатитом С и другими заболеваниями, передаваемыми через человеческую кровь?

Никогда не стреляйте наркотиками. Интраназальный (ингаляционный) также является фактором риска. Если вы делаете инъекцию или вдыхаете наркотики, остановитесь и начните курс лечения. Если вы не можете остановиться, никогда не используйте повторно шприцы, воду или лекарственные препараты и не делитесь ими, сделайте прививку от гепатита A и гепатита B.

ВГС передается половым путем, но это происходит не очень часто.Если вы занимаетесь сексом, но не с одним постоянным партнером:

Вы и ваши партнеры можете заразиться другими болезнями, передаваемыми половым путем (например, СПИДом, гепатитом B, гонореей или хламидиозом).

19. Следует ли пациентам с гепатитом С изменить свою сексуальную практику, если у них есть только один постоянный постоянный половой партнер?

Нет. Вероятность передачи ВГС этому партнеру через половую жизнь очень мала. Если вы хотите снизить небольшую вероятность передачи ВГС вашему половому партнеру, вы можете принять решение использовать барьерные меры предосторожности, такие как латексные презервативы.Эффективность латексных презервативов в предотвращении заражения ВГС неизвестна, но их правильное использование может снизить передачу. Ваш партнер также должен пройти обследование.

20. Что могут сделать люди с инфекцией ВГС, чтобы защитить свою печень?

Прекратите употреблять алкоголь.
Сохраняйте нормальный вес. Жирная печень, связанная с ожирением, диабетом и метаболическим синдромом, увеличивает риск повреждения печени и цирроза печени при гепатите С.
Регулярно посещайте врача.
Не принимайте новые лекарства и не используйте безрецептурные, травяные и другие лекарства без ведома врача.
Сделайте прививку от гепатита А и В

21. Какую еще информацию следует знать пациентам с гепатитом С?

Чихание, объятия, кашель, еда или вода не распространяют ВГС, равно как и совместное использование столовых приборов или стаканов или случайный контакт.

Людей нельзя отстранять от работы, учебы, игр, ухода за детьми или других мест на основании их статуса инфицирования ВГС.

22. Каковы шансы того, что у людей с ВГС-инфекцией разовьется длительная инфекция, хроническое заболевание печени, цирроз, рак печени или смерть в результате гепатита С?

На каждые 100 человек, инфицированных ВГС, примерно:

От 75 до 85 человек могут развить длительную инфекцию
У 70 человек может развиться хроническое заболевание печени
У 15 человек может развиться цирроз в течение 20-30 лет
Менее 3% людей могут умереть от последствий длительной инфекции (рак печени или цирроз)
Гепатит С является основным показанием для трансплантации печени.

23. Встречаются ли заболевания вне печени у людей с хроническим гепатитом С?

У небольшого процента людей с хроническим гепатитом С развиваются заболевания вне печени (это называется внепеченочным). Считается, что эти состояния возникают из-за того, что естественная иммунная система организма борется сама с собой. К таким состояниям относятся: гломерулонефрит, связанный с заболеванием почек, эссенциальная смешанная криоглобулинемия и поздняя кожная порфирия — состояние кожи.

24. Как лечить хронический гепатит С?

С 2013 года было одобрено FDA множество новых методов лечения ВГС. Дополнительную информацию об этих новых методах лечения можно получить, просмотрев следующие видео, подготовленные специалистами по печени из Техаса и доктором Галати. В настоящее время медикаментозные методы лечения позволяют добиться излечения более 95% при 8–12 неделях терапии.

25. Что означает термин «генотип»?

Генотип относится к генетической структуре организма или вируса.Идентифицировано как минимум 6 различных генотипов HCV. Генотип 1 — наиболее распространенный генотип, встречающийся в Соединенных Штатах.

26. Нужно ли проводить генотипирование при ведении человека с хроническим гепатитом С?

Да, так как существует 6 известных генотипов и более 50 подтипов ВГС, и информация о генотипе полезна для определения эпидемиологии гепатита С. Знание генотипа или серотипа (специфичных для генотипа антител) ВГС помогает при составлении рекомендаций и консультировании. относительно терапии.В зависимости от вашего генотипа будет определена продолжительность лечения, а также комбинация лекарств. Хорошим нововведением является то, что текущие методы лечения ВГС являются «пангенотипическими», то есть они одинаково хорошо работают со всеми генотипами. Это отличная новость.

27. Каков риск заражения ВГС в результате контакта иглой с зараженной ВГС кровью?

После контакта иглы или острых предметов с кровью с положительной реакцией на ВГС около 2 медицинских работников из 100 заразятся ВГС.

28. Каковы рекомендации по дальнейшему наблюдению медицинских работников после контакта с кровью, положительной на ВГС?

Противовирусные агенты (например, интерферон) или иммуноглобулин не следует использовать для постконтактной профилактики.

Для источника: базовое тестирование на анти-ВГС.
Для лиц, контактировавших с источником вируса гепатита С, базовое и последующее тестирование, включая базовое тестирование на анти-ВГС и активность АЛТ; и последующее тестирование на анти-ВГС (например,г., в 4-6 месяцев) и активность АЛТ. (Если желательна более ранняя диагностика инфекции HCV, тестирование на РНК HCV может быть выполнено через 4-6 недель. )

29. Следует ли ограничивать работу медицинских работников, инфицированных ВГС?

Нет, рекомендаций по ограничению доступа медицинского работника, инфицированного ВГС, нет. Риск передачи инфекции от инфицированного медицинского работника пациенту очень низок. В соответствии с рекомендациями для всех медицинских работников, инфицированные ВГС должны соблюдать строгую асептическую технику и стандартные меры предосторожности, включая надлежащее мытье рук, защитные барьеры и осторожность при использовании и утилизации игл и других острых инструментов.

Гепатит C — Диагностика — NHS

Если вы считаете, что могли заразиться гепатитом С, сдача теста успокоит ваш разум или, если тест положительный, позволит вам начать лечение раньше.

Операции общей практики, клиники сексуального здоровья, клиники мочеполовой медицины (GUM) или службы лечения наркозависимости предлагают тестирование на гепатит C.

Кому следует пройти тестирование?

Вам следует подумать о том, чтобы пройти тест на гепатит С, если вы беспокоитесь, что могли заразиться, или если вы попадаете в одну из групп с повышенным риском заражения.

Гепатит С часто протекает бессимптомно, поэтому вы можете заразиться, если чувствуете себя здоровым.

Следующие группы людей подвержены повышенному риску гепатита C:

бывшие потребители наркотиков и нынешние потребители наркотиков, особенно потребители инъекционных наркотиков
человек в Великобритании, которым переливали кровь до сентября 1991 г.
Великобритания, получатели трансплантатов органов или тканей до 1992 г.
человек, которые жили или лечились в районе, где гепатит С распространен, — районы высокого риска включают Северную Африку, Ближний Восток, а также Центральную и Восточную Азию
младенцев и детей, чьи матери больны гепатитом С
любой, кто случайно заразился вирусом, например, медицинские работники
человек, которым сделали татуировку или пирсинг там, где оборудование могло быть неправильно стерилизовано
половых партнеров людей с гепатитом С

Если вы продолжаете заниматься деятельностью, связанной с повышенным риском, например, часто употребляете инъекционные наркотики, вам может быть рекомендовано регулярное тестирование. Ваш врач сможет сообщить вам об этом.

Обследование на гепатит С

Гепатит С обычно диагностируется с помощью 2 анализов крови: теста на антитела и теста ПЦР. Результаты обычно приходят в течение 2 недель.

Тест на антитела

Анализ крови на антитела определяет, подвергались ли вы когда-либо контакту с вирусом гепатита С, путем проверки на наличие антител к этому вирусу. Ваша иммунная система вырабатывает антитела для борьбы с микробами.

Тест не покажет положительной реакции в течение нескольких месяцев после заражения, потому что вашему организму нужно время, чтобы вырабатывать эти антитела.

Если тест отрицательный, но у вас есть симптомы или вы могли заразиться гепатитом С, вам могут посоветовать пройти тест еще раз.

Положительный результат теста указывает на то, что вы были инфицированы на каком-то этапе. Это не обязательно означает, что вы в настоящее время инфицированы, поскольку с тех пор вы, возможно, вычистили вирус из своего тела.

Единственный способ узнать, инфицированы ли вы в настоящее время, — это пройти второй анализ крови, называемый ПЦР-тестом.

Тест ПЦР

ПЦР-анализ крови проверяет наличие вируса, определяя, воспроизводится ли он внутри вашего тела.

Положительный результат теста означает, что ваш организм не боролся с вирусом и инфекция перешла в длительную (хроническую) стадию.

Дополнительные испытания

Если у вас активная инфекция гепатита С, вас направят к специалисту для проведения дополнительных анализов, чтобы проверить, не повреждена ли ваша печень.

Тесты, которые вы можете пройти, включают:

анализы крови — они измеряют определенные ферменты и белки в вашем кровотоке, которые показывают, повреждена ваша печень или воспалена
УЗИ — где звуковые волны используются для проверки жесткости вашей печени; жесткость предполагает, что печень покрыта рубцами

Специалист также может поговорить с вами о любом лечении, которое может вам понадобиться.

Подробнее о лечении гепатита С.

Последняя проверка страницы: 21 июня 2018 г.
Срок следующей проверки: 21 июня 2021 г.

Нейтрализующие антитела к вирусу гепатита С (ВГС) в иммунных глобулинах, полученные из анти-ВГС-положительной плазмы

Аннотация

Роль гуморального иммунитета при инфекциях, вызванных вирусом гепатита С (ВГС), неясна. Тем не менее, появляется все больше доказательств нейтрализации антител к HCV в сыворотке или плазме хронически инфицированных людей.Иммунные глобулины, полученные фракционированием плазмы этанолом, долгое время считались безопасными, пока коммерческий иммуноглобулин, Gammagard, приготовленный из плазмы, из которой были исключены единицы, содержащие анти-HCV, не передал HCV реципиентам. Исследования показали, что исключение могло удалить нейтрализующие антитела из плазмы и, следовательно, поставить под угрозу безопасность полученных иммунных глобулинов. В настоящем исследовании с использованием шимпанзе и недавно проверенной системы in vitro , основанной на нейтрализации инфекционных псевдочастиц ВГС, мы обнаружили широко реактивные нейтрализующие и защитные антитела в экспериментальных препаратах иммуноглобулинов, полученных из донорских антител против ВГС.Нейтрализующие антитела были также обнаружены в партиях Gammagard, приготовленных из не прошедшей скрининг плазмы, которая не передавала гепатит C, но не в партиях Gammagard, которые были приготовлены из плазмы, прошедшей скрининг на анти-HCV и передававшей гепатит C. безопасность этого продукта была поставлена под угрозу. Иммунные глобулины, полученные из анти-HCV-положительной плазмы и содержащие широко реактивные нейтрализующие антитела, могут обеспечить метод предотвращения инфекции HCV.

Вирус гепатита С (ВГС) — это вирус с оболочкой, содержащий одноцепочечную РНК с положительным смыслом.Он заражает до 170 миллионов человек во всем мире. Хотя острые инфекции ВГС обычно протекают бессимптомно, частота их персистирования очень высока (80%), что приводит к хроническим заболеваниям печени, циррозу и гепатоцеллюлярной карциноме у некоторых пациентов.

Роль гуморального иммунного ответа в предотвращении и / или контроле инфекции ВГС не была четко определена, что может быть связано главным образом с отсутствием надежной системы культивирования клеток, пригодной для in vitro анализов нейтрализации , генетически гетерогенной природы ВГС, а также ограниченные ресурсы для изучения инфекции ВГС у шимпанзе, единственного вида, восприимчивого к инфекции ВГС, кроме человека.Кроме того, широко распространено мнение, что гуморальный иммунитет в значительной степени неэффективен для устранения инфекции ВГС или предотвращения повторного инфицирования, возможно, из-за появления устойчивых к нейтрализации вариантов (1, 2) и / или «маскировки» ВГС липопротеинами сыворотки (3 ).

Ранее Shimizu et al. (2, 4) и Farci et al. (1, 5) идентифицировали нейтрализующие антитела (Nt-Abs) к HCV по их способности предотвращать репликацию вируса в линии лимфоидных клеток и предотвращать гепатит C у шимпанзе, соответственно.Используя недавно созданную систему анализа нейтрализации in vitro , основанную на нейтрализации инфекционных ретровирусных псевдочастиц, несущих гликопротеины оболочки ВГС, Bartosch et al. (6) смогли подтвердить существование Nt Abs, показанное ранее в обеих системах. Относительно высокие титры Nt-Abs присутствовали в плазме или сыворотке шимпанзе и людей, хронически инфицированных HCV (7).

Несколько линий доказательств также предполагают присутствие Nt-Abs в иммунных глобулинах.Лицензированные в США препараты иммуноглобулина исторически считались безопасными в отношении передачи гепатита до «инцидента с Gammagard», который начался в конце 1993 г. (8–12): один коммерческий в / в. Продукт иммуноглобулина (IGIV), полученный из объединенной плазмы, из которой были исключены пожертвования анти-HCV-положительной плазмы, переданный реципиентам HCV. Эпидемиологические и лабораторные исследования показали, что такой скрининг мог удалить комплексообразование и / или Nt-Abs из плазмы и, следовательно, поставить под угрозу безопасность иммунных глобулинов (9, 11–16).

В этом исследовании мы коррелировали присутствие Nt-Abs в нескольких экспериментальных препаратах IGIV (HCIGIV), полученных исключительно из донорской плазмы, положительной по отношению к вирусу гепатита С, с их способностью предотвращать инфицирование вирусом гепатита С у шимпанзе. Сообщалось о предварительных данных, указывающих на то, что экспериментальный продукт HCIGIV может нейтрализовать низкую дозу инокулята HCV, введенного шимпанзе (17). Кроме того, мы измерили Nt-Abs в коммерческих партиях Gammagard, произведенных до или после того, как был начат скрининг плазмы на анти-HCV.Мы продемонстрировали наличие высокотитровых и широко реактивных Nt-антител к HCV в пуле донорской плазмы с положительной анти-HCV плазмой в трех препаратах HCIGIV, приготовленных из пулов с положительной реакцией на вирус гепатита C, и в партиях Gammagard, приготовленных из непроверенной плазмы. Напротив, мы не обнаружили Nt-Abs к ВГС в пуле плазмы, из которого были исключены положительные по отношению к ВГС донорские плазмы, в иммунных глобулинах, приготовленных из таких пулов плазмы, или в большом количестве препаратов Гаммагард, приготовленных из проверенной плазмы. Таким образом, наши данные показывают, что анти-HCV способствует исторической безопасности иммунных глобулинов и что скрининг доноров на анти-HCV удаляет Nt-Abs из плазмы и, следовательно, может поставить под угрозу безопасность иммунных глобулинов, если их производственные процедуры не включают одну или несколько стадий вирусной инактивации. .

Материалы и методы

Тестирование на анти-ВГС. Антитела к ядру HCV и неструктурным белкам (anti-HCV) в иммунных глобулинах и сыворотке шимпанзе определяли с помощью иммуноферментного анализа (EIA) -2 или набора EIA-3 третьего поколения (оба от Ortho Diagnostics) в соответствии с инструкции производителя. Препараты иммуноглобулина серийно разводили в 2 раза предоставленным разбавителем для образцов, и указанный титр представлял наивысшее разведение, которое давало значение выше порогового значения, указанного для набора.Присутствие анти-HCV в иммунных глобулинах было подтверждено методом рекомбинантного иммуноблоттинга второго поколения (RIBA-II, Chiron). Описано определение антител к гликопротеинам оболочки ВГС E1 и E2 (14). Вкратце, антитела определяли собственными методами EIA с использованием частично очищенных гибридных белков, экспрессированных в бакуловирусе. Иммуноглобулины сначала разбавляли до 5% раствора IgG, а затем разбавляли PBS, pH 7,4, содержащим 0,05% Tween 20, перед инкубацией в лунках, покрытых либо экспрессированным E1 (7.2 мкг / мл) или экспрессированный антиген E2 (38 мкг / мл) при 4 ° C в течение ночи. Впоследствии были соблюдены стандартные процедуры ОВОС. Измеряли оптическую плотность при 490 нм, и значения отсечения для анти-E1 и анти-E2 были установлены на 0,5 и 0,6 соответственно.

Иммунные глобулины и плазменные бассейны. Девятнадцать кодированных образцов были протестированы в этом исследовании (Таблица 1). Код не был взломан, пока не было завершено тестирование. Образцы 1, 2 и 5 ранее были описаны в предварительном отчете (17).Вкратце, образец 1 представлял собой коммерческий 5% раствор IGIV (Venoglobulin-S, Alpha Theotherapy, Лос-Анджелес), приготовленный из> 43000 донорской плазмы, проверенной на анти-HCV (EIA-2) и инактивированной на вирусы обработкой растворителем-детергентом (18) . Образец 1 не имел обнаруживаемых антител к HCV, включая антитела к гликопротеинам оболочки E1 и E2, и, следовательно, был использован в качестве контрольного IGIV. Образец 2 (HCIGIV) представлял собой экспериментальный 5% IGIV, обработанный растворителем-детергентом (любезно предоставлен Nabi Biopharmaceuticals, Бока-Ратон, Флорида).Образец 2 был изготовлен из объединенной плазмы 198 доноров, положительных к вирусу гепатита С (EIA-2), которые в остальном соответствовали требованиям для нормального донора плазмы, т. Е. Были отрицательными как по анти-ВИЧ, так и по поверхностному антигену гепатита В, и без повышенных уровней аланинаминотрансферазы (ALT). Этот HCIGIV содержал самые высокие уровни анти-E1 и анти-E2 среди всех исследованных экспериментальных и коммерческих IGIV (14) и имел титр анти-HCV (EIA-3) 1: 2048. Образец 5 (альбумин) был получен из коммерческого 25% альбумина (человека), который был вирусно инактивирован нагреванием при 60 ° C в течение 10–11 часов и был разбавлен до 5% PBS перед использованием в качестве контроля.Образец 3 (HCIGIV), 5% раствор IgG, приготовленный Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов из 4 литров объединенной плазмы из 186 антител к HCV (EIA-1) -позитивных донорских плазмы, как описано (19), не был вирусно инактивирован и содержал РНК ВГС. Этот HCIGIV также имел высокие уровни анти-E1 и анти-E2 (14). Образец 4 (HCIGIV), также подготовленный Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов, был аналогичен образцу 3, за исключением того, что первый был приготовлен из частей 23 донорской плазмы, выбранных из 186 пожертвований для образца 3, был инактивирован вирусами при низком pH. и ранее использовался в исследовании шимпанзе Krawczynski et al. (20). В этом исследовании шимпанзе инокулировали 30 инфекционными дозами для шимпанзе (CID) вируса гепатита C, штамма HCV-1 (близкого к используемому здесь штамму H77), и через 1 час вливали вирус HCIGIV.

Таблица 1.
Образцы протестированы в коде

Образец 6 представлял собой пул плазмы, состоящий из 186 доноров (19), которые сформировали исходный пул для обозначенного HCIGIV образца 3.Образец 7 представлял собой пул плазмы от доноров, прошедших скрининг на анти-HCV (EIA-2), предоставленный производителем. Образцы 8–12, т. Е. Партии Gammagard, участвующие в передаче HCV реципиентам, были взяты исключительно из донорской плазмы, проверенной на анти-HCV (EIA-2), в 1993 г., тогда как образцы 13–16 и 18–19 были разными партиями Gammagard от плазма, не прошедшая скрининг на анти-HCV и изготовленная в период с 1988 по 1990 год. Образец 17 представлял собой действующий вирусно-инактивированный продукт IGIV, полученный другим производителем из донорской плазмы, отрицательной по анти-HCV (EIA-3).Многие партии IGIV и человеческого альбумина были из партий продукта, представленных производителями для выпуска Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов. Лиофилизированные партии Gammagard были восстановлены до 10% растворов IgG с PBS перед использованием.

Инокулят ВГС, прививка шимпанзе и мониторинг. Инокулят, разбавленный до содержания ≈64 CID ₅₀ (50% инфекционных доз для шимпанзе) HCV, был приготовлен из плазмы острой фазы пациента H, как описано (1, 5).Путем ограничения разведения было обнаружено, что посевной материал содержит 630 копий РНК HCV на миллилитр на основе экстракции нашего образца и последующих процедур ОТ-ПЦР. Это соотношение инфекционных доз к эквивалентам генома было аналогично тому, которое было обнаружено для описанного инокулята штамма H (ссылка 21 и неопубликованные данные). Порции инокулята объемом 1 миллилитр инкубировали с 50 мл тестируемого вещества в течение ночи при 4 ° C перед введением шимпанзе. Образец 3, HCIGIV, который не был инактивирован вирусами, вводили шимпанзе в дозе 1.0 г IgG на кг массы тела, разделенные на две суточные дозы. Образцы сыворотки крови шимпанзе получали еженедельно и тестировали на анти-HCV с помощью EIA-2 или EIA-3. Уровни АЛТ в сыворотке измеряли еженедельно стандартными методами (Antech Diagnostics, Baltimore, MD). Уровень АЛТ считался повышенным, когда он достигал уровня, вдвое превышающего верхний предел нормы. Сыворотки также еженедельно тестировались на РНК HCV. Содержание, содержание и уход за шимпанзе соответствовали или превышали все соответствующие правила и требования.

Обнаружение и количественное определение РНК вируса гепатита С с помощью ОТ-ПЦР. Процедуры были выполнены, как описано ранее, с некоторыми изменениями (11, 15). Чтобы обнаружить низкие уровни РНК ВГС в некоторых образцах иммуноглобулинов, для экстракции РНК использовали аликвоты по 4 мл. Для пулов плазмы, сыворотки шимпанзе и инокулята HCV использовали аликвоты образцов в диапазоне от 0,05 до 0,2 мл. Экстрагированную РНК растворяли в 100 мкл, и 25 мкл серийно разведенных (0,5 или 1 log) аликвот анализировали с помощью RT-PCR в общей реакционной смеси объемом 50 мкл, которая содержала 5 единиц rTth ДНК-полимеразы, 1 × EZ буфер, 2.5 мМ Mn (OAc) _2, 300 мМ каждый из 4 дезоксирибонуклеотидов и 0,4 мМ каждый из пары внешних праймеров [нуклеотиды 39-59, 5′-ACTCCCCTGTGAGGAACTACT и нуклеотиды 329-310, 5′-ACGAGACCTCCCGGGGCACT]. Все реагенты для ОТ-ПЦР были от Applied Biosystems, за исключением праймеров, которые были получены GIBCO / BRL. Реакцию RT проводили в течение 30 мин при 60 ° C с последующим нагреванием в течение 1 мин при 94 ° C для денатурации гибрида РНК: ДНК. Первый этап ПЦР выполняли в той же пробирке в течение 30 циклов, каждый цикл состоял из 15 с при 94 ° C и 30 с при 60 ° C, а затем один цикл продолжительностью 7 минут при 60 ° C.Вторую стадию ПЦР выполняли, добавляя аликвоты по 5 мкл первого продукта ПЦР к тем же ингредиентам и инкубируя их в тех же условиях, что описаны для первой стадии ПЦР, но с внутренней парой праймеров (нуклеотиды 57–76, 5′- ACTGTCTTCACGCAGAAAGC и нуклеотиды 312–293, 5′-ACTCGCAAGCACCCTATCAG). Количество РНК HCV, выраженное в копиях на мл, определяли анализом предельного разведения, как описано (13). В анализах ОТ-ПЦР от двух до четырех копий РНК ВГС были эквивалентны 1 международной единице по сравнению с установленным международным стандартом для РНК ВГС (22).

Производство и нейтрализация псевдочастиц. Псевдочастицы были созданы, как описано (6). Вкратце, клетки 293T трансфицировали векторами экспрессии, кодирующими гликопротеины оболочки HCV, ретровирусное ядро / упаковочный компонент и ген GFP с сигналом интеграции. Использовали экспрессионные плазмиды, кодирующие гликопротеины E1 и E2 либо штамма H77 генотипа 1a HCV, либо генотипа 2a. Среду заменяли через 16 ч после трансфекции.Супернатанты, содержащие псевдочастицы, собирали через 24 часа, фильтровали через мембраны с размером пор 0,45 мкм и использовали для заражения клеток Huh-7, которые были засеяны накануне, с плотностью 8 × 10 ⁴ клеток на лунку в 12 планшеты с лунками. Закодированные образцы разбавляли и тестировали на нейтрализацию псевдочастиц HCV обоих генотипов путем предварительной инкубации смеси при комнатной температуре в течение 1 ч перед добавлением ее к клеткам-мишеням. Через 3 часа супернатанты удаляли и клетки инкубировали в обычной среде в течение 96 часов при 37 ° C.Входящие псевдочастицы инфицировали 2–4% клеток в отсутствие антител. Инфекционность псевдочастиц, подвергшихся воздействию сыворотки от двух здоровых серонегативных доноров-людей из Франции, была стандартизирована до 100% для сравнения с двумя образцами пула плазмы (образцы 6 и 7), тогда как подвергшиеся воздействию альбумина (образец 5) использовались в качестве отрицательного контроля. для всех образцов иммуноглобулина. Все разведения тестируемых образцов сравнивали с такими же разведениями этих отрицательных контрольных образцов. Уменьшение количества инфицированных клеток, составлявшее ≤50% от отрицательного контроля, считалось свидетельством значительной нейтрализации.Положительный контрольный образец был получен от французского пациента (Vu), который был хронически инфицирован HCV, генотип 1b. Контрольные эксперименты по нейтрализации также проводились с нерелевантной мишенью с использованием псевдочастиц, несущих гликопротеины, полученные из эндогенного ретровируса кошек RD114, как описано, поскольку антитела к этому вирусу не обнаруживаются в сыворотке крови человека (6).

Результаты

Профилактика инфекции ВГС у шимпанзе с помощью экспериментальных препаратов IGIV, изготовленных из анти-ВГС-положительной плазмы. Чтобы выяснить, не приводит ли анти-HCV-положительные единицы плазмы к пулу плазмы и, следовательно, к конечному продукту IGIV, истощению Nt-Abs, мы оценили способность двух препаратов IGIV нейтрализовать 64 CID ₅₀ вируса гепатита C, штамм H77. Один IGIV был экспериментальным препаратом глобулина (HCIGIV), полученным исключительно из плазмы анти-HCV-положительных доноров. Препарат имел высокие уровни как анти-E1, так и анти-E2 (14). Другой был коммерческим препаратом глобулина, полученным из донорской плазмы, отрицательной по ВГС (EIA-2); в нем не было обнаруживаемых анти-E1 и анти-E2 (14).Для подтверждения жизнеспособности посевного материала в качестве контроля использовали 5% раствор человеческого альбумина. Все три препарата были вирусно инактивированы, и каждый инкубировали с посевным материалом, как описано выше, перед инфузией смесей глобулин-вирус (или альбумин-вирус) внутривенно. в отдельных шимпанзе.

Контрольный шимпанзе, CH 1560, инфузированный инкубационной смесью инокулята и 5% раствора человеческого альбумина (образец 5), был инфицирован, и РНК HCV была обнаружена в сыворотке в течение одной недели (рис.1 A , который опубликован в качестве вспомогательной информации на веб-сайте PNAS). Другой контрольный шимпанзе, CH 1587, которому вводили смесь того же инокулята и контрольного IGIV (образец 1), был инфицирован аналогичным образом (фиг. 1 B ). И у CH 1560, и у CH 1587 было повышение уровня АЛТ в сыворотке, и у обоих произошла сероконверсия (EIA-3) на 9-й и 11-й неделях соответственно. Напротив, HCIGIV (образец 2) нейтрализовал инокулят ВГС: CH 1588 не показал ни повышенного уровня АЛТ, ни обнаруживаемой РНК ВГС в течение 58 недель (рис.1 С ). Пассивно приобретенные анти-HCV (EIA-3) от HCIGIV присутствовали в CH 1588 с 1 по 22 неделю.

Чтобы определить, остается ли CH 1588 полностью восприимчивым к инфицированию HCV, на 59 неделе, после исчезновения всех пассивно приобретенных анти-HCV, его провоцируют 1 мл того же инокулята, содержащего 64 CID ₅₀ HCV. Как и ожидалось, РНК ВГС была обнаружена в течение 1 недели после заражения, а уровни АЛТ в сыворотке крови повысились через 11 недель после заражения, тем самым демонстрируя восприимчивость шимпанзе к инфекции ВГС.Интересно, что анти-HCV (EIA-3) снова был обнаружен через 1 неделю после заражения, на 60-й неделе. Учитывая, что инокулят для контрольного заражения не содержал анти-HCV, такое быстрое появление антител к HCV у шимпанзе предполагает примирование иммунной системы специфическими антигенами HCV, связанными с первым заражением, как описано (23). Наши данные убедительно свидетельствуют о том, что обозначенный HCIGIV образец 2, приготовленный из анти-HCV-позитивных донорных единиц, содержал специфические Nt-Abs к HCV.

Чтобы определить, коррелирует ли наличие анти-HCV с очевидной безопасностью иммунных глобулинов (которые часто содержат РНК HCV) (13), мы вливали CH 1430 с образцом 3, который содержал не только высокие уровни анти-HCV, включая оба анти-E1 и анти-E2 (14), но также РНК HCV (рис.1 D ). Кроме того, этот HCIGIV не подвергался вирусной инактивации. Шимпанзе внутривенно вливали 20 г образца 3 и, следовательно, получили в общей сложности 3 × 10 ⁴ копий РНК HCV. После инфузии у шимпанзе не было ни повышенного уровня АЛТ, ни обнаруживаемой РНК HCV в образцах сыворотки, исследуемых еженедельно в течение 50 недель. Пассивно приобретенные анти-HCV выявлялись до 17-й недели. Доказано, что шимпанзе полностью восприимчив к HCV, путем последующего повторного заражения его 1 мл плазмы пациента H, разведенной до содержания 10 ^3.5 CID ₅₀ HCV, штамм H-77, на 51 неделе. Шимпанзе заразился, и у шимпанзе развилось повышение АЛТ на 56 неделе и анти-HCV на 60 неделе. Таким образом, отсутствие инфекционности для HCV у иммуноглобулина, положительного как для анти-HCV, так и для РНК HCV предполагалось, что антитело в глобулине нейтрализовало большую дозу потенциально инфекционного вируса, который также присутствовал.

Как уже отмечалось, двух шимпанзе, которые были защищены от инфекции HCV с помощью HCIGIV, повторно проверили, чтобы определить их восприимчивость к инфекции.Оба животного не только заразились ВГС, но и заболели гепатитом. Хотя повторное инфицирование ранее инфицированных шимпанзе ВГС широко признано, такие инфекции редко приводят к гепатиту (24). Таким образом, проявление гепатита у этих двух повторно вызванных шимпанзе является убедительным доказательством того, что они не были инфицированы ранее.

Анализ in vitro на содержание Nt Abs в отношении HCV в выбранных иммунных глобулинах и пулах плазмы. Мы измерили Nt-Abs этих препаратов, протестированных на шимпанзе, вместе с другими выбранными партиями IGIV и пулами плазмы, перечисленными в таблице 1, с помощью недавно разработанного анализа нейтрализации in vitro (7), основанного на нейтрализации инфекционных псевдочастиц HCV.Закодированные образцы разбавляли 1:20, 1:80 и 1: 320 и тестировали против псевдочастиц, несущих гликопротеины оболочки HCV генотипа 1a или 2a. Титр Nt Ab образцов глобулина рассчитывали, как описано в «Материалы и методы» .

Все иммунные глобулины, полученные из известных или предполагаемых донорских образцов плазмы, положительных к вирусу гепатита С (кодированные образцы 2–4, 13–16 и 18–19), и образец 6 (пул плазмы для образца глобулина 3) нейтрализовали псевдочастицы генотипа 1а вируса гепатита C. , я.е. показали ≥50% снижение процента GFP-положительных клеток. (Таблицы 2 и 3 и рис. 2 A , который опубликован в качестве вспомогательной информации на веб-сайте PNAS). Титры Nt-Abs во всех этих образцах были очень высокими, ≥1: 320, при анализе с псевдочастицами HCV генотипа 1a. Чтобы оценить широту нейтрализации против различных генотипов, образцы были также протестированы против псевдочастиц генотипа 2a, генотипа, наиболее отличающегося от генотипа 1a. Все три препарата HCIGIV (образцы 2–4, таблица 2) и образец 6 (анти-HCV-положительный пул плазмы, рис.2 B ) также продемонстрировал значительную, но менее сильную нейтрализацию, чем нейтрализация против псевдочастиц генотипа 1a. Образцы 13–16 и 18–19, партии Gammagard, изготовленные из неотсортированной плазмы, были более вариабельными по своей способности нейтрализовать псевдочастицы генотипа 2a: только образцы 16 и 19 были положительными для таких Nt-Abs и только при разведении 1:20. Однако все они снизили титр псевдочастиц по сравнению с контролем, но за двумя исключениями, менее чем на 50% (таблица 3 и рис.2 В ). Пул плазмы, прошедшей скрининг EIA-2 (образец с кодом 7), и иммуноглобулины, полученные из плазмы, прошедшей скрининг на ВГС (образцы с кодом 1, 8–12 и 17), не продемонстрировали нейтрализации против псевдочастиц HCV любого генотипа (таблицы 2 и 3 и 2). Нейтрализация, наблюдаемая с пулом плазмы и различными глобулинами, полученными из неотсортированной плазмы, была специфической, поскольку ни один из образцов не нейтрализовал псевдочастицы нерелевантным гликопротеином оболочки, полученным из эндогенного вируса кошек RD 114 (данные не показаны).

Таблица 2.
Сравнение нейтрализующей активности, обнаруженной в анализах на шимпанзе и псевдочастицах

Таблица 3.
Корреляция между количеством зарегистрированных случаев гепатита С у людей, связанных с партиями Gammagard, и титром Nt-Abs, обнаруженных с помощью псевдочастиц

Сравнение нейтрализующей активности, обнаруженной у шимпанзе и псевдочастиц. Как видно из таблицы 2, нейтрализующая активность, обнаруженная с помощью псевдочастиц, несущих гликопротеины HCV генотипа 1a, хорошо согласуется с таковой, наблюдаемой у шимпанзе (рис. 1). Таким образом, результаты предоставили возможное объяснение отсутствия инфекционности, как показано на шимпанзе, инфузированном образцом 3, HCIGIV, который был положительным как в отношении РНК HCV, так и анти-HCV. Образец 4, который был приготовлен из части донорской плазмы, использованной для приготовления образца 3, также содержал высокий титр Nt Ab. Ранее было показано, что этот препарат, вводимый шимпанзе после заражения ВГС, продлевает инкубационный период до гепатита (120 дней по сравнению с 30 днями), но не до вирусемии (20).

Корреляция между количеством зарегистрированных случаев гепатита С у людей, связанных с участками гаммагарда, и титрами Nt Abs. Мы оценили наличие Nt-Abs в партиях Gammagard, приготовленных до и после скрининга плазмы на анти-ВГС. Как показано в таблице 3, ни одна из пяти протестированных партий Gammagard, приготовленных из проверенной плазмы, не содержала определяемых Nt-Abs, а четыре партии были связаны с зарегистрированными случаями гепатита (пятая партия не содержала определяемой РНК HCV).Напротив, все шесть партий Gammagard, изготовленных из неотсортированной плазмы, имели титры Nt Ab ≥1: 320 против псевдочастиц генотипа 1a. Было обнаружено, что среди этих шести партий две содержали Nt-Abs против частиц 2a, хотя и с низким титром 1:20.

Обсуждение

Доказательства того, что нормальный иммунный глобулин может защищать от гепатита С (ранее обозначавшегося как гепатит не А и не В), относятся как минимум к 1967 году, когда американские солдаты, дислоцированные в Корее, участвовали в рандомизированном двойном слепом клиническом испытании защитного действия глобулин против вирусного гепатита (25).Другие клинические испытания иммуноглобулина для профилактики гепатита не-A / не-B, связанного с переливанием крови (практически все из которых были гепатитом C), показали, что такой глобулин обладает защитным действием, если его вводить до контакта с вирусом (26, 27), но не после (28, 29).

Когда шимпанзе вакцинировали рекомбинантными гликопротеинами Е1 и Е2 вируса гепатита С, они были частично защищены от последующего заражения гомологичным вирусом гепатита С с низким уровнем потерь (30). Это открытие предполагает, что антитела к E1 и / или E2 могли защищать от HCV.Существование Nt-Abs против HCV было впервые напрямую продемонстрировано тест-системами in vitro и in vivo у пациента, который был хронически инфицирован HCV (1, 2). Однако такие антитела оказались специфичными для изолята и не защитили с течением времени, возможно, из-за появления устойчивых к нейтрализации вариантов HCV или ограничений в тестах. Несмотря на то, что основные эпитопы нейтрализации не были идентифицированы в этих более ранних исследованиях, предполагались антитела к предполагаемым белкам оболочки HCV, особенно к гипервариабельной области белка оболочки E2.С помощью недавно доступной системы нейтрализации in vitro , основанной на нейтрализации инфекционности псевдочастиц, несущих гликопротеины оболочки HCV (6), было подтверждено присутствие Nt-Abs в плазме или сыворотке хронически инфицированных пациентов с гепатитом C (7). Кроме того, в дополнение к эпитопам нейтрализации, ранее обнаруженным в гипервариабельной области белка оболочки E2, один или несколько дополнительных эпитопов были ориентировочно локализованы в других областях E2 (31).

Исторически сложилось так, что U.Лицензированные S. иммуноглобулины, полученные фракционированием плазмы этанолом, имели замечательные показатели безопасности до тех пор, пока один коммерческий продукт IGIV, Gammagard, приготовленный из плазмы, прошедшей скрининг на анти-HCV (EIA-2), не был изъят во всем мире в феврале 1994 года из-за передачи HCV реципиентам. (8–12). До 1993 г. в США не сообщалось о передаче гепатита С через лицензионные продукты, связанной с глобулином. Механизм этой очевидной безопасности иммунных глобулинов до инцидента с Gammagard был неизвестен, хотя возможная нейтрализация HCV антителами в продуктах, не прошедших скрининг на такие антитела давно подозревались (13, 32).Последующие эпидемиологические и лабораторные исследования инцидента в Гаммагард выявили следующее:

Скрининг анти-HCV с помощью теста EIA-2 показал присутствие РНК HCV в партиях, приготовленных из такой скринированной плазмы. Напротив, РНК вируса гепатита C редко выявлялась в партиях Gammagard, изготовленных из непроверенной плазмы или плазмы, проверенной с помощью относительно нечувствительного теста EIA-1 (9, 15). Партии, полученные из плазмы, проверенной с помощью более чувствительного теста EIA-2, были связаны со многими зарегистрированными случаями передачи гепатита С.
Gammagard был единственным вовлеченным продуктом IGIV (8–12,15). Все другие продукты IGIV не подверглись аналогичному воздействию из-за преднамеренных стадий инактивации вирусов или других производственных процедур (например, очистки), которые случайно инактивировали или удалили вирус.
Скрининг на анти-HCV значительно снижает уровни антител к белкам оболочки E1 и E2 HCV в плазме и образующихся в результате продуктов иммуноглобулинов (14).
Присутствие анти-HCV в плазме оказывает существенное влияние на разделение HCV от образовавшегося иммуноглобулина. В целом фракционирование этанолом анти-HCV-отрицательной плазмы привело к уменьшению РНК HCV на 3,5 log (16), тогда как log-уменьшение на 4,7 было достигнуто для анти-HCV-положительной плазмы (19).
В партии Gammagard, связанной с наиболее зарегистрированными случаями гепатита C (образец 11 в таблице 3) (9, 12, 15), был обнаружен самый высокий уровень РНК HCV среди протестированных коммерческих партий, ≈7000 копий РНК HCV на грамм. IgG.Эта анти-HCV-отрицательная партия показала плохое ультрацентрифужное извлечение РНК HCV: только 10% было извлечено в осадке по сравнению с таковым из анти-HCV-положительных иммунных глобулинов (15). Кроме того, HCV в этой партии имел низкую плавучую плотность, 1,08 г / мл (15) (определено ультрацентрифугированием в градиенте сахарозы), что позволяет предположить, что вирус не образовал комплекс с антителом (3, 21). Это открытие контрастировало с плавучей плотностью ВГС, выделенной из анти-ВГС-положительного иммуноглобулина, 1,16 г / мл, обнаруженной во внутримышечном глобулине, полученном из плазмы, которая не была проверена на анти-ВГС (13) или обнаружена в плазме от пациенты, хронически инфицированные ВГС (21).

В соответствии с этими результатами ретроспективное когортное исследование, проведенное Feray et al. (33) ясно показали, что распространенность виремии ВГС была ниже у пациентов с трансплантатами печени, которые получали иммуноглобулин против гепатита В, сделанный до того времени, когда начался скрининг плазмы на анти-ВГС, что позволяет предположить, что иммуноглобулин гепатита В также содержал Nt-Abs против ВГС . Таким образом, все эти исследования предоставили доказательства того, что глобулины, полученные из анти-HCV-положительной плазмы, содержат антитела, которые образуют комплекс с HCV, и что эти антитела нейтрализуют вирус.

В настоящем исследовании мы обнаружили, что HCIGIV (образец 2), полученный от здоровых анти-HCV-положительных доноров, содержал специфические Nt-Abs к HCV, о чем свидетельствует защита шимпанзе и нейтрализация псевдочастиц HCV, несущих гликопротеины оболочки HCV. Напротив, IGIV, полученный из плазмы, прошедшей скрининг на анти-HCV, не содержал каких-либо определяемых Nt-Abs при измерении любой системой.

Аналогичным образом, мы показали, что HCIGIV (образец 3), полученный от анти-HCV-положительных доноров и содержащий высокие уровни как анти-HCV, так и HCV, не передавал HCV шимпанзе, хотя препарат не был инактивирован вирусами.Этот препарат также содержал высокие уровни Nt Abs, измеренные по нейтрализации псевдочастиц HCV. Таким образом, наши данные подтверждают, что глобулины, полученные из анти-HCV-положительной плазмы, содержат Nt-Abs к HCV и что эти антитела способны нейтрализовать как эндогенный, так и экзогенный HCV.

Присутствие РНК HCV в плазме или продукте, производном от нее, не обязательно означает инфекционность, особенно когда антитела против HCV присутствуют в виде иммунных комплексов (13, 15).Было высказано предположение, что, когда HCV присутствует в виде циркулирующих иммунных комплексов, его инфекционность ниже (21). Кроме того, неоднородности плотности HCV, измеренные в сыворотке крови человека, приписывают связыванию с IgG (3, 21). Раннее открытие, что мутации в гипервариабельной области E2 приводили к накоплению свободных от IgG вирусных частиц в сыворотке пациентов с хронической инфекцией HCV, убедительно свидетельствовало о вовлечении анти-E2 (34). Когда были протестированы 180 из 186 реактивных единиц плазмы EIA-1, составляющих образец 6, 73% из них были положительными на анти-E2, 63% содержали анти-E1 и 58% имели оба антитела (14).Нейтрализующие антитела могут быть направлены против E1, E2 или обоих гликопротеинов оболочки. Напротив, антитела, измеренные с помощью тестов EIA (EIA-1, EIA-2 и EIA-3), направлены против неструктурных белков и основного белка HCV и не могут быть нейтрализующими.

Прямая оценка нейтрализующих антител в различных партиях Gammagard с помощью тестов на шимпанзе неосуществима. Однако с помощью системы анализа in vitro мы продемонстрировали, что все шесть протестированных партий Gammagard, приготовленных из неотсортированной плазмы, содержали высокие титры (≥1: 320) Nt-Abs против псевдочастиц HCV генотипа 1a, но только 2 партии имели титры. до 1:20 Nt Abs против псевдочастиц генотипа 2a.Мы не проводили титрование конечной точки Nt Abs в партиях Gammagard и препаратах HCIGIV. Однако, поскольку ранее было обнаружено, что уровни как анти-E1, так и анти-E2 ниже во всех не прошедших скрининг партиях Gammagard по сравнению с теми, которые были получены с HCIGIV (14), ожидается, что уровни Nt Abs в партиях Gammagard из непроверенной плазмы будут ниже. ниже, чем в HCIGIV. В отличие от этого, партии Gammagard, полученные из плазмы, прошедшей скрининг на анти-HCV, не имели ни детектируемых антител к гликопротеинам E1 или E2 (14), ни Nt Abs к псевдочастицам HCV.Результаты хорошо согласуются с результатами ретроспективных исследований безопасности Gammagard, приведенными в таблице 3. Таким образом, наши данные ясно демонстрируют, что очевидная безопасность иммунных глобулинов до инцидента с Gammagard может быть связана с присутствием Nt-Abs в HCV. Отсутствие Nt-Abs в партиях Gammagard, произведенных после проведения анти-HCV-скрининга плазмы с помощью EIA-2, обеспечивает механизм, с помощью которого безопасность этого неинактивированного продукта была поставлена под угрозу. Этот вывод согласуется с концепцией, согласно которой инфекционность зависит от баланса между вирусом и Nt-Abs.Кроме того, скрининг на анти-ВГС не приведет к исключению единиц с высоким уровнем РНК ВГС, связанных с периодом окна инфекции ВГС, то есть до сероконверсии против ВГС. Точно так же мы наблюдали у шимпанзе (рис. 1), что уровни РНК ВГС до сероконверсии против ВГС всегда были выше, чем после сероконверсии. Единицы плазмы, полученные от доноров во время инкубационного периода гепатита С, когда титры ВГС являются самыми высокими, будут именно теми единицами, которые не будут подвергаться скринингу на анти-ВГС при отсутствии скринингового теста нуклеиновых кислот на РНК ВГС.

Желательно иметь HCIGIV, содержащий Nt-Abs против всех генотипов HCV. В настоящем исследовании все три препарата HCIGIV могут нейтрализовать псевдочастицы HCV, несущие оболочки HCV, происходящие от двух разных генотипов, 1a и 2a, двух наиболее генетически дивергентных генотипов HCV. Неизвестно, присутствуют ли в этих образцах Nt-Abs против других генотипов. Однако анализ генотипа HCV в образце 6, пуле плазмы из 186 доноров, показал, что все генотипы (т.е.е., 1–6) (данные не показаны). Все шесть партий Gammagard, полученных из неотсортированной плазмы, имели высокие уровни Nt Abs для генотипа 1a, но меньшие уровни Nt Abs против генотипа 2a. Анализ генотипа РНК-положительных партий Gammagard, полученных из отобранной плазмы, показал, что некоторые партии содержали только один генотип ВГС, например, генотип 1a для образца 9 (12) и генотип 1b для образца 12 (15). Генотипы 1a и 1b являются наиболее распространенными генотипами в США (35). Однако некоторые партии Gammagard (не включенные в это исследование) содержали смешанные генотипы, т.е.g., 1a / 2b, 1a / 2a – c, 1a / 3b (данные не показаны). Такое открытие неудивительно, учитывая, что каждая партия Gammagard и других продуктов IGIV приготовлена из плазмы не менее 10 000 доноров. В настоящее время неизвестно, могут ли расширенные профили генотипов HCV в исходных пулах плазмы коррелировать с широкими нейтрализующими способностями образующихся иммунных глобулинов. Тем не менее, ввиду генетического разнообразия HCV, нейтрализующие способности и, следовательно, терапевтическая ценность HCIGIV могут быть усилены путем включения плазмы от большего числа анти-HCV-положительных доноров плазмы или путем отбора доноров, инфицированных различными Генотипы ВГС.Для решения этой проблемы требуются дальнейшие исследования.

В заключение, мы подтвердили и расширили предыдущее наблюдение Bartosch et al. (7), что нейтрализация псевдочастиц, несущих гликопротеины оболочки HCV, имеет биологическое значение, и была проведена оценка роли Nt-Abs в пассивной иммунопрофилактике гепатита C. Мы также подтвердили, что такие Nt-Abs не являются штамм-специфичными, как считалось ранее, но могут быть широко защитный. Кроме того, мы продемонстрировали, что Nt-Abs к HCV присутствовали в коммерческих иммунных глобулинах, полученных из плазмы, не прошедшей скрининг на анти-HCV, и что они внесли свой вклад в историческую безопасность этих продуктов.Наконец, скрининговые тесты на анти-HCV можно использовать для выявления единиц плазмы, содержащих Nt-Abs. Эти единицы могут быть полезны для приготовления иммунопрофилактических продуктов для предотвращения инфекции гепатита С, если могут быть разработаны защитные уровни антител и схемы введения.

H-Clinic Экспертная помощь при инфекционных заболеваниях

Антитела к вирусу гепатита С, IgG (иммуноблот)

Гепатит

Гепатит «С»

Медицинские анализы — HCV суммарные ат (качественно) анализ в Сочи

Определение суммарных антител классов M и G (anti-HCV IgG и anti-HCV IgM) к вирусу гепатита C (Hepatitis C virus) в крови

Вирус гепатита С (скрининг, анти-HCV, подтверждающий тест-маркерный спектр)

Anti-HCV-total (антитела к антигенам вируса гепатита C)

Диагностика гепатита С и тесты на ВГС: антитела, ПЦР и др.

Результаты и чего ожидать

Результаты и чего ожидать

Обследование на гепатит С | Hepatitis C Trust

Тридцать два часто задаваемых вопроса о гепатите C

Ниже приводится список часто задаваемых вопросов относительно гепатита C: обновленный 2019 г.

1. Что такое гепатит С?

2. Какие анализы крови доступны для проверки на гепатит С?

3. Можно ли получить «ложноположительный» результат теста на ВГС?

4. Можно ли получить «ложноотрицательный» результат теста на ВГС?

5. Через какое время после контакта с вирусом гепатита С положительный результат теста на антитела к вирусу гепатита С?

6. Через сколько времени после заражения ВГС положительный результат теста с помощью ПЦР?

7. Кому следует пройти обследование на гепатит С?

8. Может ли у вас нормальный уровень печеночных ферментов (например, АЛТ) и все еще есть хронический гепатит С?

9. Как человек мог заразиться гепатитом С?

10. Может ли ВГС передаваться половым путем?

11. Может ли ВГС передаваться при оральном сексе?

12. Может ли ВГС передаваться внутри домохозяйства?

14.

15. Каков риск того, что инфицированные ВГС женщины передадут ВГС своим новорожденным младенцам?

16. Следует ли посоветовать женщине с гепатитом С отказаться от грудного вскармливания?

17. Когда следует обследовать детей, рожденных от матерей с гепатитом С, на предмет заражения при рождении?

18. Как люди, инфицированные ВГС, могут предотвратить передачу ВГС другим людям?

19.Как человеку защитить себя от заражения гепатитом С и другими заболеваниями, передаваемыми через человеческую кровь?

19. Следует ли пациентам с гепатитом С изменить свою сексуальную практику, если у них есть только один постоянный постоянный половой партнер?

20. Что могут сделать люди с инфекцией ВГС, чтобы защитить свою печень?

21. Какую еще информацию следует знать пациентам с гепатитом С?

23. Встречаются ли заболевания вне печени у людей с хроническим гепатитом С?

24. Как лечить хронический гепатит С?

25. Что означает термин «генотип»?

26. Нужно ли проводить генотипирование при ведении человека с хроническим гепатитом С?

28. Каковы рекомендации по дальнейшему наблюдению медицинских работников после контакта с кровью, положительной на ВГС?

29. Следует ли ограничивать работу медицинских работников, инфицированных ВГС?

Гепатит C — Диагностика — NHS

Кому следует пройти тестирование?

Обследование на гепатит С

Тест на антитела

Тест ПЦР

Дополнительные испытания

Нейтрализующие антитела к вирусу гепатита С (ВГС) в иммунных глобулинах, полученные из анти-ВГС-положительной плазмы

Аннотация

Материалы и методы

Результаты

Обсуждение

Добавить комментарий Отменить ответ